169157. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiai hatású peptidek előállítására
13 169157 14 K) példa H-Phe-Lys(Boc)-PPA-amid előállítása 5 1. Z-Lys(Boc)-PPA 80 ml 0C°-os metilénkloridban 10,33 g (20,6 mmol) Z-Lys(Boc)-ONP-t oldunk, és az oldathoz 2,7 g 3-fenil-propilamint adunk. Az elegyet 10 1,5 órán át 0 C°-on, majd 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert lepároljuk, és a maradékot 200 ml etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos oldatot egymás után 10%-os vizes nátriumkarbonát-oldattal, 30%-os vizes nátriumklorid-oldat- 15 tal, 0,1.n vizes sósavoldattal és 30%-os vizes nátriumklorid-oldattal mossuk, majd szárítjuk, és körülbelül 80 ml végtérfogatra bepároljuk. A maradékhoz zavarosodásig étert adunk, és az elegyet hűtőszekrényben, tároljuk. 2 óra elteltével a kivált 20 csapadékot leszűrjük. , 9,2 g 78-79 C°-on olvadó Z-Lys(Boc)-PPA-t kapunk, Rf = 0,53 (szilikagél-lemezen 9 : 1 arányú benzol-etanol elegyben). 25 2. H-Lys(Boc)-PPA 8,75 g, az 1. lépésben kapott termék 120 ml metanollal készített oldatához 1,2 g 10%-os palládium/csontszén katalizátort adunk, és az elegybe 30 3,5 órán át keverés közben hidrogéngázt vezetünk. A katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. 6,4 g terméket kapunk színtelen olaj alakjában, a terméket azonnal felhasználjuk a további reakciókhoz. Rf = 0,58 (szilikagél-lemezen 7:2:1 35 arányú amilalkohol-hangyasav-víz elegyben). 3. Z-Phe-Lys(Boc)-PPA 6,39 g, a 2. lépésben előállított vegyület 68 ml 40 dimetilformamiddal készített oldatához 7,61 g Z-Phe-ONP 20 ml dimetilformamiddal készített oldatát adjuk. Az elegyet 20 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot 170 ml etilacetátban old- 45 juk, az oldatot egymás után 5%-os vizes káliumkarbonát-oldattal, 30%-os vizes nátriumklorid-oldattal, 0,1 n vizes sósavoldattal és 30%-os vizes nátriumklorid-oldattal mossuk, majd nátriumszulfát fölött szárítjuk, és körülbelül 100 ml végtérfogatra bepá- 50 roljuk. A koncentrátumot 3 napon át hűtőszekrényben tároljuk, majd a kristályos pepiidet elkülönítjük. 9,5 g 134-136 C°-on olvadó Z-Phe-Lys(Boc)-PPA-t kapunk, Rf = 0,72 (szilikagél-lemezen 8:255 arányú benzol-etanol elegyben). 4. H-Phe-Lys(Boc)-PPA 9,07 g, a 3. lépésben kapott peptid 300 ml di- 60 metilformamiddal készített oldatához 4 ml 4 n sósavoldatot és 1,5 g 10%-os palládium/csontszén katalizátort adunk, és az oldatba 3,5 óra alatt keverés közben hidrogéngázt vezetünk. A katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. 7,0 g 65 maradékot kapunk. A terméket gyakorlatilag színtelen olaj formájában kapjuk. Rf = 0,63 (szilikagél-lemezen 4:1:1 arányú^ butanol-ecetsav-víz elegyben). L) példa A K) példában leírt eljárással állítjuk elő a következő vegyületeket: 1. H-Phe-Lys(Boc)-Amf (a szintézisben kiindulási anyagként aminvegyületként amfetamint használunk), Rf = 0,60 (szilikagél-lemezen 4:1:1 arányú butanol-ecetsav-víz elegyben). 2. H-Phe-Lys(Boc)-PEA (kiindulási aminvegyületként feniletilamint használunk), Rf = 0,65 (szilikagél-lemezen 4:1:1 arányú butanol-ecetsav-víz elegyben). 3. H-Phe-Lys(Boc)-HPEA (kiindulási aminvegyületként p-hidroxi-feniletilamint használunk), Rf = 0,57 (szilikagél-lemezen, 4:1:1 arányú butanol-ecetsav-víz elegyben). M) példa H-Phe-Lys(Boc)-Phe-származékok előállítása 1. Z-Phe-Lys(Boc)-Phe-OMe 4,24 g H-Lys(Boc)-Phe-OMe-t 25 ml dimetilformamidban oldunk, és az oldathoz 4,77 g (11,4 mmól) Z-Phe-ONP-t adunk. Az elegyet körülbelül 24 órán át keverjük, majd az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot 120 ml etilacetát és 30 ml víz elegyében oldjuk, majd az etilacetátos fázist egymás után 0,1 n vizes sósavoldattal, vízzel, 5%-os vizes nátriumkarbonát-oldattal és ismét vízzel mossuk. Az etilacetátot lepároljuk, és a maradékot kevés petrolétert tartalmazó etilacetátból átkristályosítjuk. A kapott Z-Phe-Lys(Boc)-Phe-OMe Rr értéke 0,76 (szilikagél-lemezen 8 :2 arányú benzol-etanol elegyben). 2. H-Phe-Lys(Boc)-Phe-OMe 1,9 g, az 1. lépésben kapott peptid 50 ml metanollal készített oldatához 0,5 g 10%-os palládiuírj /csontszén katalizátort adunk, és az elegybe 3 órán át hidrogéngázt vezetünk. A katalizátort kiszűrjük, és a szűrlétet szárazra pároljuk. A kapott H-Phe-Lys(Boc)-Phe-OMe Rf -értéke 0,35 (szilikagél-lemezen 8 : 2 arányú benzol-etanol elegyben). 3. H-Phe-Lys(Boc)-Phe-NH2 500 mg, az 1. lépésben kapott észter metanolos oldatát ammóniával telítjük, és az elegyet 24 órán át keverjük. A Z-védőcsoportot hordozó peptid kristályosan kiválik. A védőcsoportot a 2. lépésben leírt módon lehasítjuk. A kapott H-Phe-Lys(Boc)-Phe-NH2 R r értéke 0,23 (szilikagél-lemezen 8:2 arányú benzol-etanol elegyben). Hozam: 78% (az előző lépéseket is beleértve). 7
