168778. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gentamicin-tipusú antibiotikumok előállítására
15 168778 16 IV. táblázat Gentamicinek antituberkulotikus hatása Vegyület és napi dózis Egerek fertőzés utáni élettartama napokban Értékelés 84%-os valószínűséggel Streptomicin 5 18 (15—19) Streptomicin 20 21 (18,5—23,5) jelentős Gentamicin-C 5 15,5 (12—21) Gentamicin-C 20 15,5 (12—21) Gentamicin-C! a 5 16 (14—17) Gentamicin-C! a 20 20 (18—22) jelentős Gentamicin-C2 5 19 (14—23) Gentamicin-C2 20 19 (14—23) Gentamicin-B 5 33 (29—38) igen jelentős Gentamicin-B 20 51 (38—70) igen jelentős Gentamicin-Bi 5 21,5 (19—23) igen jelentős Gentamicin-B! 20 31,0 (27—36) igen jelentős Kontroll 17,5 (16—18,5) A hatékonyabb gentamicin-B-nek a klinikai gyakorlatban legjobban bevált antituberkulotikumokkal való összehasonlítása eredményét az V. táblázat szemlélteti. Ebben a kísérletben az egereket nagyobb mennyiségű Mycobacterium-mal fertőztük, mint a IV. táblázatban leírt kísérlet esetében, de egyébként azonos kísérleti módszert alkalmaztunk, így a kezeletlen egerek előbb pusztultak el. Mivel az egyes gyógyszerekből különböző mennyiségeket adagoltunk, amelyek éppen a vegyületek mólviszonyát tükrözik, megállapítható, hogy a gentamicin-B molekula specifikus aktivitása nagyobb, mint az INH-é, és a rifampicin hatásához áll közel. Ha a fenti kísérletekből kiszámítjuk, hogy az egerek fertőzés utáni élettartamának megkettőzéséhez mennyi hatóanyag szükséges, azt kapjuk, hogy az INH esetén ez 8 mg/kg, a gentamicin-B esetén 5,5 mg/kg és a rifampicin esetén 3,1 mg/kg. V. táblázat Gentamicin-B hatékonysága egerek kísérletes tuberkulózisára Vegyület napi dózis mg/kg, s.c. Egerek fertőzés utáni átlagos élettartama napokban, 84%-os valószínűséggel INH 0,1 9 (8—9,5) INH 0,5 8,5 (7—10,5) INH 2,0 13 (10—17) INH 8,0 19,5 (16—23) Gentamicin-B 0,35 10 (9—11,5) Gentamicin-B 1,75 9,5 (8—12) Gentamicin-B 7,0 14,0 (10,5—18) Gentamicin-B 28,0 24,0 (20—28) Rifampicin 0,6 8,5 (7—10,5) Rifampicin 3,0 10,5 (8,5—13,0) Rifampicin 12,0 15,0 (9—25,0) Rifampicin 48,0 43,0 (32—58,0) Streptomicin 0,4 8,5 (7—10,5) Streptomicin 2,0 8,5 (6,5—10,5) Streptomicin 8,0 9,5 (7—12,5) Kontroll 0 8 (6,5—9,5) 10 15 20 25 A kísérletekből tehát az derül ki, hogy a gentamicin-B a jelenleg használt antituberkulotikumok többségénél hatásosabb és a rifampicinhez (amely jelenleg a leghatásosabb) hasonlító új hatóanyag, amely az eddig antituberkulotikumként alkalmazott szerekétől eltérő hatásmódja következtében a már használt szerekkel szemben rezisztens baktériumokra is hatásos. A gentamicin antibiotikumok toxicitásának jellemzésére meghatároztuk egérben egyszeri i.v. adagolás után az akut LD50 értékeket: 40 45 50 55 60 65 Gentamicin-A Gentamicin-B Gentamicin-B! Gentamicin-X Sziszomicin 250 mg/kg 340 mg/kg 340 mg/kg 240 mg/kg 40 mg/kg A gentamicin-B antituberkulotikus hatékonyságának ismeretében szubkután adagolva is összehasonlítottuk ennek toxikus tulajdonságait klinikailag alkalmazott antituberkulotikumokéval. A nyert LD50 értékek a következők : Gentamicin-B Gentamicin-C-S04 komplex Streptomicin-S04 INH 1000 mg/kg 485 mg/kg 1200 mg/kg 300 mg/kg 30 Szubakut toxicitási vizsgálatok során 10 napon át a vegyületek 100%-os hatást mutató mennyiségeinek 10-szeresét, ill. 25-szörösét adagoltuk egereknek, és a következő eredményeket nyertük: 35 Vegyület Napi dózis Eredmény Gentamicin-B 80 mg/kg s.c. Tolerábilis Gentamicin-B 200 mg/kg s.c. Tolerábilis Streptomicin-so4 400 mg/kg s.c. Tolerábilis Streptomicin-so4 1000 mg/kg s.c. Toxikus 1-szeri adagolás után is INH 80 mg/kg s.c. 20% mortalitás INH 200 mg/kg s.c. 40% mortalitás A gentamicin-B és Bt igen kilátásos antituberkulotikum, mert az eddigiektől eltérő hatásmódja és élőben is igazolható nagy specifikus aktivitása lehetővé teszi az emberi tuberkulózis gyógyítására való felhasználását akár egyedül, akár más ismert antituberkulotikumokkal kombinálva. Mivel az már korábban is ismeretes volt, hogy a gentamicin-A, -B, -Bj és X jelentős féreg- és protozoonellenes hatással rendelkeznek, így ezen anyagok különkülön vagy akár a gentamicin-C komponensekkel való megfelelő arányú keverékeik formájában igen széles spektrumú baktérium-, Mycobacterium-, Protozoon- és féregellenes hatóanyagként kerülhetnek alkalmazásra. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kivitelezési példát adjuk meg. 8
