167248. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fermentációs úton stabil, kristályos nasztatin előállítására és izolálására a fermentációs táptalaj enzimes kezelése mellett

MAGÍAR NÉPKÖZTÁRSASÁGI ORSZÁGOS TALÁLMÁNY! HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1973. III. 27. Közzététel napja: 1975. IV. 28. Megjelent: 1976. XI. 30. (Cl-1358) 167248 Nemzetközi osztályozás: C 12 d 9/00 Feltalálók: Dr. JÄRAI Miklós mikrobiológus 25% PIUKOVICH Sándor vegyész 25% STANKOVICS Lajos vegyészmérnök 25% VAKALIOSZ Tanasziszné mikrobiológus 25% Budapest Tulajdonos: Chinoin Gyógyszer és Vegyészeti Termékek Gyára, Rt., Budapest Eljárás fermentációs úton stabil, kristályos nisztatin előállítására és izolálására a fermentációs táptalaj enzimes kezelése mellett í A találmány stabil, kristályos nisztatin fermentációs úton való előállítására és izolálására vonatkozik, a fermentációs táptalaj enzimes kezelése mellett. Ismeretes, hogy a kiváló fungicid hatással rendelkező nisztatin Streptomyces noursei törzzsel 5 végzett aerob fermentációval állítható elő. A hatóanyagot a bioszintézis során keletkező micólium tömegből extrahálással vonják ki. Az eddig ismert fermentációs eljárásokkal alacsony, kedvező esetben is csak 20 000 E/ml nisz- 10 tatint tartalmazó fermentle állítható elő, így ezen eljárások alkalmazásakor a hatóanyagot igen nagy mennyiségű szennyező anyagtól kell elkülöníteni. (2.797.183. sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás). 15 Az aerob fermentációknál a gazdaságosság növelésére a táptalajok szárazanyagtartalmát nem lehet bizonyos határon túl növelni, mert a táptalaj szárazanyagtartalmának növekedésével a viszkozitás jelentősen megnő, és ilymódon a mikroorganizmus 20 növekedéséhez szükséges oldott oxigén mennyisége nem biztosítható. Különösen lényeges tényező ez a Streptomyces noursei törzzsel történő fermentáció esetén, mivel ennek oxigénigénye a nisztatin bioszintéziséhez rendkívül nagy. Az oxigénnek a 25 készülékbe való juttatása növelhető ugyan a keverő vagy a keverő fordulatszámának megváltoztatásával, de csak bizonyos mértékig és további hátránya, hogy mindkét módszer a fermentle nem kívánatos habzását is maga után vonja. 30 A hatóanyagnak a fermentléből történő elválasztására több eljárás is ismeretes. A 2.797.183 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerint a fermentléből szobahőmérsékleten alkohollal extrahálják a hatóanyagot, majd az extraktumot bepárolják. A 149.132 sz. magyar szabadalmi leírás szerint a nedves micéliumot acetonban szuszpendaljak a micélium olaj mentesítésére, majd a hatóanyagot kalciumkloridos metanollal extrahálják. Ugyancsak a fermentle olaj mentesítésére szolgáló eljárást ismertetnek a 2.865.807. sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásban. A fentiekben ismertetett eljárásokkal alacsony, mindössze 2500—3100 E/mg aktivitású és bomlékony célterméket lehet előállítani. A 3.332.844 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírás szerint a micéliumot szerves bázisok sóinak jelenlétében vizes alkohollal extrahálják, majd a nyers nisztatint 80% vizet tartalmazó acetonban szuszpendaljak, forralják és ily módon 3500—4000 E/mg aktivitású terméket állítanak elő. Az eljárás hátránya, hogy igen nagy térfogatokkal kell dolgozni és a termék aktivitása még így sem kielégítő. Hasonló eljárást ismertetnek a 152.192 sz. magyar szabadalmi leírásban, mely szerint 30— 35% vizet tartalmazó acetonban szuszpendaljak a nedves micéliumot, majd szárítás után a szuszpenziót 38—40 °C-on kalcium-kloridos metanollal extrahálják és vízzel kicsapják a nisztatint. A 150.018 sz. magyar szabadalmi leírásban, a ta-167248 1