168570. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 16-fluor- és 16,16-difluor-prosztaglandin-vegyületek előállítására
27 168570 28 le. Az oldathoz 2,2 ml Jones-reagenst adunk lassú ütemben, és a reakcióelegyet —25 C° hőmérsékleten keverjük 25 percig. Ekkor 2,2 ml izopropüalkoholt adunk hozzá, és további 15 percig keverjük -25 C°-on, majd 225 ml jeges vízbe öntjük és 180 ml dietiléterrel extraháljuk. A dietiléteres extraktumot hideg káliumhidrogénkarbonát-oldattal és telített sóoldattal mossuk, azután megszárítjuk és bepároljuk. 1,27 g 16,16-difluor-PGE2 -metilészter-ll,15-bisz(tetrahidropiranil-étert kapunk olajszerű anyag alakjában. A kapott terméket 16 ml 1:3:6 arányú tetrahidrofurán-víz-ecetsav elegyben oldjuk, 40 C° hó'mérsékleten 4 órán át állni hagyjuk, azután 120 ml vízzel hígítjuk és fagyasztva szárítjuk. A maradékot feloldjuk 200 ml éterben, 100 ml 0,1 n káliumhidrogénkarbonát-oldattal, majd kétszer 100 ml sóoldattal mossuk. A vizes mosófolyadékokat egyesítjük és 100 ml éterrel extraháljuk. Az éteres extraktumot magnéziumszulfáton megszárítjuk és bepároljuk. 0,89 g sárga olajszerű anyagot kapunk, melyet metilénkloridban 100 g szilikagéllel kromatografálunk. A cím szerinti vegyületet kapjuk termékként. Az NMR spektrum abszorpciós jeleinek (CDCl3-ban) helyei 3,65, 3,6-4,55, 5,0-5,6, 5,6—5,95 5. A trimetilszilil-származék tömegspektrumában az alapcsúcs helye 546.3057. 13. példa 16,16-difluor-PGA2 -metilészter Fogamzásgátló hatás vizsgálata hörcsögön Az alábbi táblázat A oszlopában felsorolt prostaglandin vegyületeket a táblázat B oszlopában 5 felsorolt dózisokban szubkután úton adtuk be hörcsögöknek a terhesség negyedik napján. A nyolcadik napon megvizsgáltuk az állatokat a terhesség fennállása szempontjából. A táblázat C oszlopában azoknak az állatoknak a százalékos arányát közöl-10 jük, melyeknél a terhesség megszűnését tapasztaltuk. Táblázat A Vegyület B Dózis mg/hörcsög C Gátlás% 20 16-fluor-PGF2a 0,01 100 16-fluor-PGE2 0,05 37,5 16,16-difluor-25 PGF2Cr metilészter 0,01 100 150-16,16-difluor-PGF 2 a-metilészter 0,1 100 30 16,16-difluor-PGE2 -metilészter 0,01 100 35 [XVI általános képletű vegyület, C nH 2n jelentése -(CH2 ) 3 -csoport, g jelentése 3, Rj metil/\ csoport, R2 fluoratom és M jelentése H OH 40 csoport.] 45 A 12. példa szerinti módon előállított 16,16-difluor-PGE2 -metilészter 0,3 g-ját feloldjuk 0,5 ml piridint tartalmazó 12,5 ml vízmentes metilénkloridban. Az oldatot 5 C°-ra hűtjük le, és 0,5 ml trifluorecetsavanhidridet adunk hozzá, majd 35 perc múlva ugyancsak 5 C°-on 1 ml trietilamint. A reakcióelegyet 5 C°-on 2 órán át, szobahőmérsékleten újabb 2 órán át, végül 15 ml metanol hozzáadása 50 után 1,2 órán át állni hagyjuk, azután bepároljuk. A maradékot dietiléterben oldjuk, és sóoldattal, k ál iumhidrogénszulfát-oldattal, káliumhidrogénkarbonát-oldattal, végül sóoldattal mossuk. A dietiléteres extraktum megszárítása és bepárlása után 5 ^ narancs-barna színű olajat kapunk, amelyet 1 :9 arányú etilacetát-ciklohexán elegybe töltött 50 g szihkagélen kromatografálunk. Az elució után a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek Rf értéke (1 :9 arányú aceton-metilénklorid eleggyel 60 futtatva) 0,44. A trimetilszilil-származék tömegspektrumában az alapcsúcs helye 456.2507. A GDCl3 -ban felvett NMR spektrumban az abszorpciós jelek helye: 3,60, 4,25, 5,42, 5,75, 6,19 és 7,53 5. Vérnyomáscsökkentő hatás vizsgálata patkányon. Fenobarbitállal érzéstelenített, atropinnal és pentoliniummal kezelt patkányokat használtunk a vizsgálathoz. A vérnyomást egy carotis-artériába helyezett kanüllel mértük. A vizsgálandó vegyületeket oldat vagy ultrahanggal készített emulzió alakjában, intravénásán adtuk be az állatoknak, összehasonlító vegyületként egy ismert vérnyomáscsökkentő hatású PGE! vegyületet használtunk két standard dózisban. A vizsgált vegyületeknek megkerestük azt a dózisát, amely az említett két standard dózis egyikével azonos hatást vált ki, vagy hatása az összehasonlító vegyületek standard dózisai által kiváltott hatások közé esik. A vizsgált vegyületek ily módon megállapított dózisát a táblázat B oszlopában adtuk meg az összehasonlító vegyület standard dózisának százalékában kifejezve. Táblázat 65 A Vegyület B Hatásos dózis a standard dózis százalékában kifejezve 16-fluor-PGE2 16,16-difluor-PGA2 16,16-difluor-PGE2 -metilészter -metilészter 32-100 32-100 10- 32 14
