168781. lajstromszámú szabadalom • Eljárás androsztánvázas szteroidok előállítására
168781 1. példa Androszt-5-en-3ß-ol-17-on-3-metil-eter előállítása koleszt-5-én-3(3-ol-3-metil-éterből Mycobacterium phlei (MNG 29) 10-napos burgonyás ferdeagaron nőtt tenyészetéből 5 ml steril vízzel szuszpenziót készítünk, melynek egy milliliterével oltunk 500 ml-es Erlenmeyer-lombikban sterilezett 100 ml alábbi összetételű táptalajt: kukoricalekvár (50% szárazanyag-tartalommal) 20 g glicerin 10 g csapvíz 1000 ml, nátrium-hidroxid oldattal 7-es pH-ra állítva sterilezés előtt. A beoltott lombikot 37 C°-on rázatva inkubáljuk 2 napig. A nyert tenyészettel 5 liter azonos összetételű táptalajt oltunk üvegfermentorban. A beoltott tenyészetet 36 órán át 37 C°-on 370/perc fordulattal kevertetjük, és közben a tenyészet felszínére percenként 5 liter steril levegőt fúvatunk. Ezután a kinőtt sejteket leülepítjük, és a felülúszó táptalajt 5 liter 0,4%-os nátrium-klorid oldatra cseréljük ki. A kapott sejtszuszpenzióhoz 50 ml acetonban oldott 1 g koleszterin-3-metil-étert adagolunk, majd a sejtszuszpenziót 3 napig a növesztéssel azonos körülmények között inkubáljuk. Ezután a sejtszuszpenziót kétszer 1/4 térfogat 1,2-diklóretánnal extraháljuk, és az extraktumot csökkentett nyomáson bepároljuk. A bepárlási maradékból a dehidroepiandroszteron-3-metil-étert preparatív vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel nyerjük ki. Adszorbens: Szilikagél G (Reanal, Budapest); futtatószer: 70% n-heptán: 30% etilacetát. A kromatográfiásan tiszta terméket metanolból átkristályosítva 204 mg dehidroepiandroszterin-3-metil-étert kapunk. Op.: 140—142 C°; [a]D 0° (c = l, kloroform). Infravörös színkép (KBr): v( =CH) 3030, vC =0 1735, vC = C1662, vC—01098 cm~'. Mágneses magrezonancia spektrum (CDC13 ): SC 18 — —CH3 0,88, 8C 19 —CH 3 1,02, 8C 3 —H 3,1, 80CH 3 3,35, 8C6 —H 5,4 ppm. Elemzési eredmény a C20 H 30 O 2 képletre (mólsúly 302,46) vonatkoztatva: számított: C% =79,4; H% = 10,00; talált: C% = 79,35; H% = 9,94. 2. példa Androszt-5-én-3 ß-ol-17-on-3-metil-eter előállítása sztigmaszt-5-en-3ß-ol-3-metil-eterbol Az átalakítást végző Mycobacterium phlei (MNG 29) törzs tenyésztésekor, a sztigmaszt-5-én-3 ß-ol-3-metil-éter mikrobiológiai átalakításánál, az átalakítás eredményeként kapott androszt-5-en-3ß-ol-17-on-3-metil-éter kinyerésekor és tisztításánál mindenben az 1. példa szerinti módon járunk el. A preparatív vékonyrétegkromatográfiás módszerrel megtisztított androszt-5-én-3ß-ol-17-on-3-metil-etert metanolból kristályosítjuk át. 1 g sztigmaszt-5-en-3ß-ol-3-metil-eterböl 146 mg androszt-5-én-3 ß-ol-17-on-3-metil-etert kapunk. 