167919. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A-25822 jelű antibiotikum- komplex komponensei előállítására

7 167919 8 kevésbé hatásos vegyület, mint maga az A. Hasonlóan, a B komponens acetilszármazéka (M) a B komponensnél kevésbé hatásos. A gombák növekedésének gátlását az acetilszármazékokkal ugyanúgy foganatosítjuk, mint az alapvegyületekkel. Az 1. táblázatban az ismert agar-diffúziós módszerrel meghatározott legkisebb növekedésgátló koncentrációkat adjuk meg az A 25822 keverékre és a felsorolt organizmusokra. 1. táblázat Az A 25822 antibiotikumkeverék in vitro antimikrobiális hatása Mikroorganizmus Legkisebb növekedésgátló koncentráció Gug/ml) Staphylococcus aureus 3055 25 Streptococcus faecalis 50 Klebsiella aerobacter KA 17 50 Pasteurella multocida 10 Erwinia amylovora 6,25 Xanthomonas phaseoli 50 Candida tropicalis A 17 0,78 Trichophyton mentagrophytes 0,78 Botrytis cinerea 3,12 Fusarium oxysporum 25 Verticillium albo-atrum 1,56 A kiválasztott betegségokozó gombák in vitro érzékenységét az A 25822 keverék és az A, B és D komponensek iránt Sabouraud folyékony táptalaján, hígításos módszenei határoztuk meg. A mérést a következőképpen végezzük. Szilikonozott üvegcsövekbe hatóanyagot és Sabouraud-táptalajt töltünk úgy, hogy az egymás után következő csövekbe kétszer kevesebb hatóanyag ikerüljön. A táptalajokat homogenizált gombatenyészettel oltjuk. A beoltott tenyészeteket körkörös rázóasztalon (250 fordulat/perc) rázatjuk. Amikor az antibiotikumot nem tartalmazó kontroli-lombikban erőteljes növekedést figyelhetünk meg, megvizsgáljuk a többi tenyészetet is. A legkisebb növekedésgátló koncentráció azt a legkisebb antibiotikummennyiséget jelenti, amely mellet látható növekedés nem figyelhető meg. Ezután a legkisebb letalis koncentráció meghatározására antibiotikummentes táptalajokat oltunk azokból a tenyészetekből, amelyekben szemmel látható növekedés nincs. A 2. táblázatban megadjuk az A 25822 keverék és az A, B és D komponens legkisebb növekedésgátló és letalis koncentrációját patogén gombákkal szemben. A következő, 3. táblázatban az A 25822 antibiotikumcsoportba tartozó H, L, M és N vegyületek in vitro gombaellenes hatását mutatjuk be. A mérést agardiffúziós és agarhígításos módszerrel végeztük. A megadott értékek a gamma/ml-ben kifejezett legkisebb növekedésgátló koncentrációkat jelentik. 2. táblázat Az A 25822 antibiotikumok in vitro gombaellenes hatása Táptalajhígításos mérés A 25822 antibiotikum Candida Candida albicans albicans A 25 A 26 Cryptococcus Trichophyton neoformans metagrophytes Legkisebb növ. gátló konc. (Legkisebb letalis konc), uglml A 25822 keverék A B D 1,25/2,5 2,5/5,0 1,25/40 2,5/40 0,625/20 2,5/40 10/40 10,40 0,078/0,625 0,0156/0,625 0,156/1,25 0,0019/1,0 0,156/1,25 0,0039/1,0 1,25/5 0,5/1,0 A 25822 antibiotikum A 25822 keverék A B D (A 2. táblázat folytatása) Trichophyton rubrum Mycosporum gypseum Legkisebb növ. gátló konc. (Legkisebb letalis konc), jíg/ml 0,0156/0,0625 0,0019/0,5 0,0156/1,0 " 0,5/1,0 0,0625/0,5 0,0156/1,0 0,0156/1,0 1,0/1,0