168994. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszeudo-di- és triszacharidok előállítására
29 168994 30 közben 16 óra hosszat forraljuk. Lehűlés után a keveréket Amberlite IRC 50 gyantával közömbösítjük, és a 12. példában leírt módon feldolgozva 3'-dezoxigentamicin B-t kapunk. Ez a termék azonos a 12. példa szerint előállított termékkel. 14. példa 230 mg 0-[3-dezoxi-2,4-di-0-acetil-6-0-tozil-a-D-glukopiranozil-Cl^l-S^'^'-tri-O-acetil-l.S.S'-tri-N-karbobenzoxi-garamint feloldunk 60 ml telített metanolos metilamin-oldatban 0°-on, és a keveréket bombában 130°-on 17 óra hosszat melegítjük. Az oldatot bepároljuk, és a maradékhoz 45 ml vizes nátriumhidroxid-oldatot adunk, majd az oldatot visszafolyatás közben 16 óra hosszat forraljuk. A reakciókeveréket Amberlite IRC 50 gyantával közömbösítjük, a gyantát felvisszük egy oszlopra, és 1 liter vízzel mossuk. Az antibiotikumot 1,5 liter 1,5 n vizes ammóniumhidroxiddal eluáljuk, az eluátumot bepároljuk, és a maradékot 145 cm magas és 2,5 cm átmérőjű kovasavgéloszlopon kromatografáljuk. Eluensként 1:2:1 arányú kloroform-metanol-7%-os vizes-ammóniumhidroxidot használunk, így Amberlite IR401S gyantán való átbocsátás és liofilizálás után 32 mg színtelen 3'-dezoxi-6'-N-metil-gentamicin B-t kapunk. m/e 481 (M+ + 1), 6 (D2 0): 1,13 (3H, szingulett, 4"-CH 3 ), 2,25 (3H, szingulett, 6'-NCH3 ), 2,44 (3H, szingulett, 3"-NCH3 ), 5,00 (1H, dublett, J = 3,5Hz, Hj») és 5,08 ppm (1H, dublett, J = 3,5 Hz, Ht >)• 15. példa 500 mg 0-[3,4,6-tri-0-acetil-2-dezoxi-2-oximino-a-D-glukopiranozil-Cl^j-S^'^'-tri-O-acetil-l.S.S'-tri-N-karbobenzoxi-garamint feloldunk 7 ml jégecetben, hozzáadunk 1 g levulinsavat és 1 ml In sósavat, és a keveréket 18 óra hosszat 25°-on keverjük. Ezután metilénkloriddal extraháljuk, a kivonatot vizes ammóniumhidrogénkarbonát-oldattal, majd vízzel mossuk, és magnéziumszulfáton szárítjuk. Az oldatot bepároljuk, a maradékot 1 ml vizet tartalmazó 10 ml dioxánban oldjuk, és 5°-ra hűtjük. Ezután keverés közben hozzácsepegtetjük 100 mg nátriumbórhidridnek 2 ml dioxán és 4 ml víz elegyével készült oldatát, és a keverést fél óra iaosszat 5°-on és 1 óra hosszat 25°-on folytatjük. A reakciót ecetsav hozzáadásával megakasztjuk, és a keveréket bepároljuk. A száraz maradékot —70° -on 80 ml cseppfolyós ammóniában oldjuk, és hozzáadunk lg nátriumot. —70°-on való 3órai keverés után a reakciót víz hozzácsepegtetésével megakasztjuk, és az ammóniát éjjelen át elpárologni hagyjuk. A maradékhoz vizet és 200 g. »Amberlite IRC 50 gyantát adunk, és a keveréket 2 óra hosszat állni hagyjuk. A gyantazagyot egy oszlopra visszük, és előbb vízzel mossuk, majd a terméket 1,5 n ammóniumhidroxiddal eluáljuk. A bázisos eluátumot bepároljuk, és a maradékot 160 cm magas és 2,5 cm átmérőjű kovasavgéloszlopon kromatografáljuk, eluensként 1:2:1 kloroform-metanol-7%-os vizes 50 számított: C =47,19, N = 8,69, H=7,71, talált: C =46,93, N = 8,87. H = 7,82, ammóniumhidroxidot használva. így 39 mg O-a-D-glukopiranozil-(l->4)-garamint kapunk színtelen amorf termék alakjában, miután az eluenst átbossátottuk Amberlite IR401S gyantán és liofílizál-5 tuk. Elemi összetétel (%): a C19H37N3OH képlet alapján 10 m/e 484 (M+ + 1), [aß 6 +146,3° (vízben), 15 Pmax (KCl) 3300, 1050 cm"1, 6 (D2 0) 1,16 (3H, szingulett, 4"-CH 3 ), 2,47 (3H, szingulett, 3"-NCH3 ), 5,01 (1H, dublett, J = 4Hz, HlM ) és 5,12 ppm (1H, dublett, J = 3,5 Hz, Ht >). 20 [#]290 -7380 (TACu). 16. példa 500 mg 0-[3,4,6-tri-0-acetil-2-dezoxi-2-oximino-a-25 -D-glukopiranozil-(l-*4)]-5,2' 4'-tri-0-acetil-l,3,3, -tri-N-karbobenzoxi-garamint 10 ml dioxánban oldunk, az oldathoz hozzáadunk 5 g szilárd ammóniumacetátot és 2 ml 50%-os vizes ecetsavat, majd nitrogénatmoszférában keverjük. Ezután fokozatosan 30 hozzáadunk 12 ml 20%-os vizes titántriklorid-oldaíot, és a keveréket 1 óra hosszat 25°-on keverjük. Utána vizet adunk hozzá, és 3 ízben kloroformmá extraháljuk. A kloroformos kivonatot vízzel mossuk, magnéziumszulfáton szárítjuk és bepároljuk. A 35 száraz maradékhoz 10 ml dioxán és 1 ml víz elegyét adjuk, és 5°-ra hűtjük az oldatot. Ezután keverés közben lassan hozzáadjuk 100 mg nátriumbórhidridnek 4 ml víz és 2 ml dioxán elegyével készült oldatát. A keveréket fél óra hosszat 5°-on 40 és 1 ór.a hosszat 25° -on keverjük, és a hidrid feleslegét ecetsav hozzácsepegtetésével elbontjuk. Az oldatot bepároljuk, és a száraz maradékhoz cseppfolyós ammóniában nátriumot adunk a 15. példában leírt módon. így 14 mg O-a-D-gluko-45 piranozil-(l-»4)-garamint kapunk. Ez azonos a 15. példa termékével. 17. példa 500 mg 0-[3) 4,6-tri-0-acetil-2-dezoxi-2-oximino-a-D-glukopiranozil-(l-H)l-5,2',4'-tri-0-acetil-l,3,3'-tri-N-karbobenzoxi-garamint feloldunk 10 ml 1,2-dimetoxietánban, és * hozzádunk 6 csepp vizet és 55 8 csepp 70%-os perklórsavat. Ezután keverés közben hozzáadjuk 1,5 g taUium(ffl)nitrátnak 10 ml 1,2-dimetoxietánnal készült oldatát, és a keveréket 19 óra hosszat 25°-oh keverjük. Ezután kloroformmal hígítjuk, és vízzel mossuk. A kloroformos 60 kivonatot magnéziumszulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot nátriumbórhidriddel redukáljuk, és cseppfolyós ammóniában nátriummal kezeljük a . 16. példában leírt módon. így 15 mg O-a-D-glukopirandzil-(l->4)-garamint kapunk. Ez azonos a 65 „ 15. példa termékével. 15
