169098. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-(5-amino-5-karboxivaleramido)- 3-acetoximetil-3-cefem -4-karbonsav fermentléből való kinyerésére

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1975.1.02. Nagy-Britanniai elsőbbsége: 1974.1. 03. (207/74) Közzététel napja: 1976. IV. 28. Megjelent: 1978.1.31. (LE-766) 169098 Nemzetközi osztályozás: C 12 D 9/12, C 07 D 501/12, C 07 D 501/28 >,.. Cti'HÍ ^ Feltalálók: Oppici Ernesto vegyész, Gianantonio Anacleto vegyész, Milánó, Olaszország Tulajdonos: Gruppo Lepetit S.p.A., Milánó, Olaszország Eljárás 7-( 5-amino-5-karboxivalerarnido)-3-acetoximetil-3-cefem-4-karbonsav fermentléből való kinyerésére 1 2 A találmány tárgya eljárás 7-(5-amino-5-karboxivaleramido)-3-acetoximetil-3-cefem-4-karbonsav (cefalosporin C) fermentléből való kinyerésére. Közelebbről, a találmány szerint a cefalosporin C-t in situ olyan származékká alakítjuk át, ahol az oldalláncbeli aminocsoportot p-nitro-benzoil-csoport blokkolja. Ez a származék különösen alkalmas a cefalosporin C-nek fermentléből való szerves oldószeres kivonására, mivel igen tiszta formában könnyen kinyerhető a reakcióközegből, fáradságos tisztító eljárások alkalmazása nélkül. A kinyert N-(p-nitro-benzoil)-cefalosporinC azután ismert módszerekkel könnyen átalakítható 7-amino-cefalosporánsawá. Ismeretes, hogy a cefalosporin C fermentációs úton történő előállításakor vizes oldat keletkezik, melyben a cefalosporin C kis mennyiségben található, számos más oldott anyaggal együtt, melyek közül több hasonló fizikai - és kémiai tulajdonságokkal rendelkezik. A cefalosporin C izolálására először annak a savval kezelt fermentléből közvetlenül ioncserélő gyantával történő abszorbeálásával próbálkoztak, azonban ezen közvetlen abszorpció hátránya volt, hogy a cefalosporin C-n kívül az oldatban más anionok is jelen vannak, ezért igen nagy mennyiségű anioncserélő gyantára volt szükség, és mivel ugyanakkor kloridionok eluálódtak, az eljárás további lépéseiben ezek problémákat okoztak. Másik, cefalosporin C-nek fermentlevekből történő izolálási módszer szerint például a cefalosporin C-t ktív-szénen adszorbeálták, majd eluálták, és az eluátumot adszorbeálták ioncserélő gyantán, 5 a nyers cefalosporin C-t pH 2,5 - 8,0 értékű vizes pufferoldattal eluálták, majd oldószerrel extrahálták. Ugyancsak ismeretes a nyers cefalosporin C tisztítása kristályképző sóivá, például nátrium- vagy báriumsóivá történő átalakításával, azonban ezek a 10 sók viszonylag tömény és előzőleg tisztított oldatból kristályosíthatok ki, és e sók jó vízoldhatósága következtében a kristályosítás során viszonylag nagy veszteséggel kell számolni. A 3 661 901 számú Amerikai Egyesült ÁUa-15 mok-beli szabadalmi leírás szerint a cefalosporin C-t nehézfémkomplexeiként, például cink-, réz-, nikkel-, ólom-, kobalt- vagy kadmiumkomplexként izolálják, 70-75%-os kitermeléssel. A cefalosporin C izolálásának egy másik módja 20 is ismeretes, melynek során az oldalláncon szereplő aminocsoporttal végeznek reakciót. Például a 3 573 295 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerint a cefalosporin C-t tartalmazó fermentlevet izocianátokkal acilezik, az 25 N-(N'-alkil- vagy -arilkarbamoil)-cefalosporin C-t pedig vízzel elegyedő oldószerekkel extrahálva választják el. Az eljárás szerint a kitermelés 85%-nál nagyobb nem lehet, ami azt jelenti, hogy a kitermelési értékek nem túl magasak. Hasonló a 30 helyzet a 3 573 296 számú Amerikai Egyesült 169098