167934. lajstromszámú szabadalom • Eljárás benzolszármazékok és azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

13 167934 14 2. próba: 26 féregmentes bárányt megfertőztünk 5600 Haemonchus contortus, 5300 Trichostrongylus axei és 10 000 T. colubriformis lárvával. 22 nap múlva 22 báránynak perorálisan beadtunk 11 vizsgált hatóanyagból 15-15 mg/kg adagot, tehát vegyületenként 2-2 bárányt kezeltünk a férgek érett, kifejlett alakjai ellen. 27 nappal a fertőzés után mind a 26 bárányt leöltük, és felboncolva megállapítottuk a féregszám csökkenését a 4 kezeletlen állat féregszámához képest. Az eredményt a 3. táblázatban közöljük. 3. táblázat Hatóanyag Féregszám csökkenése, középértékek H. contortus T. axei T. colubriformis l-metoxikarbonil-3-(2-acetami-do-5-n-butil)-tiokarbamid 1 -metoxikarbonil-3-(2-amino-4-izopropoxikarbonilaminofenil)tiokarbamid l-metoxikarbonil-3-(5-n-butil-2-etoxikarbonilaminofenil)tiokarbamid l-metoxikarbonil-3-(2-dimetilamin oace tamido fenil)-tiokarbamidhidroklorid l-metoxikarbonil-3-(2-ciklopropilkarbonilamido-4-n-butilfenil)tiokarbamid l-etoxikarbonil-3-(5-izopropoxikarbonilamino-2-nitrofenil)-tiokarbamid 82,1% 97,7% 79,6% 60,0% 58,4% 53,2% 98,2% 94,6% 78,6% 78,0% 57,6% 87,1% 95,0% 83,0% 40,1% 43,4% 27,1% 27,8% A találmány szerinti eljárással készült III általános képletű vegyületeknek értékes vírus elleni hatása is van, például az emberek influenzáját okozó A2(Hong Kong) 5/68 mixovírussal szemben. A vírusfertőzés kezelésére beadott hatóanyag mennyisége függ a kísérleti állat fajától, a fertőzés természetétől és súlyosságától, a kezelés időtartamától és a beadás módjától. Általában 50-250 mg/kg perorális adag hatásos. Az adag beadható egyszerre vagy bizonyos idő alatt részletekben. Az új vegyületek vírus ellenes hatását a következő próba eredménye igazolja: 5-5 20 g súlyú egérből álló csoportoknak perorálisan beadtunk 250 mg/kg vizsgált vegyületet. 3 óra múlva minden állatot orron át megfertőztünk influenzavírussal fertőzött egerek tüdőszövetéből ultraszónikus vibrációval kapott és 1/10 arányban hígított 0,02 ml szuszpenzióval. A fertőzés után egy órával az egereknek ismét ugyanannyi vizsgált hatóanyagot 30 adtunk. A fertőzés után 24 órával az egereket leöltük, az azonos hatóanyagot kapott 5-5 egér kiboncolt tüdejét egyesítettük, és foszfáttal pufferolt fiziológiás sóoldatban ultraszonikusan szétroncsolva 10 súly%-os szuszpenziót készítettünk. 37 C°-35 on való 1 órai inkubálás és centrifugálás után a felülúszó folyadékot eltávolítottuk és sorozathígítást végeztünk 1/2-től 1/8192 koncentrációig. A vírustartalom megállapítására a hígításokhoz hozzáadtunk 0,5 súly%-os csirkevörösvértest-szuszpenzi-40 ót, és észleltük a felülúszó folyadéknak azt a legnagyobb hígítását, amelynél még képes a csirkevörösvértesteket agglutinálni (hemagglutinin-titer), és ezt összehasonlítottuk a hasonlóan fertőzött, de kezeletlen állatokra kapott megfelelő hemaggluti-45 nin-titerrel. Az eredményeket a 4. táblázat mutatja. 4. táblázat Hatóanyag Hemagglutinin-titer kezelt állat kontroll állat l-etoxikarbonil-3-[2-N-metil-N-n-butil aminoacetamido)-fenil]-tiokarbamidhidroklorid l-metoxikarbonil-3-(2-acetamido-5-izopropoxikarbonilaminofenil)-tiokarbamid l-metoxikarbonil-3-(2-acetamido-4-izopropoxikarbonilaminofenil)-tiokarbamid l-(2-klóretoxikarbonil)-3-(2-aminofenil)-tiokarbamid l-metoxikarbonil-3-(2-trimetilammóniumacetamidofenil)-tiokarbamid-jodid l-etoxikarbonil-3-(4-acetamido-2-nitrofenil)-tiokarbamid 1/4 1/256 1/128 1/4096 1/256 1/4096 1/32 1/2048 1/256 1/2048 1/256 1/2048 7