168293. lajstromszámú szabadalom • Eljárás magasabb B12-vitamin tartalmú fermentlé előállítására a baktérium populáció szinkronizálása útján
13 168293 14 A fermentáció MgB12 -vitamin/1 fermentlé: A fermentáció MgBi2 -vitamin/1 fermentlé: napja 5 napja 37 32 800 5 30. 36 250 38 32 200 33. ' 28 900 39 33 270 34. 35 780 43 28 152 35. 30 360 44 30 400 36. 30 800 45 32 200 10 37. 33 000 46 27 200 43. 30 500 49 30 500 44. 33 000 - 50 31 600 3. példa 5 1 hasznos térfogatú gázelvezető csonkkal ellátott kísérleti fermentorba 4500 ml, a 159 356 lajstromszámú szabadalmi leírás szerinti üzemi fermentléhez 500 ml fermentlé sűrítményt adunk, amelyet üzemi fermentlé szeparálásával nyerünk. Ennek Bi2 -vitamin tartalma 88 000;ug/l. Az így nyert dúsított fermentléhez, amelynek számított Bj2-vitamin tartalma 18 500 Mg/l, Ti0-es tápanyagmennyiséget és 75 ml metanolt (mert a fermentlé gáztermelésének platómagassága meghaladta az 1740 ml/51 x órát) adunk, majd a fermentlevet alaposan felkeverjük. A fermentáció 2. és 3. napján fementlé elvétel nincs, mindkét napon csak 75-75 ml metanolt adunk a fermentléhez. A fermentáció 4. és 10. napja között naponta 500 ml fermentlevet veszünk el és 500 ml Ti táptalajt és 75 ml metanolt adunk hozzá, (tehát félfolyamatosítjuk). A 11. (mert a pH-érték 5,5-6,0 közé csökkent) napon ismét Ti 0 táptalajt adunk a fermentléhez és ettől az időponttól kezdve a 2. példa szerint járunk el. A naponta beadagolt, metanol mennyisége 75 ml (a platómagasság az egész fermentáció során > 1740 ml/5 1 x óra). A fermentáció napi Bi2 -vitamin értéke az alábbi: T A fermentáció MgBi2 -vitamin/1 fermentlé: napja 5 22 632 6 19 320 7 20 424 10 21016 11. 21 200 12. 27 000 13. 33 400 14. 32 000 17. 36 310 20. 36 690 21. 35 548 22. 35 880 23. 30 968 26. 39 800 27. 33 450 28. 34 166 29. 36 250 15 20 A Bi 2 -vitaminnal egyenlő biológiai értékű III-as faktorral kiegészített értékek a következők: 20. napon f 28. napon ' 34. napon 49 000 44 494 49 320 4. példa \T 50 m3 hasznos térfogatú kísérleti fermentorba 25 50 m3 - a 159 356 lajstromszámú magyar szabadalmi leírás szerint termelt - üzemi fermentlevet töltünk, melynek B12 -vitamin tartalma 9936/ig/l-A kísérlet első három napján l-l m3 fermentlevet veszünk le; és 250-250 liter metanolt és 750-750 30 liter vizet táplálunk be. A negyedik napon (mert a pH-érték 5,6 és 6,0 közé csökkent) 5 m3 fermentlevet veszünk le, majd a helyébe 5m3 , az 1. példában leírt T!0 összetételű tápanyagot és 400 liter metanolt táplálunk be. A továbbiakban a 35 fermentáció 5., 6., 7., 8., 9., 11., 12., 13., 15., 16., 17., 18., 19., 20., 21., 22., 24., 25., 26., 34., 43., 47., 51., 60., 66., 72., 74., 75. napján 1 rn3 fermentlevet veszünk el és csak metanolt táplálunk be. 40 A 4., 10., 14., 23., 33., 42., 46., 50., 59., 65., 71. napokon 5 m3 fermentlé levétel és Ti 0 -es táptalaj, valamint metanol betáplálás van (mivel a pH-értéke 5,6-6,0). A további napokon 5 m3 fermentlé levétel mellett metanolt és a T10 45 táptalajadag 1/10-ének megfelelő (T, ) táptalajt adunk be. A metanol maximális adagja 750 liter, a beadható mennyiség megállapítását a gáztermelés platómagasságának mérésével és a közölt táblázat szerint végezzük. 50 A fermentáció a 46. és 75. nap között 32 748/ug/l Bi 2-vitamin/l fermentlé átlagértéket ad. (Bár a félfolyamatosítás már a 27. napon megtörtént, a méretnövelésből adódó nehézségek megoldása miatt az átlagértéket csak a 46. naptól 55 kezdve adjuk meg.) Szabadalmi igénypontok: 60 1. Eljárás magasabb B12 -vitamint tartalmazó fermentlé előállítására metántermelő vegyes baktérium populációval, anaerob, szeptikus körülmények között ismert tápanyagkomponensek és prekurzorok jelenlétében végzett fermentáció útján, azzal jelle-65 mez ve, hogy a kiindulásként használt Bi2 -vitamint 7
