168745. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-(p-klórbenzoil)2-metil- 5 metoxi-indol-3-il-ecetsav- triklóretilészter előállítására

168745 5 7. példa 2. Vatta granuloma Kísérleteinket 140—160 g-os hím patkányon végeztük. Éter narkózisban az állatok hátbőre alá ültettünk 5 * 25+1 mg súlyú vatta golyót, 1—1 db-ot a gerincoszlop két oldalán. A gyógyszert per os adagoltuk 7 napon keresztül. A kontroll állatok ugyanakkor csak szuszpendáló szert kaptak. A táblázatban szereplő dózisok felét délelőtt, másik felét délután kapták az állatok. A nyolca-10 dik napon az állatokat leöltük. Kioperáltuk a vattagolyókat az időközben köréjük nőtt kötőszöveti tokkal együtt, majd 5 órán át 50 C°-on szárítottuk és lemértük. Kísérleteinkben csoportonként 10—10 állat szerepelt. A gyógyszer hatását a kontroll és kezelt állatok granu-15 lóma szövetének súlykülönbségéből számoltuk. Szignifikanciát Student féle „t" teszttel értékeltük és a hatást %-ban is megadjuk. Eredményeinket a 2. táblázat tartalmazza. 4,48 g p-metoxi-fenilhidrazin-szulfonsav-nátriurnsó és 2,97 g p-klórbenzoilklorid reakciójával előállított terméket triklóretanolban oldunk és 2,8 g levulinsav-triklóretilésztert adunk hozzá. Öt órán át 80 C°-on kevertetjük. Egy éjszakán át állni hagyjuk, ezután az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A visszamaradt l-(p-klórbenzoiI)-2-metil-5-metoxi-indol-3-il-ecetsav-triklóretilésztert vízzel mossuk, majd 50 ml metanolból átkristályosítjuk. Op.: 95—97 C°. Kitermelés: 80%. Az 1 -(p-klórbenzoil)-2-metil-5-metoxi-indol-3-il-ecetsav-triklóretilészterrel végzett vizsgálatok eredményeit az alábbiakban foglaljuk össze: I. Gyulladásgátló hatás vizsgálata 1. Kaolin-ödéma Kísérleteinket 24 órán át éheztetett 110—130 g-os, csoportonként 10—10 nőstény patkányon végeztük. A vizsgálandó anyagot per os adagoltuk, a kontroll állatok hatóanyag helyett szuszpendálószert kaptak. Ezt követően egy óra múlva 0,1 ml 5%-os kaolin-szuszpenziót injiciáltunk az állatok jobb hátsó lábának talpbőre alá. Kaolin hatására a lábfej megduzzad. 2, 3,5 és 5 óra múlva megmértük a kontroll és kezelt állatok lábfejének átmérőjét. A gyógyszer hatásának mértékét a kontroll és kezelt állatok lábátmérőjének különbségéből számoltuk. A szignifikanciát a Student féle „t" teszttel értékeltük és a hatást %-ban is kifejeztük. Vizsgálati eredményeinket az 1. táblázat tartalmazza. Granulóma-szövet gátlása 2. táblázat Hatás Dózis mg/kg Granulóma-szövet Gátlás % kontroll kezelt 5,5 11 70,4 ±19,9 56,7 ±11,1 70,4 ± 19,9 52,0 ± 17,8 19,5 24,8 Toxicitás vizsgálata egéren: Kísérleteinket előzőleg nem éheztetett, 25—30 g súlyú hím egereken végeztük. A vegyületet 1% metilcellulózzal stabilizált szuszpenzióban adagoltuk per os 0,2 ml/10 g egér térfogatban. II. Fájdalomcsillapító hatás Kísérleteinkhez 15—18 g súlyú 16 órát éhezett hím egereket használtunk. A gyógyszert per os adagoltuk, a kontroll állatok csak szuszpendáló szert kaptak. Ezt követően 2, illetve 4 óra múlva 1%-os ecetsavat injiciáltunk az egerek hasüregébe 10 g egérre 0,1 ml-t. Ennek hatására néhány perc múlva rángások kezdődnek. 15 perc elteltével 20 percig számoltuk a rángások számát. A gyógyszer hatását úgy értékeltük, hogy összehasonlítottuk a kontroll és kezelt állatok rángásainak számát. Szignifikanciát a Student féle „t" teszttel számoltuk és a hatást %-ban is kifejeztük. Egy-egy kísérletet 12—16 állattal végeztünk. Eredményeinket a 3. táblázat tartalmazza. Kísérleteinket előzőleg nem éheztetett, 160—180 g súlyú hím patkányokon végeztük. Egy csoportban 20 állatot kezeltünk. A vegyületeket 1% metilcellulóz hoz-10 15 20 25 30 35 ödéma 3 36 2, 34 2, 36 2, 70 2, 43 2, 55 60 65 Kaolin-ödéma gátlása 1. táblázat Hatás Hatás Hatás Dózis 2 óra 3,5 óra 5 óra mg/kg Ödéma gátlás kontroll kezelt % Ödéma , , gátlás kontroll kezelt % ödéma , , gátlás konttoll kezelt % 13,7 34 51 2,55 ±0,25 2,28 ±0,50 10,6 2,57 ±0,17 2,39 ±0,36 9,8 2,55 ±0,25 2,27 ±0,30 11,0 2,87 ±0,55 2,46 ±0,49 13,6 2,31 ±0,49 1,86 ±0,32 19,5 2,90 ±0,36 2,35 ±0,54 19,0 2,97 ±0,34 2,54 ±0,53 15,1 2,90 ±0,36 2,26 ±0,30 22,1 3,13 ±0,70 2,47 ±0,41 22,1 2,72 ±0,43 2,05 ±0,30 24,6 3,29 ±0,34 2,56 ±0,53 22,2 3,26 ±0,31 2,77 ±0,58 15,1 3,29 ±0,34 2,48 ±0,36 24,7 3,72 ±0,62 2,72 ±0,62 29,9 3,03 ±0,54 2,23 ±0,28 26,4 10 egeret kezeltünk a 4. táblázatban feltüntetett adagokkal. Az állatokat egy alkalommal kezeltük és 7 napon át, azaz 168 órán át tartottuk megfigyelés alatt. A pusztulást naponként jegyeztük. 55 Közepes halálos adagot Lichfield és Wilcoxon módszere szerint számítottunk a kezelést követő 168 óráig elhullt állatok számának figyelembevételével. A részletes eredményeket a 4. táblázatban tüntettük fel. 60 Ulcus vizsgálata patkányokon: