168188. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-cefém-3-on- 4-karbonsav-származékok előállítására
33 168188 34 15. példa 1,59 g 7)3-(5-benzoilamino-5-difenilmetoxikarbonil-valerü-amino)-3-metilén-cefam-4a-karbonsav-dífenilmetilésztert 150 ml metilénkloridos oldatát 5 —70°-ra hűtjük és erős keverés közben 12 perc 43 másodperc ideig 0,2 mmól/perc ózont tartalmazó oxigén-ózon árammal kezeljük, majd utána 1 ml dimetilszulfidot adunk hozzá. A reakcióelegyet 5 percig —70°-on, majd 30 percig szobahőmérsék- 10 léten keverjük, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A 7/3-(5-benzoilamino-5-difenilmetoxikarbonü- va 1 e r ü-amino)-cefam-3-on-4if-karbonsav-difenilmetilésztert tartalmazó maradékot 40 ml metanolban oldjuk, jégfürdőn lehűtjük, és a sárga szín állandó- 15 sulásáig dietiléteres diazometán-oldatot adunk hozzá. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot 100 g szilikagélen kromatografáljuk. A 7/3-(5-benzoilamino-5-difenilmetoxikarbonil-valeril-amino)-3-metoxi-3-cefem-4- 20 -karbonsav-difenilmetilésztert 1 :1 arányú tolul-etilacetát eleggyel eluáljuk, és amorf termékként kapjuk. Kitermelés: 0,6,502 g. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen): Rf=0,45, toluol-etilacetát 1 :1 rendszerben. UV-abszorpciós spektrum 25 (95%-os vizes etanolban): Xván = 258 mfjt (e = 7450), 264 m/i (e = 7050) és 268 mp (e = 6700), IR-abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 5,65, 5,78, 6,03 és 6,64;u-nál. A kiindulási anyagot a következőképen állít- 30 hatjuk elő: Cefalosporin C nátriumsó 50g-jának 1500 ml 10%-os vizes dikáliumhidrogénfoszfát-oldattal készített oldatát 1200 ml acetonnal hígítjuk, és 0°-on 35 21 g benzoilkloridot adunk hozzá. Az elegyet 30 percig 0°-on és 45 percig 20°-on keverjük, miközben az oldat pH-értékét 50%-os vizes trikáliumfoszfát-oldat hozzáadásával 8,5 konstans értéken tartjuk. A reakcióelegyet térfogatának körül- 40 belül felére pároljuk be, etilacetáttal mossuk, 20%-os vizes foszforsavoldattal pH 2 értékre savanyítjuk, és etilacetáttal extraháljuk. A szerves fázist szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot ecetonból átkristályosítva az N-benzoil- 45 -cefalosporin C-t kapjuk, melynek olvadáspontja 117-119°. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen): Rf=0,37, n-butanol-ecetsav-víz 75:7,5:21 rendszerben, és Rf = 0,08 etilacetát-piridin-ecetsav-víz 62 : 21 : 6 : 11 rendszerben. 50 4,7 g N-benzoil-cefalosporin C 85 ml 0,5 mólos vizes dikáliumhidrogénfoszfát-oldattal és 9 ml dimetilformamiddal készített oldatát 4,7 g alumíniumamalgámmal 45 percen át 6,0 pH-értéken és 45° hőmérsékleten keverjük, miközben a pH-érté- 55 ket 20%-os vizes foszforsav-oldat hozzáadásával konstans értéken tartjuk. A reakcióelegyhez ezután 100 ml jeget adunk, etilacetátot rétegzünk rá és a pH-értéket 20%-os vizes foszforsav-oldattal 2,0 értékre állítjuk. A reakcióelegyet nátriumkloriddal 60 telítjük, a szerves fázist elválasztjuk és a vizes fázist kétszer etilacetáttal utánamossuk. A telített vizes nátriumklorid-oldattal mosott és nátriumszulfát felett szárított, egyesített szerves extraktumokat bepároljuk, és a maradékot etil- 65 acetátból kikristályosítjuk. Az elegyhez lassan 15 ml 2:3 arányú etilacetát-hexán elegyet adunk, 2 órás, —5°-on történő állás után leszűrjük, és 1 :4 arányú etilacetát-dietiléter elegyből történő átkristáyosítás után 82—89° olvadáspontú (bomlás közben) 7|3-(5-benzoilamino-5-karboxi-valerilamino)-3--metilén-cefam-4a-karbonsavat kapunk. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen): Rf = 0,53, n-butanol-ecetsav-víz 75:7,5:21 rendszerben, és Rf =0,08 etilacetát-piridin-ecetsav-víz 62 : 21 : 6 : 11 rendszerben. A fentiekben alkalmazott alumíniumamalgámot a következőképpen állítjuk elő: 3,3 g alumíniumpor és 100 ml 50%-os vizes nátriumhidroxid-oldat elegyét 30 másodpercig rázzuk, majd a felülúszó dekantálása után háromszor 300—300 ml vízzel mossuk. A maradékot 3 percig 130 ml 0,3%-os vizes higany-II-klorid-oldattal kezeljük, majd háromszor 300-300 ml vízzel mossuk. A teljes kezelést mégegyszer megismételjük, majd az alumíniumamalgámot háromszor tetrahidrofuránnal mossuk. A terméknek a reakcióedénybe bevitelére 15 ml etilacetátot használunk. 2,3 g 7/3-(5-benzoilamino-5-karboxi-valeril-amino)-3-metilén-cefam-4a-karbonsav 25 ml dioxánnal készített oldatához 10 perc alatt 2,5 g difenildiazometán 10 ml n-pentános oldatát csepegtetjük. A reakcióelegyet 30 percig szobahőmérsékleten melegítjük, a difenildiazometán felesleget néhány csepp jégecet hozzáadásával megbontjuk, és az oldatot csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 80 g szilikagélen kromatografáljuk, mikoris a 7(3-(5--benzoilamino-5-difenilmetoxikarbonil-valeril-amino)-3-metilén-cefem-4a-karbonsav-difenilmetilésztert 3 :1 arányú toluol-etilacetát eleggyel eluáljuk, majd ecetsavmetilészter és ciklohexán elegyéből kikristályosítjuk. Op.: 180-181°. Vékonyrétegkromatogram (szilikagélen): Rf=0,24, toluol-etilacetát 2:1 rendszerben. UV-abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): nincs jellemző sáv. IR-abszorpciós spektrum (metilénkloridban): jellemző sávok 5,66, 5,76, 5,95, 6,03, 6,64 és 6,70ju-nál. 16. példa 0,400 g 7j3-(D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-fenilacetilamino)-3-metilén-cefam-4o!-karbonsav-difenilmetilészter 40 ml metilénkloriddal készített, 0°-ra hűtött oldatát 3,6 percig 0,21 mmól ózon/perc oxigén-ózon eleggyel kezeljük, majd 0,5 ml dimetilszulfidot adunk hozzá, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A 7|3-(D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-fenilacetilamino)-cefam-3-on-4£-karbonsav-difenilmetilésztert tartalmazó maradékot 10 ml metanolban oldjuk, és a sárga szín állandósulásáig dietiléteres diazometán-oldatot adunk hozzá. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradék 0,1 g-ját preparatív vékonyrétegkromatográfiának vetjük alá szilikagélen, eluensként toluol-etilacetát 1 : 1 rendszert használva. Ennek során 0,55 Rf-értékkel a 70-(D-a-terc-butiloxikarbonilamino-a-fenil-17
