167637. lajstromszámú szabadalom • Eszköz mikrobiológiai célra és eljárás az eszköz előállítására
167637 10 Példa Schleicher and Schuell cég által gyártott ^70. számú szűrőpapírból 3 cm x 1 cm nagyságú csikókat, éspedig 26 darabot vágunk, majd a csikókat az alábbi összetételű vizes oldattal itatjuk át; Triptóz-vér agar-agar 30 g/liter Marhahuskivonat 9 g/liter Nátrium-klorid 5 g/liter Nátrium-alginát 2 fo A vizes oldat tehát tápanyagokat és szuszpendálószert tartalmaz. Az átitatást ugy végezzük, hogy a csikókat 5 percre bemártjuk a fenti Összetételű oldatba, majd a csikókat mángorlóhengeren bocsátjuk át, és ezt követően 50 °C-on megszárítjuk. 5 % agar-agart és 0,2$ amarántvörös háttérszínezéket tartalmazó vizes oldatot a száraz átitatott csikók egyik oldalára felszórva ezután az első gélréteget kialakítjuk, A kapott, átitatott papirból és agar-agart, valamint szinezéket tartalmazó oldatból álló folyamatos átmeneti határréteget tartalmazó laminált szerkezeteket 50 °C-on mintegy egy órán át szárítjuk. A 25 csikót ötször ötös csoportokba osztjuk. Reagenseket tartalmazó, különböző összetételű gélekből álló fedőrétegeket viszünk fel hengerléssel a csikók öt csoportjára. A fedőrétegek kialakításához használt vizes oldat az alábbi összetételű: Triptóz-vér agar-agar 3° g/liter Marhahuskivonat 9 g/liter Nátrium-klorid 5 g/liter Nátrium-alginát 2 fo _ Ugyanakkor az egyes csoportok 5-5 csíkjának bevonására a vizes oldat még az alábbi gélképző anyagokat tartalmazza: 1. csoport 5 % agar-agar 2. csoport 20 % zselatin és 1,25 % agaragar 3. csoport 1 % cellulózgyanta és h % agaragar h. csoport 1 % alginát és h % agar-agar 5. csoport 1 % borjumagzatszérum és 5 % agar-agar Az öt különböző vizes oldatból felvitt fedőrétegekkel ellátott csikókat, vagyis az igy kialakított laminált szerkezeteket ezt követően 50 °C-on mintegy egy órán át szárítjuk. Ezt követően minden csoportból egy-egy csikót, azaz 5 indikátorcsikot előzetesen elkészített, milliliterenként 102 , 103 ? 10^, 105 ( illetve 10° Escherichia coli mikroorganizmust tartalmazó oldatokba mártunk, és az egyes oldatoktól függően 5-30 másodperc elteltével az indikátorcsikokat kiemeljük. A felesleges folyadékot a csikókról lefolyni hagyjuk. Az igy beoltott csikókat ezután steril lezárható tartályba, például a 6, ábrán ábrázolt 32 műanyagtartóba helyezzük, és egy éjszakát át 37 °C-on inkubáljuk. Minden egyes beoltott csikón az amarántvörös színezékkel megfestett háttérrel szemben különálló, átlátszó, kerek és domború telepek figyelhetők meg. A fedőrétegek felületén megfigyelhető telepek sűrűsége a vizsgált közegben a mikroorganizmusok sűrűségétől, továbbá a bemerités körülményeitől és az a szabványosított inkubálástól függ, A kapott felületi sűrűség a telepek eloszlását, elkülönítését és méretét illetően kielégitŐen egységes ahhoz, hogy félkvantitativ meghatározások végezhetők legyenek 102 és 105 mikroorganizmus/ml tartományban. Ilymódon kapott felületi sűrűségeket mutatunk be a 3-t ^« és 5. ábrákon, ahol a 30a, 30b és 30c telepek milliliterenként lo3, 103, 3 nietve 105 mikroorganizmust tartalmazó oldatnak megfelelő félkvantitativ eloszlások. A csikók fedőrétegének felületéről a telepek további kivánt elemzés céljára eltávolíthatók. A megmaradt csikót az 1. csoportnak megfelelő összetételű fedőréteggel latjuk el, majd 50 °C-on egy órán át száritjuk. A esik papiroldalára ezután steril vizet öntünk a vízfelvétel elérésére, és a fedőréteg felületét bekenjük Escherichia coli-val beoltott táptalajból vett mintával. A beoltott vizsgálóe^sz-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 közt ezután steril lezárható tartályban helyezzük el és egy éjszakán át 37°C-qn inkubáljuk. Az agar-agar lemezen egyébként szürke Escherichia coli különálló, átlátszó, kerek és domború telepei figyelhetők meg a fedőréteg felületén. A fedőréteg felületéről a telepek kivánt esetben további elemzés céljaira eltávolíthatók. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1, Eszköz mikrobiológóai célokra, azzal jellemezve, hogy abszorbens szövetből /20/ és arra felfekvő, lényegében száraz folyamatos gélrétegből /22/ áll, ahol az abszorbens szövetet és a gélréteget folyamatos átmeneti határréteg /2l/ kapcsolja öszsze, amely egyaránt tartalmaz szövet- és gélelemeket, 2, Az 1, igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a gélréteg zselatinból vagy agar-agarból, vagy zselatin és agar-agar keverékéből, vagy a zselatin és/vagy az agar-agar legalább egy kolloid anyaggal elkötött keverékéből van. 3, A 2. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a kolloid anyag cellulózgyanta, karragén", alginát, albumin, poliszacharid vagy polipeptid. k. Az 1, igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a gélréteg agar-agarból van. 5, Az 1. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellamezve, hogy a gélréteg agar-agar és zselatin keverékből van. 6, Az 1. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy az abszorbens szövet reagenst tartalmaz. 7, A 6. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a reagens mikrobiológiai tápanyag, szuszpendálószer vagy szinindikátor. 8, A 7. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a szuszpendálószer közömbös gyanta, karragén, alginát, poliszacharid vagy polipeptid, 9, Az 1. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a gélréteg reagenst tartalmaz, 10, A 9, igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a reagens mikrobiológiai tápanyag, 11, A 9. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a reagens szinindikátor, 12, Az 1,igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a gélréteg felett még legalább egy, lényegében száraz és folyamatos, gélből álló fedőréteg /23/ van, 13, A 12. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a fedőréteget elkotó gél zselatin vagy agar-agar, vagy zselatin és agar-agar keveréke, vagy a zselatin és/vagy az agar-agar kolloid anyaggal vagy kolloid anyagokkal alkotott keveréke, l^f, A 13. igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a kolloid anyag cellulózgyanta, karragén, alginát, albumin, poliszacharid vagy polipeptid, 15. A 12, igénypont szerint eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a fedőréteget alkotó gél agar-agar, ló. A 12, igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a fedőréteget alkotó gél agar-agar és zselatin keveréke. 17. A 12, igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a fedőréteg vagy a fedőrétegek reagenst tartalmaznak, 18, A 17, igénypont szerinti eszköz kiviteli alakja, azzal jellemezve, hogy a reagens mikrobiológiai tápanyag. 5
