168659. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-fluor-d-alanin és e vegyületet deutérium analógjának előállítására

3 168659 4 1. példa 12,1 gD-a-metil-benzilaminnak 100 ml etanollal készült hideg oldatát lassan 5,3 g fluor-piroszőlősav 250 ml etanollal készült oldatához adjuk, miközben az oldat hőmérsékletét 0 °C-on tartjuk. Az oldatot 25 C

C hőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, majd egy óra hosszat ezen a hőmérsékleten tartjuk. A kapott 2-(D-a-metil-benzilimino-3-fiuor-propionsav oldatát 2,5 atmoszféra nyomáson 5,0 g 10%-os palládiumos-szén katalizátorral hidrogénezzük; a műveletet addig folytatjuk, amíg a hidrogén-felvétel tart. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, majd a szűrletet térfogatának felére betöményítjük; ehhez 100 ml vizet adunk, majd az N-(D-a-metil-benzü)-3-fiuor-D-alanin metilbenzil-csoportját 2,5 atmoszféra nyomáson 5 g 10%-os palládium-hidroxidos-szénpor katalizátor jelenlétében hidrogenolízisnek vetjük alá. A hidrogén-felvétel befejeződése után a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk, a maradék anyagot 50%-os izopropanol—víz elegyből átkristályosítjuk, ily módon tiszta 3-fluor-D-alanint kapunk. Op.: 166—168 °C. (bomlás); [a]f? = = -9,3°(c=2;nHCl). 2. példa 12,1 g D-oc-metil-benzilaminnak 100 ml etanollal készült hideg oldatát lassan 5,3 g fluor-piroszőlősav 250 ml etanollal készült oldatához adjuk, miközben az oldat hőmérsékletét 0 °C-on tartjuk. Az oldat hőmérsékletét 25 °C-ra emeljük és ezen a hőmérsékleten tartjuk egy óra hosszat. A 2-(D-a-metil-benzilimino)-3-fluor-propionsav tartalmú oldatot 2,5 atmoszféra nyomáson 5 g 10%-os palládiumos-szénpor katalizátor jelenlétében deutériummal reagáltatjuk, a deutérium-adagolást addig folytatjuk, amíg a deutérium-felvétel tart. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, majd a szűrletet térfogatának felére bepároljuk. Ehhez 100 ml vizet adunk, majd az N-(D-a-metil-benzil)-2-deutero-3-fiuor-D-alanin tartalmú vizes etanolos oldatban a metil-benzil-csoportot szén katalizátor alkalmazásával hidrogenizáljuk. A hidrogén-felvétel megszűnte után a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk, majd a maradék anyagot 50% izopropanol—víz elegyéből, ezt követően vízből átkristályosítjuk, ily módon tiszta 2-deutero-3-fluor-D-alanint kapunk. Op.: 169 °C; [otfg = -9,2° (c=2;nHCl). 12,1 g R(D)-fenilglicinnek 100 ml etanollal készült hideg oldatát lassan 5,3 g fluor-piroszőlősav 250 ml etanollal készült oldatához adjuk, miközben az oldat hőmérsékletét 0 °C-on tartjuk. Az oldatot 25 °C hőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, majd egy óra hosszat ezen a hőmérsékleten tartjuk. A kapott R(D)-fenilglicin-3-fiuor-propionsav oldatát 2,5 atmoszféra nyomáson 5,0 g 10%-os palládiumos-szén katalizátorral hidrogénezzük; a műveletet addig folytatjuk, amíg a hidrogén-felvétel tart. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, majd a szűrletet térfogatának felére betöményítjük; ehhez 100 ml vizet adunk, majd az oldatot 2,5 atmoszféra nyomáson 5 g 10%-os palládium-hidroxidosszénpor katalizátor jelenlétében hidrogenolízisnek vetjük alá. A hidrogén-felvétel befejeződése után a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk, a maradék anyagot 50%-os izopropanol—víz elegyből átkristályosítjuk, ily módon tiszta 3-fluor-D-alanint kapunk. Op.: 166—168 °C. (bomlás); [<z]^ = 5 =-9,3°(c=2;nHCl). 