169159. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag aktív peptidek előállítására
29 169159 30 4. A fent leírttal egyező módon állítjuk elő a megfelelő kiindulási anyagokból az alábbi vegyületeket: A D.l.b. példában leírt módon előállított hidrazidból kiindulva: H-0-Ala-Glu-D-His-Phe-Lys- 5 -OH-acetát, Rf-érték (szilikagélen, a 4 : 0,75 : 0,25 :1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószerrendszerben): 0,16. A D.l.c, példában leírt módon előállított hidrazidból kiindulva: dezamino-Met-Glu-D-His-Phe- 10 -Lys-OH-acetát, Rf -érték szilikagélen, a fenti oldószer-rendszerben: 0,28. 5. példa 15 H-Met-D-Glu-His-Phe-dekarboxi-Lys-amid 1. Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-Phe-N| 20 H -(CH2 ) 5 -N-Boc I H H H 25 I I 3,2millimól H-Phe-N-(CH2 ) s -N-Boc -előállítva a H) példa szerint - vegyületet a 2. példa 1. szakaszában leírt módon előállított Boc-Met-D- 30 -Glu(OtBu)-His-N3 aziddal kapcsolunk. A reakcióelegyet 70 óra hosszat keverjük, majd a kondenzációs terméket a 2. példa 1. szakaszában leírt módon dolgozzuk fel és a kapott etilacetátos oldatot petroléterbe csepegtetjük, amikor is a képződött 35 amid kiválik. Hozam: 57%. A kapott termék Rf -értéke (szilikagélen, a 4:1:5 arányú Bu-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,63. 40 2. A védőcsoportok eltávolítása A fenti módon kapott tetrapeptid-amidot az előző példákban ismertetett szokásos eljárással trifluor-ecetsawal kezeljük és a kapott trifluor-ace- 45 tatot az ugyancsak ismertetett módon acetáttá alakítjuk át. Az így kapott termék Rf -értéke (szilikagélen, a 4 : 0,75 : 0,25 :1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben): 0,25. 50 6. példa H-Met-D-Glu-His-Phe-D-Arg-OH és metilésztere 55 1. Boc-Met-D-Glu-His-Phe-D-Arg-OH A 2. példa 1. szakaszában leírt módon előállított Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-N3 azidot a 2. példa 60 1. szakaszában leírt eljárás szerint kapcsoljuk az E.3. példa szerint előálhtott H-Phe D-Arg-OH-acetáttal, dimetil-formamid és víz 9 : 1 arányú elegyében. Ily módon amorf termékként kapjuk a fenti pentapeptidet, hozam: 62%. 65 A kapott termék Rf -értéke (szilikagélen, a 8 : 2 arányú benzol-etanol oldószer-rendszerben): 0,16, a 2 :0,75 :0,25 :1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben: 0,53. 2. A fent leírttal egyező módon kondenzáljuk a Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-N3 és a dezamino-Met-D-Glu(OtBu)-His-N3 azidokat az E.4. példa szerint előállított H-Phe-D-Arg-OMe észterrel. 3. A védőcsoportok eltávolítása A fenti példa 1. vagy 2. szakasza szerint előálhtott peptid 0,5 g-ját 15 ml 9:1 arányú trifluor-ecetsav-víz elegyben oldjuk, majd az elegyet 30 percig keverjük. Az így kapott trifluor-ecetsavas sót az ugyancsak már leírt eljárással acetáttá alakítjuk át és a kapott terméket az 1. példa 1. szakaszában leírt módon szilárd kálium-hidroxid-felett szárítjuk. Ily módon az alábbi acetátokat kapjuk, (a megadott Rf -értékeket szilikagélen, a 4 : 0,75 :0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer-rendszerben határoztuk meg): H-Met-D-Glu-His-Phe-D-Arg-OH-acetát, Rf = 0,17 H-Met-D-Glu-His-Phe-D-Arg-OMe-acetát, Rf = 0,29 dezamino-Met-D-Glu-His-Phe-D-Arg-OMe-acetát, Rf = 0,34. Hozamok: 80% és 88% között. 7. példa H-Met-D-Glu-His-Phe-Lys-Trp-OH és származékai 1. Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-Phe-Lys(Boc)-Trp-OH 1,87 g Boc-Met-D-Glu(OtBu)-His-N2 H 3 tripeptid-hidrazidot — amelyet az A.4. példában leírt módon áhítottunk elő - 20 ml dimetil-formamidban oldunk. Az oldatot 0 C° hőmérsékletre hűtjük és 5,94 ml tetrahidrofurános 1,566 n sósavoldatot adunk hozzá, majd az elegyet'-20 C°-ra hűtjük és 0,42 ml izoamil-nitritet adunk hozzá az azid képzése céljából. Az így kapott azidot hozzáadjuk 1,45 g H-Phe-Lys(Boc)-Trp-OH-HCl (előállítva a K.2. példa szerint) 15 ml dimetil-formamiddal készített oldatához, majd az elegy pH-értékét trietil-aminnal 7,2-re állítjuk. Az elegyet 0 C° hőmérsékleten 70 óra hosszat keverjük, majd bepároljuk, a maradékot vizes etilacetáttal felvesszük és vizes 4%-os nátrium-klorid-oldattal mossuk. Az elkülönített szerves oldószeres réteget szárítjuk és bepároljuk. A maradékhoz petrolétert adunk, ily módon 1,66 g szilárd termákét kapunk. A kapott termék Rf-értéke (szilikagélen, a 4 :0,75 : 0,25 : 1 arányú Bu-Py-Ac-víz oldószer --rendszerben): 0,85. 15
