169119. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nem-patogén bovin rhinotracheitis vírustörzs és élő legyengített bovin rhinotracheitis virus-vakcina előállítására
MAHVAR SZABADALMI 169119 NÉPKÖZTÁRSASÁG LEÍRÁS áltfo Nemzetközi osztályozás: föf Bejelentés napja: 1973. XII. 17. (RE-544) C 12 K 9/00, 7/00. ^^ Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbsége: 1972. XII. 18.(316 178) /*^'~^nsx ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI Közzététel napja: 1976. IV. 28. í. • ••< ^ I! . ;":;;"r * U : -HIVATAL Megjelent: 1978.1. 31. •s v. i .i, i\ csi^^ Feltalálók: Zygraich Nathan állatorvos, Brüsszel, Lobmann Michéle biológus, Ceroux Mousty, Belgium Tulajdonos: Recherche et industrie Thérapeutiques, Genval, Belgium Eljárás nem-patogén bovin rhinotracheitis vírustörzs és élő legyengített bovin rhinotracheitis vírus-vakcina előállítására 1 A találmány tárgya eljárás a fertőző bovin rhinotracheitis-vírus (IBR-vírus) genetikailag stabil, nem-patogén törzsének előállítására. A találmány tárgya továbbá eljárás élő, legyengített vírus-vakcina előállítására a fenti törzsből. Élő IBR-vírus-vakcinák már eddig is ismertek voltak [J.Am. Vet. Med. Assoc. 134 (1) 29-31. (1969) és 152, 853-860 (1968)]. Ezek a vakcinák azonban kifejezett maradék patogén hatással rendelkeznek annak következtében, hogy vírus-anyagok képzése közben akadálytalanul elszaporodnak az állatok belső szerveiben, és így például vemhes teheneken spontán abortuszt váltanak ki. Korábban már ismertettek néhány eljárást hőmérsékletre érzékeny mutáns vírustörzsek előállítására, így például C. Basilico és W. K. Joklik [Virology 36, 668-677 (1968)] a WR vaccinia vírustörzs hőmérsékletre ézékeny mutánsának előállítását írták le. Meglepő módon azt találtuk, hogy ha a fertőző bovin rhinotracheitis-vírusból előre meghatározott körülmények között hőmérsékletre érzékeny mutáns törzset képezünk, majd az elkülönített hőmérsékletre érzékeny törzset heterológ sejttenyészetekben előre meghatározott körülmények között sorozattenyésztésnek vetjük alá, genetikailag stabil, nem-patogén IBR-vírustörzset kapunk. E törzs vakcinakészítésre kiválóan alkalmas, ugyanis, az eddig ismert IBR-vírus-vakcinákkal ellentétben, nem patogén. 10 15 A találmány szerint előállított vakcina további előnyös tulajdonsága, hogy kedvezően adható be. Ezek a vakcinák ugyanis intranazálisan adagolhatok, így a vakcinákban jelenlevő IBR-vírustörzs lokálisan csak az állatok felső légutaiban szaporodik el anélkül, hogy az állatok szervezetének magasabb hőmérsékletű részeiben -azaz az állatok belső szerveiben - észrevehető vírus-szaporodás lépne fel. A találmány szerinti eljárásban vakcinakészítésre alkalmas nem-patogén IBR-vírustörzs előállításához kiindulási anyagként az INVR cég (Brüsszel, Belgium) által kitenyésztett IBR 3760 törzset használjuk fel. Ezt a törzset az „United States Department of Agriculture" (Peoria, Illinois, Amerikai Egyesült Államok) intézetben NRRL 5670 számon helyeztük letétbe. A találmány szerinti eljárást tehát az jellemzi hogy az IBR 3760 (NRRL 5670) jelű fertőző 20 bovin rhinotracheitis vírusból hőmérsékletre érzékeny mutánst képezünk, a mutánst elkülöm'tjük, és ezt a hőmérsékletre érzékeny törzset heterológ sejttenyészetekben a patogenicitás megszűnéséig sorozattenyésztésnek vetjük alá. 25 A hőmérsékletre érzékeny mutáns vírustörzset a találmány szerint úgy alakítjuk ki, hogy a fertőző bovin rhinotracheitis vírust 4 és 5 közötti pH-értéken pufferolt vizes salétromossav-oldattal hozzuk érintkezésbe. Pufferolt vizes salétromossav-oldatként 30 előnyösen salétromossav ecetsav-pufferoldattal ké-169119
