168486. lajstromszámú szabadalom • Eljárás coronavírus-szerű borjú-hasmenés-virus legyengítésére, valamint a legyengített vírust tartalmazó készítmény, főként vakcina előállítására

1! -168486 12 készített metszetben immunofluoreszcenciát tapasztaltunk. A 4. sz. borjút felgyógyulása után, 6 napos korában hasmenéses székletből vett virulens vírussal fertőztük: az állat egészséges maradt. A 6. sz. borjút orálisan kezeltük másodlagos magzati borjúvese-sejtkultúrán 19 passzázzsal készített vírus 5 ml mennyiségével: a borjún a hasmenés tünetei kifejlődtek. 12 további borjút (7.-13. és 15.-19. sz.) orálisan kezeltünk 5 ml oly készítménnyel, amelyet 13-25 10 passzázson átvitt vírussal állítottunk elő, mimellett legalább 5 passzázs a magzati borjúvese-sejtkultúra előzetesen több passzázson átvitt tenyészetével készült; i a 18. sz. borjú kivételével valamennyi állat egészséges maradt és virulens vírust tartalmazó ürülék- 15 kel történő fertőzés hatására sem alakult ki megbetegedés ezeken az állatokon. Egy inaktivált coronavírus-szerű vírust és reovírust tartalmazó kombinált vakcinát két különböző tényé- 20 szetből származó felnőtt borjakon próbáltunk ki. A vakcinát oly módon készítettük, hogy 27 passzázson átment coronavírus-szerű vírust formaiinnal inaktiváltunk és 201 passzázson (primer szarvasmarha vesesejteken) átvitt reovírus-tenyészetet ugyancsak for- 25 malinnal inaktiváltunk, majd ezt a két inaktivált vírust egyenlő mennyiségi arányban elegyítettük és az elegyhez 10% alumínium-hidroxid gélt adtunk. A kombinált vakcinával lefolytatott kísérletek 30 eredményeit az alábbi II. táblázatban foglaltuk össze. n. táblázat Pa. I. táblázatban alkalmazott jelek jelentése: D = hasmenés lépett fel: N = normális állapot. A vírus-passzázsok számában a primer és szekunder sejtkultúrákon és a passzázsolt sejteken lefolytatott összes passzázsok száma bele van számítva. /. táblázat 35 40 Borjú-vírus-passzázsok Vírus oltás Fertőző A borjak 45 sorsz. száma eredm. olt. eredm. kora (nap) 1. 14 + 0 D N 9 2. 15 + 0 N N 3 3. 16 + 0 D elpusztult — 50 4. 16 + 0 D N 6 ° 5. kontroll, fertőzéshez — D 3 >6. 19 + 0 D nem fertőzött — 7. 5 + 8 N N 4 8. 5 + 7 N N 3 55 9. 9 + 5 N N 3 55 10. 9 + 7 N N 3 11. 11+8 N N 4 12. 11+9 N N 5 13. 11 + 9 N N 5 60 14. kontroll, fertőzéshez — D 3 w 15. 11 + 11 N N 4 16. 10+11 N N 3 17. 10+12 N N 3 18. 10+15 N D 4 65 19. 10 +13 N N 4 Tehenek száma Hasmenéssel kezelt Kezelt vorjak sáma állatok % l.sz.telep 242kétszrvakinált 3 1% 85 vakcinálatlan 77 91% 2. sz. telep (a) 600 kétszer vakcinált (400 abban a pajta- 104 26% ban borjazott, ahol baktériumos fertőzés lépett fel; 200 a pajtán kívül borjzott) 10 5% (b) 350 egyszer vakcinált 17 5% 1300 vakcinálatlan 195 15% (c) 750 kétszer vakcinált 7 1% (d) 250 kétszer vakcinált 3 1% 250 vakcinálatlan 25 10% SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás coronavírus-szerű borjú-hasmenés-vírus legyengítésére az újszülöttkori, coronavírusos fertőzés által okozott hasmenésben megbetegedett borjakból vagy azok ürülékéből vett vírustartalmú anyagból, a vírus borjú-vesesejt-kultúrán történő tenyésztésével, azzal jellemezve, hogy a vírust célszerűen magzati borjú-vesesejt-kultúrán 50-60 passzázson visszük át, előnyösen 30—40°C hőmérsékleten történő inkubációval. 2. A 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy összesen 1040 paszszázst folytatunk le, mimellett ezek közül 5-10 passzázst primer vagy szekunder magzati borjúvesesejtkultúrán, a további passzázsokat pedig már előzetesen több passzázson átvitt magzati borjúvese-sejtkultúrán végezzük. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás továbbfejlesztése legyengített coronavírus-szerű borjú-hasmenés-vírust tartamazó készítmény, főként az újszülött borjak hasmenéses megbetegedésének megelőzésére és/vagy gyógykezelésére alkalmas vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy a lengyengített coronavírusszerű borjú-hasmenés-vírust magzati borjúvese-sejtkultúrán 2—7 napig tenyésztjük, majd a vírustartalmú anyagot kinyerjük, kívánt esetben a vírust valamely inaktíválószerrel inaktiváljuk és/vagy a vakcinakészítésben szokásos segédanyagokkal és/vagy más antigén hatású vagy immuniázló anyaggal elegyítjük. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy inaktíválószerként form•aldehidet alkalmazunk. 6. A 4. vagy 5. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a készítményhez valamely más antigén-hatású és/vagy a szarvasmarhákat patogén hatásokkal szemben immunizáló anyagot is adunk. 7. A 6. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a készítményhez inaktivált reovírus-szerű borjú-hasmenés-vírust tartalmazó készítményt adunk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 760344, OTH, Budapest