167369. lajstromszámú szabadalom • Eljárás lazac kalcitonin és származékai savaddiciós sóinak előállítására
23 6. példa EOC-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys- 5 -Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 -hexaacetat-oktahidrát Kiindulási termék: az 5. példa szerinti dotria- 10 kontapeptid. A 2. példa szerinti eljárás. Olvadáspontja 240° (bomlik), [aß 0 = 52° (c=l, 50%-os ecetsavban). Kitermelés 80%. 15 7. példa MCP-Ser-Asn-Ixm-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Glv- 20 -Lys-BOC)-Leu-Ser-Gln-Glu-(OTB)-Leu-His-Lys(BOC)-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2--trihidrát 25 1,05 g oktapeptidhidrazidot (EF3 részsorozat) —20°-on 50 ml dimetilformamid és 1,2 ml 2 n dioxános hidrogénklorid oldat elegyében oldunk. Hozzáadunk 0,116 ml terc-butilnitritet, 10 percig —20°-on keverjük, hozzáadunk 1,4 ml trietilamint, 30 3,1 g trikozapeptid-diacetátot (ABCD részsorozat) és 5 ml vizet, és 16 óra hosszat 0°-on keverjük. Szárazra pároljuk, a maradékot dietiléterrel, kloroformmal és acetonnal mossuk, az így kapott nyers pepiidet 100 ml 0,3 n ecetsavban oldjuk, 20 ml 35 acetátfázisú Amberlite—IRA-410 ioncserélő műgyantával kezeljük, és hozzáadunk 50 ml 0,6 n vizes ammóniaoldatot. Az oldatot beállítjuk 6,5pH-ra, és feltöltjük egy 0,15 n arnmóniumacetát-pufferoldattal egyensúlyba hozott, 10 cm át- 40 mérőjű és 100 cm hosszú karboximetilcellulóz oszlopra. Az eluálást növekvő koncentrációjú és pH-jú (0,15n-től 0,4 n-ig, 6,5 pH-tól 7,0pH-ig) ammóniumacetát-pufferral végezzük. A tiszta peptidet tartalmazó egyesített frakciókat háromszor liofili- 45 zárjuk, a maradékot etanollal, majd dietiléterrel mossuk, és káliumhidroxidon nagyvákuumban megszárítjuk. A cím szerinti vegyületet kapjuk. Olvadáspontja 230° (bomlik), [aß0 = -45° (c=l, 50%-os ecetsavban). Kitermelés 70%. 50 8. példa MÖP-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln—Glu-Leu—His—Lys—Leu— -Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser -Gly-Thr-Pro-NH2 -hexaacetát-oktahidrát 60 Kiindulási termék: a 7. példa szerinti dotriakontapeptid. A 2. példa szerinti eljárás. Olvadáspontja 220° (bomlik), [aß 0 = -60° (c= 1, 50%-os ecetsavban). Kitermelés 80%. 65 24 9. példa BOC-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys(BOC)-Leu-Ser-Gln-Gln-Leu-His-Lys(BOC)-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 -2CH3COOH- 3H20 Kiindulási termék: EF és ABCDl részsorozatok. Az 1. példa szerinti eljárás. Olvadáspontja 235° (bomlik), [aß 0 = -46° (c= 1, 50%-os ecetsavban). Kitermelés 70%. 10. példa H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Gln-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 • 6 CH 3 COOH • 10 H2 0 Kiindulási termék: a 9. példa szerinti dotriakontapeptid. A 2. példa szerinti eljárás. Olvadáspontja 230° (bomlik), [aß 0 =-48° (c= 1, 50%-os ecetsavban). Kitermelés 90%. 11. példa BOC-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys(BOC)-Leu-Ser-Gln-Glu(OTB)-Leu-His-Lys(BOC)-Tyr-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2 -2CH 3 COOH-3H 2 0 Kiindulási termék: EF és ABGD részsorozatok. Az 1. példa szerinti eljárás. Olvadáspontja 230° (bomlik), [aß 0 =-45° (c= 1, 50%-os ecetsavban). Kitermelés 70%. 12. példa H-Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Tyr-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2-hexaacetát-dekahidrát Kiindulási termék: a 11. példa szerinti dotriakontapeptid. A 2. példa szerinti eljárás. Olvadáspontja 216° (bomlik), [a]h° = -43° (c=l, 50%-os ecetsavban). Kitermelés 80%. 12
