168582. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szinezett szövetminták előállítására, hisztológiai célokra
5 168582 6 C) Utószínező oldat. Kereskedelmi forgalomban beszerezhető anyagokat, pl. eozin bázikus fukszin, pikrinsav, stb. vizes oldatát használjuk. A találmány szerinti eljárást az alábbi példák szemléltetik. 1. Példa Megfagyasztott szövetdarabokat mikrotom segítségével felszeletelünk kb. 5 mikron vastagságúra. Az egyes metszeteket külön-külön bemerítjük a rögzítő oldatba kb. 5 másodpercre, majd a B (2) színező oldatba kb. 15 másodpercre. A metszeteket 3 másodpercre desztillált vízbe merítjük, majd lítiumkarbonáttal telített oldatba mártjuk kb. 4 másodpercre. Ezt követően a mintákat azonnal újra bemerítjük a B (2) oldatba kb. 5 másodpercre. A rögzített és színezett metszeteket ezután desztillált vízzel öblítjük kb. 3 másodpercre, majd bemerítjük sorban 95%-os etanolba, tiszta etanolba, 1 sz. xilolba, 2. sz. xilolba, ahol mindegyik bemerítés kb. 2 másodpercet vesz igénybe, majd a metszetekre ráhelyezzük a fedőlapot. 2. példa Utószínezett metszetet úgy készítünk, hogy az 1. példa szerinti eljárást lefolytatjuk addig, amíg a mintadarabot a B (2) színező oldatba másodszor bemerítjük és eltávolítjuk, majd ezt követően egy 3 másodpercre desztillált vizes öblítést alkalmazunk. Ezután bemerítjük egy 95%-os etanol-oldatba 2 másodpercre, majd egy szabványos eozin oldatba mártjuk kb. 15 másodpercre. Az így utószínezett metszetet egymás után bemerítjük 95%-os etanolba, tiszta etanolba, végül xilolba, ahogyan ezt az 1. példában leírtuk. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás színezett szövetminták előállítására, hisztológiai célokra, mikroszkópiai vizsgálatokhoz, azzal jellemezve, hogy a fagyasztott szövetet 8—20 s%/térfogat arányú triklórecetsav, cinkklorid és formaldehid keverékbe mártjuk, ahol a cinkkloridnak a triklórecetsavhoz viszonyított súlyaránya kb. 2: 1—4: 1 és a formaldehidnek a triklórecetsavhoz viszonyított súlyaránya kb. 8 : 1—10: 1 és az említett komponenseket rövid szénláncú alkanol vizes oldatában használjuk, ahol az alkanol térfogataránya a teljes víztartalomhoz előnyösen 1: 1—1: 3, majd a szövetet 0,1—2% 7,116-A kiadásért felel: a Kö 76.3939.66-42 Alföldi Nyomda, -dihidrobenz[6]indeno[l,2-d]pirán-3,4,6a,9,10[6H]pentol tartalmú vizes oldatba mártjuk, mely adott esetben 0,05—1% higany(II)oxidot és/vagy kálium- illetve ammónium-alumínium-szulfátot is tartalmaz, majd 5 a mintát adott esetben legalább egy utószínezésnek vetjük alá. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy triklórecetsav, cinkklorid és formaldehid 9—11 s%/térfogat keverékét alkalmazzuk, 10 ahol a cinkklorid súlyaránya a triklórecetsavhoz előnyösen 3:1—3,5:1 és a formaldehid triklórecetsavhoz viszonyított célszerűen 8 : 1—10: 1 és a komponenseket vizes metanol-oldatban alkalmazzuk, ahol a metanolnak az összes vízmennyiségre vonatkoztatott súlyaránya kb. 15 1:1,1—1:1,5. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy 7,116-dihidrobenz[6]indeno[l,2--d]pirán-3,4,6a,9,10[6H]pentol-oldatot használunk, mely adott esetben 0,05—1% higany (II) oxidot és/vagy ká-20 Imm- illetve ammónium-alumínium-szulfátot is tartalmaz. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy a szövetmintát az említett 7,116-dihidrobenz[6]indeno[l ,2-d]pirán-3,4,6a,9,10[6H]-25 pentol-oldatba való bemerítése után legalább egy utószínezésnek vetjük alá. 5. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy az utószínezéshez m-(3,6--dihidroxi-2,4,5,7-tetrabróm-xant-9-iI)-benzoesavat (eo-30 zint) alkalmazunk. 6. A 4. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja azzal jellemezve, hogy az utószínezéshez egy (p-amino-feniI)-(p-amino-m-metil-feniI)-(p-imino-kinoil)-metán-hidrokloridot (fukszint) alkalmazunk. 35 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerint kezelt szövetet vízzel öblítjük, lítiumkarbonát vizes oldatába mártjuk és 0,1—2% 7,116-dihidrobenz[6]indeno[l,2-d]pirán-3,4,6a,9,10[6H]pentol-t tartalmazó oldatba 40 ismételten bemártjuk. 8. A 7. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az említett 7,116-dihidrobenz[6]indeno[l ,2-d]pirán-3,4,6a,9,10[6H]pentol-oIdatba való bemártás után legalább egyszeri utószínezést alkalma-45 zunk. 9. A 8. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az utószínezést m-(3,6-dihidroxi-2,4,5,7-tetrabróm-xant-9-il)-benzoesavval (eozinnal) végezzük. 50 10. A 8. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az utószínezést (p-amino-fenil)-(p-amino-m-metil-fenil)-(p-imino-kinoil)-metán-hidrokloriddal (fukszinnal) végezzük. ági és Jogi Könyvkiadó igazgatója :n — Felelős vezető: Benkő István igazgató 3