168890. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pszichofarmakológiailag hatásos peptidek előállítására
13 168890 14 punk, [a]hs = -8,4° (c = l, dimetilformamidban), . Rf '=.0,55 (szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol-retanol elegyben). B) Boc-GlyvGlu-(OtBu)-His-OMe 2,63 g Boc-Gly-OH-ból a 3. példa A) lépésében leírt eljárással 1,47 g Boc-Gly-Glu(OtBu>-His-OMe-t állítunk elő. Op.: 103-108 C°, [a]|,5 =-5,2° (c = 2, dimetilformamidban). Rf = 0,43 (szilikagél-rétegen, 8 :2 arányú benzol-etanol elegyben). 10 C) Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe 3,78 g Boc-Ala-OH-t 2,3 g N-hidroxi-szukcinimiddel és 4,12 g diciklohexil-karbodiimiddel reagáltatunk. A kapott aktív észtert 40 ml dimetilformamidban oldjuk, és a 3. példa A) lépésében leírt módon 9,77 g Z-Glu(OtBu)-His-OMe-ből előállított H-Glu(OtBu)-His-OMe-vel kondenzáljuk. 5,56 g terméket kapunk, op.: 97,5-101 C°, Rf = 0,36 (szilikagél-rétegen, 8 : 2 arányú benzol-etanol elegyben). D) Boc-/3-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe E) Boc-(a-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-OMe 1,83 g Boc<l-metü>alanin (op.: 118-119,5 C°) 40 ml metilénkloriddal készített oldatához 3,51 g H-Glu(OtBu)-His-OMe • 2HCl-t adunk. (Az 40 utóbbi vegyület előállítása során a megfelelő Z-peptidet 2 mólekvivalens sósav jelenlétében metanolban hidrogénezzük). Az elegyhez 2,29 ml trietilamint adunk, 0C°-ra hűtjük, majd 2,07 g N-hidroxi-szukcinimidet adunk hozzá. Az elegyet 45 -20C°-ra hűtjük, 1,86 g diciklohexil-karbodümidet adunk hozzá, 10 percig -20 C°-on, 2 órán át 0C°-on és 20 órán át 20C°-on keverjük, majd a 3. példa A) lépésében leírt módon feldolgozzuk. 3,02 g olajos terméket kapunk, Rf = 0,61 (szilika- 50 gél-rétegen, 4:1:1 arányú butanol-ecetsav-víz elegyben). F) Az A)-E) lépésekben előállított peptidészterek hidrolízise 1,15 g peptidészter 50 ml 50%-os dioxánnal készített oldatához 2,5 ml In nátriumhidroxid-oldatot adunk, és az elegyet 30 percig 20 C°-on keverjük. A reakcióelegyet pH = 7 értékre semlegesítjük, 60 majd szárazra pároljuk. A maradékot 40 ml etilacetátban felvesszük, és az oldatot 0,7 ml 2 n sósavoldattal (pH = 4) mossuk. Az etilacetátos fázist szárítjuk és szárazra pároljuk. A következő peptideket kapjuk: 65 1. Boc-Val-Glu(OtBu)-His-OH Rf =0,24 2. Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-OH Rf = 0,23 3. Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-OH Rf = 0,23 4. Boc-0-Ala-Glu(OtBu)-His-OH Rf = 0,26 5. Boc-(a-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-OH Rf = 0,25 15 Az Rf-értékeket szilikagél-rétegen, 5:3:2 arányú amilalkohol-piridin-víz elegyben határoztuk meg. Hozam: 62-70%. G) Az F) lépésben kapott peptidek védőcsoportjainak lehasítása A 3. példa F) lépésében kapott peptideket a 20 2. példa G) lépésében leírt módon trifluorecetsawal kezeljük, majd a termékeket acetátjaikká alakítjuk. A következő peptidek acetátjait kapjuk: 3,78 g Boc-0-Ala-OH-ból (op.: 77-78 C°) a 3. példa C) lépésében leírt eljárással 7,4 g Boc-0- 30 -Ala-Glu(OtBu)-His-OMe-t állítunk elő. [a]2 D 2 =-8,7° (c = 2, dimetilformamidban), Rf = 0,25 (szilikagél-rétegen, 8 : 2 arányú benzol-etanol elegyben). 1. H-Val-Glu-His-OH 25 2. H-Gly-Glu-His-OH 3. H-Ala-Glu-His-OH 4. H-0-Ala-Glu-His-OH 5. H-(a-Me)Ala-Glu-His-OH Az Rf-értékeket 4 :0,75 : 0,25 :1 arányú sav—víz elegyben mértük. Rf = 0,15 Rf = 0,15 Rf = 0,17 Rf = 0,17 Rf = 0,16 szilikagél-rétegen, butanol-piridin—ecet-35 H) Az A)-E) lépésekben kapott peptidészterek védőcsoportjainak lehasítása A 3. példa A)-E) lépéseiben kapott peptideket a 2. példa G) lépésében leírt módon kezeljük, majd a termékeket acetátjaikká alakítjuk. A következő peptidek acetátjait kapjuk: 1. H-Val-Glu-His-OMe 2. H-Gly-Glu-His-OMe 3. H-Ala-Glu-His-OMe 4. H-/3-Ala-Glu-His-OMe 5. H-(a-Me)Ala-Glu-His-OMe Rf = Rf = Rf = Rf = 0,20 0,18 0,21 0,22 Rf = 0,18 Az Rf-értékeket 4 :0,75 :0,25 :1 arányú butanol-piridin—ecetsav-víz elegyben, szilikagél rétegen mértük. 55 4. példa H<a-Me)Ala-Glu-His-R általános képletű peptidek előállítása R= -NH2 , -N(CH 3 ) 2 vagy -NHC 2 H 5 A) 0,7 g, a 3. példa E) lépésében előállított Boc-(a-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-OMe-t 20 ml hideg metanolos ammónia-oldatban oldunk. Az elegyet 20 percig keverjük, majd az ammóniát elpárologtatjuk. A maradékot metanolban felvesszük, és 7
