169253. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2. szerotipusú Herpes simplex élő vírusvakcina előállítására
13 169253 VI. táblázat 14 Inokuláció módja Csoport Dózis/állat (primer oltás) Allatok száma Túlélő állatok a primer oltás után Ráfertőzésnek ellenálló/ráfertőzött állatok száma Ráfertőzés: IC ID IM ID Kontroll I II III IV V 10S.S 104.5 10s ' 5 104,S 20 20 20 20 20 19 20 16 17 20 5/9 1/9 7/7 8/8 0/9 6/8 7/7 5/5 7/7 0/7 A ráfertőzés következtében az összes kontroll 20 egér elpusztult. Az intradermálisan immunizált egerek közül az összes egér védett lett. Azok között, amelyek a ts mutáns törzset intramuszkulárisan kapták, részleges védelem volt tapasztalható. 9 egér közül öt és 9 egér közül egy élte túl az intracereb- 25 ralis ráfertőzést az I., illetve II. csoportokban. Ugyanazokban a csoportokban, amelyek intradermals ráfertőző oltást kaptak, az állatok nagyobb fokú rezisztenciát mutattak, nyolc közül hat, illetve hét közül hét bizonyult rezisztensnek. 30 6. példa A 2. példában kapott „Herpes 2 42082" törzs 35 szuszpenzióját üveg kémcsövekbe osztjuk szét úgy, hogy kémcsövenként 103-10 s TCID S0 koncentrációt kapjunk. A kémcsövek tartalmát fagyasztva szárítjuk és lezárjuk, így egyszeri vakcina adagokat kapunk. 40 Víz hozzáadása után a feloldott vakcinát intradermálisan adjuk be, például bemetszéssel. Szabadalmi igénypontok: 45 1. Eljárás a 2. szerotípusú Herpes simplex vírus hőre érzékeny és nem patogén, NRRL 5705 és NRRL 5706 szám alatt letétbe helyezett törzseinek a 2. szerotípusú Herpes Simplex vírus patogén, 50 NRRL 5704 szám alatt letétbe helyezett törzséből történő előállítására, azzal jellemezve, hogy a fent megnevezett NRRL 5704 szám alatt letétbe helyezett Herpes simplex vírus törzset 4 és 5 közötti pH-értéken érintkezésbe hozzuk salétromossav pufferolt vizes oldatával, és az így kapott hőre érzékeny törzsek bármelyikét elsődleges nyúlvese szövetkultúrában legalább egyszeri klónozással különítjük el. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a salétromossav pufferolt vizes oldataként ecetsav-pufferrel készített salétromossav-oldatot alkalmazunk, ahol a salétromossav illetve az acetát-ion koncentrációja a reakcióközegben n, illetve n/4 és az érintkeztetést 1-15 percen át végezzük. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, az NRRL 5706 szám alatt letétbe helyezett 2. szerotípusú Herpes simplex vírus törzs előállítására, azzal jellemezve, hogy az NRRL 5704 szám alatt letétbe helyezett patogén vírus törzset 3 (± 1) percen keresztül, 4,6 (± 0,1) pH-értéken, szobahőmérsékleten, majd 8 (± 1) percen át 4,2 (± 0,1) pH-értéken, szobahőmérsékleten tartjuk érintkezésben a salétromossav pufferolt vizes oldatával. 4. Eljárás 2. szerotípusú Herpes simplex élő vírus vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti eljárással kapott NRRL 5705 és NRRL 5706 szám alatt letétbe helyezett, hőre érzékeny, nem patogén 2. szerotípusú Herpes simplex vírus törzsek bármelyikét elsődleges nyúlvese sejtkultúrában inkubáljuk 35 C° (± 1 C°)-ot meg nem haladó hőmérsékleten, majd learatjuk a keletkező vírus anyagot, és adott esetben a kapott vírus szuszpenziót fagyasztva szárítjuk. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az inkubálást 35 C° (± 1 C°) hőmérsékleten végezzük. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 774089 - Zrínyi Nyomda 7
