169320. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 9-oxa-prosztánsav-származékok előállítására

5 169320 6 reakcióban felhasznált 2-oxo-heptil-foszfonsav-dimetilésztert célszerűen az E.J. Corey és munkatársai által leírt módon [J. Am. Chem. Soc. 90, 3247. (1968)] állíthatjuk elő. Az Ib képletű 9-oxa-15-oxo-proszta-8(12),10,13--transz-triénsavhoz az la általános képletű vegyület észtercsoportjának hidrolízisével juthatunk. Célszerű enzimatikus hidrolízist alkalmazni. A hidrolízis kivitelezésére előnyösen használhatunk mikrobiológiai eredetű észteráz enzimeket, például a 160109 számú magyar szabadalmi leírás szerint előállított lipáz enzimet. Az enzimes hidrolízist 7,5 - 8 pH-jú foszfátpufferben végezzük. A hidrolizálandó vegyület jobb diszpergálása céljából előnyös gumiarábikumot és taurokólsav nátriumsót adni a reakciókeverékhez. Az Ic általános képletű 9-oxa-15-hidroxi-proszta-8(12),10,13-transz-triénsav-alkilésztert az la általános képletű vegyület ketoncsoportjának redukciójával állíthatjuk elő. Az la általános képletű vegyület ketoncsoportja vizes-izopropanolos közegben 1 mól nátrium-bórhidriddel szobahőmérsékleten 2 óra alatt redukálódik. Az Id képletű 9-oxa-15-hidroxi-proszta-8(12),10,13-transz-triénsavat célszerűen az Ic általános képletű vegyület észtercsoportjának hidrolízisével állíthatjuk elő. Előnyös az la általános képletű vegyület hidrolízisével kapcsolatban ismertetett enzimes hidrolízist alkalmazni. Az Id képletű vegyület előállítható az Ib képletű vegyület ketoncsoportjának redukciójával is. A ketoncsoport redukciója a szabad karboxücsoport jelenléte miatt nagyobb alkálifém-bórhidrid felesleget igényel, vizes-izopropanolos közegben 2 mól nátrium-bórhidrid jelenlétében szobahőmérsékleten 16 óra alatt játszódik le a redukció. Az le általános képletű 9-oxa-15-aciloxi-proszta-8(12),10,13-transz-triénsav-alkilésztert a megfelelő Ic képletű vegyület hidroxilcsoportjának észterezésével állíthatjuk elő. Az észterképzést ismert módszerekkel, így savanhidridekkel és savkloridokkal egyaránt kivitelezhetjük. A hidroxilcsoport enyhe körülmények között észterezhető, így például piridines közegben szobahőmérsékleten ecetsavanhidriddel acetilezhető. A természetes prosztaglandinok gyógyászati alkalmazásának nehézségét az okozza, hogy bár biológiailag nagyon hatékony vegyületek, hatásuk nem elég szelektív és a szervezetben gyorsan lebomlanak. A találmány szerint előállított I általános képletű vegyületek biológiai tulajdonságait vizsgálva megállapítottuk, hogy egyes szervekre prosztaglandinszerűen hatnak. A gyógyászati alkalmazás szempontjából nagyon lényeges, hogy hatásuk a természetes prosztaglandinokénál szelektívebb. Értékes tulajdonságuk, hogy a prosztaglandinok szervezetben való lebomlását előidéző enzimek működését gátolják, és így az endogén prosztaglandin-szint emelkedését idézik elő. Az I általános képletű vegyületek prosztaglandinszerű hatásának bemutatására az alábbiakban a 9-oxa-15-hidroxi-proszta-8(12),10,13-transz-triénsav (Id) patkányméhen, illetve tengerimalac légcsőizomzaton kifejtett hatását hasonlítottuk össze szerv-szuperfúziós technikával [W. H. Newton: J. Physiol. (Lond.) 79, 301. (1933)]. A kísérleti eredményeket a következőkben foglaljuk össze: 5 a) vegyület Krebs-Henseleit-Ringer (0,2% glükóz tartalmú) oldatban felfüggesztett patkányméhen - melynek spontán működése nincs - vizsgálva 0,01 - 0,1 Aig/ml koncentrációban megindítja 10 a kontrakciós ritmust. b) A vegyület a méhre gyakorolt hatás szempontjából a prosztaglandinokkal szinergizmust mutat. c) Az a) pontban fiziológiás tápsóoldatban fel-15 függesztett tengerimalac légcsőizomzaton a vegyület még 5/ig/ml koncentrációban .sem okoz kontrakciót, ugyanakkor a PÇF2Q már 0,5 Mg/ml koncentrációban kifejezett hörgőizom görcsöt okoz. 20 A kísérleti eredményekből látható, hogy a méhizomra prosztaglandinszerűen hat a vegyület, ugyanakkor a légcsőizomra nem fejt ki számottevő hatást. A megfigyelt szelektivitás a terhességmegszakítás elérésében porsztaglandinokkal szemben 25 előnyt jelent. , Az I általános képletű vegyületeknek a prosztaglandin-metabolizmusban résztvevő enzimekre gyakorolt hatását a 9-oxa-15-oxo-proszta-8(12),10,13-transz-triénsav (Ib) és a 9-oxa-15-hidr-30 oxi-proszta-8(12),10,13-transz-triénsav (Id) vizsgálatakor észlelt alábbi kísérleti eredmények mutatják. a) A vizsgálat vegyületek hatását a sertéstüdőből nyert 15-hidroxi-prosztaglandin dehidrogenázra 35 M.A. Marrazzi és F.M. Matschinsky módszerével [Prostaglandins 1, 373. (1972)] mértük, és azt tapasztaltuk, hogy az enzimet 12,5//g/ml PGE2 és •400jug/ml NAD jelenlétében mérve 13-19 jug/ml koncentrációban 50%-ra gátolják. 40 b) A vizsgált vegyületek hatását a sertésplazmából nyert PGA-izomerázra R. L. Jones és munkatársai módszerével mértük [Biochim. Biophys. Acta 280, 588. (1972)], és megállapítottuk, hogy az enzimet 1,7 /ig/ml PGA2 jelenlétében 3-8 jug/ml 45 koncentrációban 50%-ra gátolják. A kísérleti eredményekből kitűnik, hogy a vizsgált vegyületek alacsony koncentrációban gátolják a prosztaglandinokat enzimes átalakítással inaktiváló dehidrogenáz és izomeráz enzimeket. 50 A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kiviteli példákat adjuk meg: 1. példa 55 9-Oxa-15-oxo-8(12),10,13-transz-triénsav-metilészter (la) előállítása a) 2-(6'-Karbometoxihexil)-furán-3-karbonsav-60 -metilészter (III) 24,4 g 9-karbometoxi-3-oxo-nonansav-metilésztert (II) 35 ml píridinben oldottunk. Az oldathoz 10 perc alatt 23,4 g 50%-os klóracetaldehidet cse-65 pegtettünk állandó keverés közben. A reakcióelegy 3