167271. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az aminocsoporton alkiniloxi-karbonil-csoporttal védett aminosavak és peptidek előállítására

167271 17 18 61%-os kitermeléssel N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amidot kapunk. Az így kapott terméket 80%-os ecetsavban feloldjuk és az oldatot 2,5 órán keresztül szobahőmérsékleten 1 at hidrogénnyomáson hidrogénezzük szénre felvitt 5%-os palládium katalizátor jelenlétében, így 62%-os kitermeléssel (kapjuk a tripeptidet, L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalaninamidot. 2. példa Az 1. példa szerinti módon kapott tripeptidet ezután az I általános képletű N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonü) -L - triptofán - 2,4,5 - triklórfenilészterrel reagáltatjuk dimetilformamidban, trietilamin jelenlétében körülbelül —20 °C és 0 °C közötti hőmérsékleten, így a III általános képletű N-védett tetrapeptidet kapjuk, az N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenilalanin-amidot. Ha ezt az N-védett tetrapeptidet szénre felvitt 5%-os palládium katalizátor jelenlétében szobahőmérsékleten katalitikus hidrogenolízisnek vetjük alá, az ismert tetrapeptidet, Tetragastrint kapjuk. A fenti 1. és 2. példában az N-védett aminosav és a peptid kapcsolását az N-védett aminosav aktív észterével valósítottuk meg. A kapcsolást elvégezgezhetjük egyéb ismert módokon is, például úgy, hogy az N-védett aminosav vegyes anhidridjét reagáltatjuk a pepiiddel. 3. példa Az I általános képletű vegyületeket aminsók, például diciklohexilaminsók alakjában kapcsolhatjuk egyéb aminosavakkal vagy peptidekkel, a kapcsolási reakciót a diciklohexil-karbodiimid kondenzálószerrel valósítjuk meg. így például az N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-metionin diciklohexilaminsój át /?-benzil-L-aszparagil-L-fenilalaninmetilészter-hidrokloriddal reagáltatjuk metilénkloridban, 1 egyenérték diciklohexilkarbodiimid jelenlétében, így N-(3-metil-l-butin-3-oxikarbonil)-L-metionil-/?-benzil-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilésztert kapunk. Az így előállított védett pepiidet szénre felvitt 5%-os palládium katalizátor jelenlétében katalitikus hidrogenolízisnek vetjük alá, így az L-metionin-(/?-benzil)-L-aszparagil-L-fenilalanin-metilészter tripeptidet kapjuk, amelyet kristályos hidrokloridsó alakjában különíthetünk el. Az alábbi III. táblázatban a találmány szerinti eljárással előállított III. általános képletű peptidek példáit adjuk meg, a vegyületek elnevezésénél a IUP AC nomenklatúrát alkalmaztuk. A találmány szerinti előnyös acetilén-kötést tartalmazó védőcsoportot, a 3-metil-l-butin-3-oxikarbonii-védőcsoportot, MBOC jelöléssel jelöltük. A PBOC jelölés a 3-metil-l-fenil-l-butin-3-oxikarbonil-csoportot és az ECOC jelölés az 1-etinil-l-ciklohexil-oxikarbonil-védőcsoportot jelenti. III. táblázat Alkiniloxi-karbonil-csoporttal védett peptidek Szám Peptid 1. MBOC-L-Trp-L-Leu-metilészter 10 2. MBOC-0-t-butil-L-Ser-L-Arg-L-Arg-L-Ala-Gln-ß-t-butil-L-Asp-OH-2 HCl 3. MBOC-S-benzhidrü-L-Cys-Gly-etilészter 4. MBOC-S-tritil-L-Cys-Gly-etilészter 5. MBOC-L-Phe-S-tritil-L-Cys-Gly-etilészter 15 6. MBOC-L-Trp-L-Met-L-Asp-L-Phe-NH2 7. MBOC-L-Met-L-Asp-L-Phe-NH2 8. MBOC-L-Met-L-Asn-di-0-t-butil-L-Thr-OH 9. MBOC-L-Phe-L-Val-L-Gln-L-Trp-L-Leu-L-Met-L-Asn-di-O-t-butil-L-Thr-OH 20 10. MBOC-L-Phe-L-Val-L-Gln-L-Trp-L-Leu-OH 11. PBOC-L-Met-L-Asn-di-0-t-butil-L-Thr-OH 12. ECOC-L-Met-L-Asn-di-0-t-butil-L-Thr-OH 13. MBOC-0-t-butil-L-Ser-L-Arg-L-Arg-L-Ala-L-Gln-L-Trp-L-Leu-L-Met-L-Asn-di-O-t-25 -butil-L-Thr-OH-2 HCl 14. MBOC-O-t-butil-L-Ser-L-Ala-L-Glu-L-Ala-L-Phe-L-Pro-L-Leu-Glu-L-Phe-OH 15. MBOC-S-benzil-L-Cys-O-t-butil-L-Ser-L-Asn-L-Leu-O-t-butil-L-Ser-L-Thr-OH 30 16. MBOC-L-His-L-Ser-L-Asp-Gly-L-Thr-L-Phe-L-Thr-L-Ser-L-Glu-L-Leu-L-Ser-L-Arg-L-Leu-L-Arg-L-Asp-OH 17. MBOC-L-Lys-L-Arg-L-Pro-L-Pro-Gly-L-Phe-L-Ser-L-Pro-L-Phe-L-Arg-OH 35 18. MBOC-O-t-btuil-L-Tyr-O-t-butil-L-Ser-E-t-BOC-L-Lys-O-t-But-L-Tyr-L-Leu-O-t-butil-L-Asp-OH 40 Ha a fenti táblázatban felsorolt alkinil-oxi-karbonil-csoporttal védett peptideket a fentiekben ismertetett módon katalitikus hidrogenolízisnek vetjük alá, kitűnő hozammal kapjuk a peptideket. így például a 6. számú N- védett tetrapeptidet 45 hidrogenolízisnek vetve alá, 66%-os kitermeléssel kapjuk a Tetragastrint. Ha a III. táblázat 11. és 12. sorában fe[sorolt N-védett tripeptideket katalitikus hidrogenolízis-50 nek vetjük alá, 60%-osnál nagyobb kitermeléssel kapjuk a glükagon 27—29. peptid fregmenseit. Ezt korábban 48%-os kitermeléssel szintetizálta Wunsch E. és munkatársai, Chem. Ber. 98, 803 (1965). 55 A táblázat 10. sorában felsorolt N-védett pentapeptid hidrogenolízisével kitűnő kitermeléssel kapjuk a glükagon 22—26. fragmensét, valamint a 9. sorban felsorolt pepiidből a 22—29. oktapeptid fregmensét. 60 4. példa A glükagon 22—26. peptid fregmensét az alábbi 65 módon állítjuk elő. N-(3-metil-l-butin-3-oxikar-9