3. példa Androszt-5-én-3 ß-ol-17-on-3-etil-eter előállítása koleszt-5-en-3ß-ol-3-etil-eterbol Az átalakítást végző Mycobacterium phlei (MNG 29) törzs tenyésztésekor, a koleszt-5-én-3 ß-ol-3-etil-eter mikrobiológiai átalakításakor, az átalakítás eredményeként kapott androszt-5-en-3ß-ol-17-on-3-etil-eter kinyerésekor és tisztításánál mindenben az 1. példa szerinti 5 módon járunk el. A preparatív vékonyrétegkromatográfiás módszerrel megtisztított androszt-5-en-3ß-ol-17--on-3-etil-étert n-hexánból kristályosítjuk át. 1 g koleszt-5-én-3 ß-ol-3-etil-eterbol 186 mg androszt-5-én-3 ß-ol-17-on-3-etil-étert kapunk. 10 Op.: 145—147 C°; [oc]D + 4° (c = 1, kloroform). Infravörös színkép (KBr): v(=CH) 3020, vC =0 1734, vC = C 1660, vC—O 1098 cm" K Elemzési eredmény a C2 iH 32 0 2 képletre (mólsúly 316,49) vonatkoztatva: 15 számított: C% = 79,70; H% = 10,19; talált: C% =79,71; H% = 10,21. 4. példa 20 Androszt-5-én-3 ß-ol-17-on-3-n-propil-eter előállítása koleszt-5-en-3ß-ol-3-n-propil-eterbol Az átalakítást végző Mycobacterium phlei (MNG 29) törzs tenyésztésekor, a koleszt-5-én-3 ß-ol-3-n-propil-25 -éter mikrobiológiai átalakításakor, az átalakítás eredményeként kapott androszt-5-én-3 ß-ol-17-on-3-n-propil-éter kinyerésekor és tisztításánál mindenben az 1. példa szerinti módon járunk el. A preparatív vékonyrétegkromatográfiás módszerrel megtisztított androszt-30 -5-en-3ß-ol-17-on-3-n-propil-etert n-hexánból kristályosítjuk át. 1 g koleszt-5-en-3ß-ol-3-n-propil-eterbol 120 mg androszt-5-en-3ß-ol-17-on-3-propil-etert kapunk. Op.: 131—132 C°. 35 Infravörös színkép (KBr): v(= CH) 3022, vC = O 1730, vC =C 1665, vC—O 1110 és 1095 cm"1 . Elemzési eredmény C22 H 34 0 2 képletre (mólsúly 330,51) vonatkoztatva: számított: C% = 79,95; H% = 10,37; 40 talált: C% =79,78; H% = 10,37. 5. példa 45 Androszt-5-en-3ß-ol-17-on-3-i-propil-eter előállítása koleszt-5-en-3ß-ol-3-i-propil-eterbol Az átalakítást végző Mycobacterium phlei (MNG 29) törzs tenyésztésekor, a koleszt-5-én-3 ß-ol-3-i-propil-eter mikrobiológiai átalakításakor, az átalakítás eredmé-50 nyeként kapott androszt-5-en-3ß-ol-17-on-3-i-propil-éter kinyerésekor és tisztításánál mindenben az 1. példa szerinti módon járunk el. A preparatív vékonyrétegkromatográfiás módszerrel megtisztított androszt-5-én-3ß-ol-17-on-3-i-propil-etert n-hexánból kristályosítjuk 55 át. 1 g koleszt-5-en-3ß-ol-3-i-propil-eterbol 82 mg androszt-5-én-3 ß-ol-17-on-3-i-propil-etert kapunk. Op.: 142—143 C°. Infravörös színkép (KBr): v( =CH) 3022, vC = 0 1731, vC=C 1662, 8CH3 (az izopropil-csoportban) 1375, 60 vC—C (izopropil-vázrezgés) 1172 és 1130, vC—O 1090 és 1075 cm-1 . Elemzési eredmény a C22 H 34 0 2 képletre (mólsúly 330,51) vonatkoztatva: számított: C% = 79,95; H% = 10,37; 65 talált: C% =79,99; H% = 10,42. 3
