169292. lajstromszámú szabadalom • Eljárás neurohormonok elkülönítésére szarvasmarhahipotalanuszból

7 169292 8 zük 700 ml/óra sebességgel 700 ml-es frakciókat gyűjtve. A 10. frakcióban különíthető el a „K" neurohormon, a 20. frakcióban pedig az „S" neurohormon, bár az utóbbi megjelenik a 19. és a 21. frakcióban is. A 10. és a 20. frakció l-l ml-nyi mennyisége 3,5 - 5 jug „K", illetve „S" neurohormont tartalmaz. Ha a frakciókat liofilizáljuk, akkor mindegyik neurohormonból külön-külön 1000-1200 jug-ot kapunk. 3. példa Az előző példában kapott 20. frakcióból 5-5 ml-t (3,5 - 5 jug „S" neurohormont tartalmaz egy-egy adag) ampullákba töltünk, majd az ampullákat sterilizáljuk, és egy-egy ampulla aktivitását, illetve sterilitását ellenőrizzük. Klinikai gyakorlatban felhasználás előtt egy ampulla tartalmának felét 10-20 ml fiziológiás konyhasó-oldattal vagy 40%-os glűkoz-oldattal felhígítjuk, majd a hígított készítményt intravénásán beadjuk. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás a „K" és az „S" neurohormpnok elkülönítésére szarvasmarha-hipotalamuszból, azzal jellemezve, hogy szarvasmarha-hipotalamuszt 20-30 percen át 0,25 - 0,5%-os ecetsavval extrahálunk, a kapott extraktumot centrifugáljuk, a felülúszó fázisból a nagy molekulasúlyú vegyületeket szerves oldószerrel végzett kezelés útján kicsapjuk, az alacsony molekulasúlyú vegyületek visszamaradt elegyét liofilizáljuk, majd desztillált vízben feloldjuk, a vizes oldatot cellulózbázisú, 200-400 mesh szemcseméretű molekulaszűrőből 5 készült oszlopra felvisszük, az oszlopot desztillált vízzel vagy 0,25-0,5%-os ecetsavval frakcionáltan eluáljuk, végül az utolsó előtti alacsony molekulasúlyú anyagként az oszlopot elhagyó „K" neurohormont tartalmazó frakciókat és az utolsó ala-10 csony molekulasúlyú anyagként az oszlopot elhagyó „S" neurohormont tartalmazó frakciókat külön-külön összegyűjtjük, és kívánt esetben külön-külön liofilizálva megszárítjuk. 15 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás fóganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az ecetsav-oldattal végzett extrahálást 80-85 C°-on végezzük. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foga-20 natosítási módja, azzal jellemezve, hogy a centrifugálást 8 000 - 10 000 g-val végezzük. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti el-járás fóganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy szerves oldószerként etanolt és kloroformot használunk. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás továbbfejlesztése „S" neurohormont tartalmazó és koszorúértágító hatású gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy a neurohormont a gyógyszergyártásban használt hordozó- és/vagy segédanyagokkal összekeverve ismert módon gyógyászati készítménnyé alakítjuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 774100 - Zrínyi Nyomda