167270. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-acilamino-3-metil-cef-3-ém-4-karbonsavkomplexek előállítására
167 270 9 10 30 percen át kevertetjük. Amikor a kivált cefalexin-bisz-(DMF) kristályok olyan méretűek lesznek, hogy jó szűrést biztosítanak, az anyalúg pH-ját 6,0-ra állítjuk, majd 15 percen át kevertetjük. Ezután a pH-t 6,9-re állítjuk, újabb 15 percen át kevertetjük és szűrjük az elegyet. A szűrési idő 45 perc. Az adhéziós folyadékokat háromszori (15 liter) DMF-os és kétszeri (15 liter) etilacetátos mosással távolítjuk el. A kristályos cefalexin-bisz-(DMF) terméket szárítjuk; súlya 7,568 kg, színe fehér. Az ultraibolya (264 ráfi) analízis szerint cefalexin-bázis tartalma 71,7%. Az elméleti cefalexin termóksúly 6,3 kg, a tényleges hozam 86,1%. A diazotálható nitrogéntartalom kb. lOOOjMg/ml; a 7—ADCA-tartalom 0,14%. 4. példa Az 1—3. példában leírt módon nyert cefalexin-bisz-(DMF)-szolvát egyesített keverékét (19,4 kg cefalexin zwitterion) 247 liter DMF és 28 liter desztillált víz elegyében oldjuk. Az elegy pH-ját először sósavval 2,0-re állítjuk, majd ammóniumhidroxiddal 6,9-re. Ezután szűrjük (Büchner-tölcséren), majd két részletben 100%-os DMF-dal mossuk (18 liter/rész). Mintavétel után (0,901) kg a részben tisztított cefalexin-bisz-(DMF)-komplexet sav segítségével 247 lit=r DMF és 28 liter víz elegyében újra oldjuk. A pH-t ammóniumhidroxiddal 6,9-re állítjuk. Szűrés után összegyűjtjük a terméket — a eefalexin-bisz-(DMF)-komplexet — ós kétszer 15 liter DMF-dal, majd 15 és 12 liter etilacetáttal mossuk. A tisztított cefalexin-bisz-(DMF)-komplexet ezután szárítjuk. A teljes súly 24,0 kg és 115 g mintákra. Az ultraibolya (264 m/i) módszerrel mért falexin-bázis tartalom 70,0%. A diazotálható nitrogén-koncentráció kb. 300/ig/ml; a tényleges hozam 90,0%. 5. példa A 7—ADCA p-nitrobenzilószterét acetecetsav-metilészterrel enaminként védett vagy blokkolt aminocsoportot tartalmazó D-2-amino-2-(2'-tienil)-ecetsav valamely vegyes anhidridjével acilezzük. A kapott oldatot p-toluolszulfanosavval kezeljük, ezzel eltávolítjuk az enamincsoportot és kikapcsoljuk a 3-metil-7-(D-2-amino-2-(2'-tienil)-acetamido-Zl3-cefem-4-karbonsav-p-nitrobenzilésztert. A fenti észter sósav segítségével DMF-ban oldjuk és savas közegben fém-cinkkel eltávolítjuk, az észtercsoportot. A pH-nak ammóniumhidroxiddal történő emelésével kicsapjuk az oldatból a 3-metil-7--(D-2-amino-2-(2'-tienil)-acetamido]-Zl3 -cefem-4--karbonsav-bisz-(DMF)-komplexet. Ezt a komplexet savas kémhatású vízben oldjuk (pH 1—2), felmelegítjük 50—60 °C-ra, majd a pH-t bázis-adagolással emelve kicsapjuk az oldatból a 3-metil-7-[D-2-amino-2-(2'-tienil)-acetamido]/d3 -cefem-4-karbonsavat zwitterion formájában. Ezt a vegyületet elválasztjuk a reakcióelegytől, ha szükséges, mossuk, majd szárítjuk. A kapott termék a 3 352 858 számú USA-beli szabadalmi leírásban leírt, jól ismert antibiotikum. 6. példa D-a-(4'-hidroxifenil)-a-(terc-butoxikarbonil-amino)-ecetsav és 2,6 lutidin tetrahidrofuránnal ké-5 szült oldatához klórhangyasav-etilésztert adagolunk, ezzel a 3 489 752 számú Amerikai Egyesült Allamok-beli szabadalmi leírás 2. példája szerinti vegyes anhidridet kapjuk. Ehhez az oldathoz a 7—ADCA p-nitrobenzilészterét adjuk, így 3-metil-10 -7-(D-oc-(4/ -hidroxifenil)-a-(terc-butoxikárbonilamino)-acetamido)-Zl3 -cefem-4-karbonsav p-nitrobenzilésztert kapunk. Ezt az észter DMF-ban oldjuk és az 1. példa szerinti eljárás alapján eltávolítjuk az észter- és terc-15 -butoxikarbonil-csoportot és 3-metil-7-[D-a-(4'-hidroxifenil)-oc-amminoacetamido]-Zl3 -cefem-4-karbonsavat kapunk. Az oldat pH-jának bázissal történő emelésével kicsapjuk a fenti vegyület DMF-komplexét. A komplexet az 5. példa szerinti eljárás 20 alapján 3-metil-7-[D-«-(4/ -hidroxifenil-a-amino)-acetamido]-Zl3 -cefem-4-karbonsavvá alakítjuk. Hasonló módon készíthető a 3-metil-7- [D-x-amino-oc-(3',5/ -diklór-4'-hidroxifenil) -acetamido]-Zl3 -cefem-4-karbonsav a 7—ADCA p-nitrobenzi-25 lészterének a 3 489 750 számú Amerikai Egyesült Allamok-beli szabadalmi leírás szerint blokkolt aminő-nitrogént tartalmazó, 2-(3',5'-diklór-4'-hidroxifenil)-2-aminoecetsavval történő acilezésével, amit az e találmány szerinti eljárással történő módon az 30 észtercsoport eltávolítása követ. Hasonlóan készíthető a 3-metil-7-[D-a-(3'-kloro-4'-hidroxifenü)-acetamido)-/l3 -cefem-4-karbonsav (3 489 751 számú amerikai egyesült államok-beli szabadalmi leírás), a p-nitrobenzil 7—ADCA-észter acilezésével, 35 majd az észter amino-nitrogénjét védő csoportok e találmány szerinti módszer szerint történő eltávolításával. A cefalexin termék diazotálható amintartalmának analitikai mérési módszere a következő: 40 Diazotálható amin a cefalexin hidrátban Kémiai név: 7-(D-a-amino-ot-fenilacetamid)-3--metil-3-cefem-4-karbonsav Általános név: Cefalexin 45 A mérés módja Kolorimetriás A méréssel meghatározható: A diazotálható amin mennyisége I. Készülék: 50 Beckman DU típusú, vagy más alkalmas spektrofotométer. II. Reagensek: 55 1. Sósav, 0,5 N 2. JMátriumnitrát, 0,1% vizes oldat 3. Ammóniumszulfát, 0,5% vizes oldat 4. N-(l-naftil)-etilén-diamin-dihidroklorid, 0,1% 60 vizes oldat III. Eljárás: Kb. 100 mg, pontosan lemért cefalexin mintát 50 ml-es Erlenmeyer-lombikba teszünk, 3,0 ml 65 vizet, majd 10,0 ml 0,5 n sósavat adagolunk hozzá. 5
