167482. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polivalens bovin adenovírus vakcina előállítására
7 167482 8 2. példa A bovin adenovírusok l-es és 8-as típusú törzseit az 1. példa szerint készített 'szövettenyészetekbe oltjuk, és a vírus szaporítása alatt óránként 8-szor forgatjuk a szövettenyészeteket. Ezzel a módszerrel a vírus titere nagyobb lesz, az l-es típusú vírus titere legalább 10-4* 5 , a 8-as típusú vírus titere legalább 10-3,s lesz milliliterenként. A vírust az 1. példa szerinti módon dolgozzuk fel vakcinává. 3. példa A vírusszaporításra forgatással készített, és az üvegedény falát teljesen körbenőtt szövettenyészeteket készítünk az 1. példa szerinti sejtféleségekből. A sejtréteg kialakulása után a szövettenyészeteket a vírussal beoltjuk, és a vírusszaporítás ideje alatt óránként 5-20-szor, előnyösen 8-szor egyenletesen forgatjuk. Az l-es típusú vírus itt 10_s , a 8-as típusú vírus 10-4 titert ér el. A vírust az 1. példa szerint dolgozzuk fel inaktivált vakcinává. 4. példa Az 1., 2. vagy 3. példa szerinti módon előállított inaktivált vírushoz nagy adszorbeáló képességű anyagot, így alumíniumhidroxidgélt vagy alumíniumfoszfátot adunk 10-30 súly%, előnyösen 20 súly% mennyiségben. Az adszorbeált vakcinát állandó keverés közben megfelelő űrtartalmú üvegedényzetbe dozírozzuk. Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás polivalens bovin adenovirus vakcina előállítására szövettenyészetek felhasználásával, amelyre jellemző, hogy emlős sejtek, célszerűen borjúvesehámsejtek primer vagy szekunder tenyészeteiben elszaporítjuk a bovin adenovírusok első alcsoportjába tartozó l-es típusú, általunk borjútüdőből izolált LH/68jelű vírustörzset (deponálva az Országos Közegészségügyi Intézetben 00102 sz. alatt), amely a humán adenovírusok közös szolu-5 bilis antigénjét tartalmazza, sertésvese-hámsejt tenyészetekben is szaporítható, a sejtmagban egyetlen szabálytalan alakú magzárványt képez, és a szövettenyészetekhez egy passzázs után adaptálható, és külön elszaporítjuk borjak heréjéből, tüdejéből *0 vagy pajzsmirigyéből készített primer vagy szekunder szövettenyészetekbén a bovin adenovírusok második alcsoportjába tartozó 8-as típusú, általunk borjútüdőből izolált Misk/67jelű vírustörzset (deponálva az Országos Közegészségügyi Intézetben 15 00103 sz. alatt), amely a humán adenovírusok közös szolubilis antigénjétől eltérő szolubilis antigént tartalmaz, sertésvese-hámsejt tenyészetekben nem szaporítható, a sejtmagok 80%-ában több, szabályos alakú magzárványt képez, a szövet-2° tenyészetekhez csak 3—8 passzázs után adaptálható, majd az elszaporított két vírustípust egyenlő térfogatarányban összekeverve ismert módon inaktivált vakcinának vagy adszorbeált — csapadékos - vakcinának feldolgozzuk. 25 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, amelyre jellemző, hogy a vírustípusok szaporítására szolgáló szövettenyészeteket a sejtszuszpenzió bemérésétől kezdve a vírussal történő 30 beoltásig, majd a beoltás után a vírusszaporítás befejeztéig óránként 5-20-szor, előnyösen 8—10-szer egyenletesen forgatjuk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, inaktivált vakcina előállítására, melyre jel-35 lemző, hogy a fagyasztással feltárt vírusfolyadékot 0,1-0,4%, előnyösen 0,3% térfogat mennyiségben hozzáadott tömény vizes formaldehidoldattal inaktiváljuk. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási 40 módja adszorbeált vakcina előállítására, melyre jellemző, hogy a formaiinnal inaktivált vírus-elegyhez nagy adszorbeáló képességű anyagot, előnyösen alumímumhidroxidgélt adunk 10-30%, célszerűen 20% mennyiségben. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 766107 - Zrínyi Nyomda