12,1 g 1-amino (S)-2-[(R)-l-(hidroxi-etil)]-indolinnak 100 ml etanollal készült hideg oldatát lassan 5,3 g fluór-piroszőlősav 250 ml etanollal készült oldatához adjuk, miközben az oldat hőmérsékletét 0 °C-on tartjuk. Az ol-10 datot 25 °C hőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, majd egy óra hosszat ezen a hőmérsékleten tartjuk. A kapott oldatot 2,5 atmoszféra nyomáson 5,0 g 10%-os palládiumos-szén katalizátorral hidrogénezzük; a műveletet addig folytatjuk, amíg a hidrogén-felvétel tart. A katali-15 zátort szűréssel eltávolítjuk, majd a szűrletet térfogatának felére betöményítjük; ehhez 100 ml vizet adunk, majd a kapott elegyet 2,5 atmoszféra nyomáson 5 g 10%-os palládium-hidroxidos-szénpor katalizátor jelenlétében hidrogenolízisnek vetjük alá. A hidrogén-felvétel 20 befejeződése után a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk, a maradék anyagot 50%-os izopropanol—víz elegyből átkristályosítjuk, ily módon tiszta 3-fluor-D-alanint kapunk. Op.: 166— 168 °C (bomlás); [<xß° = - 9,3° (c = 2; n HCl). 25 Másik megoldás szerint D-aminosav-oxidáz vagy egy D-aminosav specifikus transzamináz segítségével egy D-aminosavról, mint D-alaninról, D-2-aminobutirátról, D-prolinról, D-fenil-alaninról, D-metioninról az aminő-csoportot enzimatikus úton visszük át a fluor-pirosző-30 lősavra. Az aminosavakat vagy optikailag tiszta formába, vagy L-tükörképükkel elegyítve alkalmazzuk. így például 150 [i.g/ml kristályos sertés vese D-aminosav-oxidázt adunk 0,1 mólos nátrium-pirofoszfát-pufferoldathoz, amelynek pH-ja 8,5 s amely 40 millimól ammó-35 niumszulfátot, 40 millimól 3-fluor-piroszőlősav-nátriumsót és 8 millimól D-prolint tartalmaz; a rendszert nitrogénnel átöblítve, eltávolítjuk a jelenlevő oxigént. Az elegyet 4 óra hosszat 25 °C-on inkubáljuk, az enzimet két percig 95 °C-on melegítéssel inaktiváljuk. A reakció olda-40 tot izopropanollal hígítjuk és vizes ammónia alkalmazásával a pH-t 4,8-as értékre állítjuk. A kicsapódó anyagot szűréssel eltávolítjuk, szárítjuk; ilyen módon 3--fluor-D-alanint kapunk. Op.: 169 °C [«]D= -9,2° (c=2;nHCl). Szabadalmi igénypontok 50 1. Eljárás 3-fluor-D-alanin és e vegyület deutérium analógjának előállítására, azzal jellemezve, hogy a) fluor-piroszőlősavat egy optikailag aktív D-amino-vegyülettel reagáltatunk, a keletkezett D-ketimint katalizátor jelenlétében hidrogénnel vagy deutériummal rea-55 gáltatjuk, a kapott N-szubsztituált 3-fluor-D-alanint katalizátor jelenlétében hidrogenolízisnek vetjük alá, vagy b) 3-fluor-D-alanin előállítására fluor-piroszőlősavhoz valamely D-aminosavat és D-aminosav-oxidázt vagy transzaminázt adunk. 60 2. Az 1. igénypont a) eljárásváltozatának foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy fluor-piroszőlősavat R(D)-fenilglicinnel reagáltatunk, a kapott 2-(D-a-karboxibenzil-imino)-3-fluor-propionsavat palládiumos-szénkatalizátor jelenlétében hidrogénezzük, a kapott 65 N-(D-«-karboxibenzil)-3-fluor-D-alanint palládium-2