169253. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2. szerotipusú Herpes simplex élő vírusvakcina előállítására
9 169253 10 b) Ráfértőzéses inokulálás „Herpes 2 parental" vírussal Az összes túlélő állatot ráfertöztük intramuszkuláris úton a bal hátsó lábba 105,s TCID S0 vírussal (1 ml) a 35. napon. A tüneteket 19 napon át jegyeztük naponta, a megfertőzéstől számítva. A kapott eredményeket az S alábbi III. táblázatban adjuk meg. III. táblázat Különböző inokulumokkal immunizált és 35 nappal később intramuszkulárisan „Herpes 2 parental" vírussal ráfertőzött (10s,s TCID S0 állatonként) nyulak ideges tünetei Ideges tüneteket mutató állatok száma, ahol a tünetek súlyossága Csoport Primer immunizáláshoz használt törzs Primer inokuláció módja Túlélő állatok száma I „Herpes 2 ts 1" ID 5 n IM 5 ni „Herpes 2 parental" ID 4 IV IM 1 V + VI Kontroll ' -Megjegyzés: ID = intradermals IM = intramuszkuláris 0 1 35 Az I. csoportban nem figyeltünk meg tüneteket (egy állat elpusztult a 11. napon, szívből történő vérvétel után). A II. csoportban öt állat közül négy mutatott bizonyos fokú ideges tünetet. 40 A III. csoportban a megmaradó négy állat közül három tünetmentes maradt, egynél múló részleges bénulást figyeltünk meg a hátsó lábakban. A IV. csoportban csak egy állat maradt élve 45 (27. számú), ez a jobb hátsó lábában részleges bénulást mutatott 5 héten át az első oltás után, ugyanazokat a tüneteket mutatta a ráfertőzés utáni 9. napon újra és a 10. napra elpusztult. 50 A kontroll csoportokban 10 nyúl közül csak egy nem mutatott ideges tüneteket, az összes többi nyúl esetében különböző súlyosságú részleges vagy teljes bénulás lépett fel és közülük négy elpusztult 55 a megfertőzés utáni 10. és 15. nap közötti időszakban. IV. táblázat Csoport o g s S 35 >co <D N C «O :3 -t-> +* al CO N s cá G X •a >C3 3 -1 -1 ff § §3 Ut 03 Vírus titer/g agy minta Immunizált állatok I 1 2 4 0 0 0 x = 32 12 41 negatív negatív negatív 5 0 19 negatív II 7 + 20 negatív 9 + 30 negatív 10 + + 19 negatív Kontroll V + VI 31 + + + 10 ío2 -7 35 + + + 12 103.5 36 + + + 14 io2 -7 40 + + + 15 ío1 -7 c) Vírus visszaizolálás Kísérleteket végeztünk a vírus visszanyerésére néhány olyan állatból, amely elpusztult a ráfertőzés után, vagy amelyet leöltünk. A kapott eredményeket az alábbi IV. táblázatban adjuk meg. 60 65 Nem nyertünk vissza vírust az olyan állatok agy-állományából, amelyeket előzőleg „Herpes 2 tsl" vírussal inokuláltunk, míg a négy kontroll állat mindegyikének agy-állományában találtunk vírusokat. A vírus titer 1 g agymintára számítva 101-7 és 10 3s TCIDso volt a vírus jelenlétére megvizsgált kontroll állatokban. 5
