168824. lajstromszámú szabadalom • Eljárás piridil-csoporttal szubsztituált imidazol-származékok előállítására
7 168824 8 7. példa Tabletták 1000 db, egyenként 100 mg 2-(4-piridil)-4(5)-bróm-5(4)-trifluormetil-imidazolt tartalmazó tablettát állítunk elő az alábbi összetételű keverékből: 2-(4-piridil)-4(5)-bróm-5(4)-trifluormetil-imidazol 100 g laktóz 50 g keményítő 50 g kalciumsztearát 10 g talkum 10 g A finoman elporított komponenseket alaposan összekeverjük, majd a keveréket tab'lettázzuk. 8. példa Kemény zselatin-kapszulák 5000 db, egyenként 400 mg 2-(3-piridil-4(5)-bróm-5(4)-trifluormetil-imidazolt tartalmazó kapszulás készítményt alítunk elő az alábbi összetételű keverékből: 2-(3-piridil)-4(5)-bróm-5(4)-trifluormetil-imidazol 2000 g laktóz 3000 g magnéziumsztearát 1000 g talkum 1000 g A finoman elporított komponenseket alaposan összekeverjük, majd ismert módon kétrészes kemény zselatin-kapszulákba töltjük. 9. példa Vérnyomáscsökkentő hatás vizsgálata A vérnyomáscsökkentő hatás vizsgálata során a hatóanyagokat orálisan vagy parenterális úton spontán magas vérnyomásban szenvedő, Wistar-Okamoto fajú patkányoknak adjuk be. Az állatok farkvégi artériájába aorta-katétert helyezünk, és folyamatosan regisztráljuk az állatok artériás vérnyomását. A kísérlet alatt az állatok a ketrecekben szabadon mozoghatnak. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek intraperitoneális és orális adagolás esetén egyaránt jelentős vérnyomáscsökkentő hatást fejtenek ki. 10. példa Xantion-oxidáz-inhibitor hatás vizsgálata A találmány szerint előállított imidazol-származékok enzimgátló hatásának vizsgálatához tejből elkülönített xantin-oxidáz enzimet használunk fel. Vizsgálati anyagként milliliterenként 5—10 egységnek megfelelő mennyiségű enzimet tartalmazó, 60%-os telített ammóniumszulfát-oldattal készített szuszpenziót használunk. (1 egységnek megfelelő mennyiségű enzimet tartalmazó fenti szuszpenzió percenként 1 mikrontól xantint alakít át húgy-5 savvá.) 1 napos kísérlet végrehajtásához általában körülbelül 0,05 ml enzimet körülbelül 3 ml pufferoldattal hígítunk. Pufferoldatként 0,05 mólos Trisz-puffert (pH = 7,4) használhatunk. A vizsgálandó inhibitort pufferoldatban vagy megfelelő 10 oldószerben, például dimetilszulfoxidban oldjuk, ugyanezzel az oldószerrel hígítjuk az oldatot. A pufferoldatot, a hipoxantint és az oldószert lombikba töltjük, és az elegyet levegőabszorpció biztosítása céljából rázzuk. Ezután bemérjük a hígított 15 enzimoldatot, majd kiíró spektrofotométeren mérjük a 290 mju hullámhossznál jelentkező abszorpció növekedésének sebességét. A kísérlethez általában körülbelül percenként 0,1 abszorpciós egység-változást okozó mennyiségű enzimet, illetve 30-70%-os 20 gátlást biztosító mennyiségű inhibitort használunk fel. Az 50%-os gátlás eléréséhez szükséges inhibitor-mennyiséget (mikromólban kifejezve) a vo/Vi = f(I) függvényből grafikusan határozzuk meg,v ahol V 0 = az abszorpciónövekedés sebessége 25 inhibitor nélkül, Vt = az abszorpciónövekedés sebessége inhibitor jelenlétében, és I = az inhibitor koncentrációja. Az 50%-os gátlás eléréséhez szükséges inhibitor-mennyiség a V0/Vi = 2-höz tartozó I-érték. A vizsgált vegyületek aktivitását %-os 30 gátlás-értékekben fejezzük ki. A fenti kísérletben a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek jelentős gátló hatást mutattak. 35 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás az (I) általános képletű, piridil-csoporttal szubsztituált imidazol-származékok előállítására — ahol 40 R2 jelentése halogénatom, és R3 jelentése halogénatom vagy trifluormetil-csoport -, 45 azzal jellemezve, hogy valamely (II) általános képletű vegyületet -ahol X hidrogénatomot vagy trifluormetil-csoportot jelent, -, közömbös oldószerben egy halogénezőszerrel reagáltatunk. 50 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót -100 C° és +200 C° közötti hőmérsékleten hajtjuk végre. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 55 módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót -15 C és +150 C° közötti hőmérsékleten hajtjuk végre. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a reakciót 0-125 C°-on hajtjuk végre. 60 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy halogénezőszerként elemi halogént alkalmazunk. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy halogénezőszerként 65 N-klór-szukcinimidet alkalmazunk. 4
