167220. lajstromszámú szabadalom • Szagtalanító készítmény

167220 9 3. táblázat (nőnemű kísérleti személyek) 10 Ki-Kisérleti indulási szeérték 1. nap 1. nap este 2. nap i reggel mély érték 1. nap I II I II sorreggel kezeletszálen ma 1 + + + + + + 2 + + + + + + 3 + 0 + + + + + 4 + + + + + + + + + (+) 5 + + + + + + + + + + 6 + + + + + + + + + + + 7 + + + + + + + + + 8 + + + + + + + + + (+) 9 + + + + + + + + + + + + + 10 + + + + + + + + + + + + I = (I) képletű hatóanyag II = Kallikrein^-tripszin-inhibitor, szarvasmarha szervekből (178 FIP-TIE/mg) 4. táblázat (hímnemű kísérleti személyek) Ki-Kisérleti indulási szeérték 1. nap 1. nap este 2. nap reggel mély érték 1. nap I II I II sorreggel kezeletszálen ma 1 + + + + + + + + + + + + 2 + + + + + + + + + + + + + + 3 + + + + + + + + + + + + + 4 + + + + + + + + + + + 5 + + + + + + + + + + + + 6 + + + + + + + + + + + 7 + + + + + + + + + + + 8 ' + + + + + + + + + + + 9 + + + + + + + + + + + + + + 10 + + + + + + + + + + + I = (I) képletű hatóanyag II = Kallikrein^-tripszin-inhibitor, szarvasmarha szervekből (178 FIP-TIE/mg) Az 1. és 2. táblázatban közölt eredmények azt mutatják, hogy vízzel és etilalkohollal készített 0,2 súly%-os inhibitor-oldat alkalmazása esetén az elért dezodoráló hatás jó, illetve nagyon jó, és emellett tartós is. Csak vízzel készített 0,2 súly%-os inhibitor-oldat fejt ki hasonló hatást. A 3. és 4. táblázatban szemléltetett eredmények, valamint a 3. kísérlet egyértelműen bizonyítják, hogy az (I) képletű hatóanyag hatékonyabb, mint az állati vagy növényi eredetű proteináz-inhibitorok. Ha a tisztított (I) képletű vegyület helyett a mikrobiológiai eljárás során kapott nyers inhibitort finomtisztítás nélkül alkalmazzuk, azonos eredményeket érünk el. Nyers inhibitor alkalmazása esetén a készítmények nem 0,2 súly%, hanem 1 súly% nyers inhibitort tartalmaztak. Az (I) képletű hatóanyag, de főleg a nyers in-5 hibitor (crude inhibitor) előállítására az alábbi példákat közöljük. A) példa 10 Fermentorban az alábbi összetételű tápközeg van: 2% kukoricakeményítő 1% glükóz 1% élesztőkivonat 15 0,5% kazeinhidrolizátum 0,4% kalciumkarbonát. A közeghez sterilizálása előtt még 0,1 tf-% szilikon habzásgátlót adunk. A tápközeget steril körülmények között a CBS 538.68 törzs azonos táp-20 közegben rázólombikban nyert 1 liter előtenyészetóvel beoltjuk. Intenzív keverés és szellőztetés mellett a tenyészetet 28 °C-on 41 órán keresztül inkubáljuk. A tenyészetlé aktivitása milliliterenként 120 F. I. P. — T. I. E. (a gátlóaktivitás méré-25 sét és meghatározását lásd az alábbiakban). A micéliumot centrifugálással elválasztjuk, a 100 liter szűrlethez 3 mm szemcseméretű aktívszenet adunk 1 ml-re számítva 75 mg mennyiségben. Az elegyet szobahőmérsékleten 30 percen át 30 keverjük, utána az aktívszenet elválasztjuk, az inaktív felülúszó részt kiontjuk. Az aktívszenet 40 liter, sósavtartalmú (pH = 2) 80%-os etanollal kezeljük. A kezelést 30 liter sósavas (pH = 2) etanollal megismételjük. Az egye-35 sített alkoholos oldatok pH-értékét nátriumhidroxid-oldattal 6,8-ra beállítjuk, és az oldatot mintegy 2,5 liter térfogatra betöményítjük. Az így nyert aktívszén-extraktumot 1:10 arányban vízzel hígítjuk. 10 liter hígított extraktumhoz 2 kg 40 előkezelésként tiszta metanollal mosott makroporózus polisztirolgyantát adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 30 percen át keverjük. Az inaktív felülúszó részt leszivatjuk. A polisztirolgyantából az inhibitort alkoholból és vízből álló gradiens-45 sei lépcsőzetesen eluáljuk. Az inhibitor fő mennyisége 30%-os etanollal (3X 10 liter) oldódik a gyantáról. Színtelenítés céljából a sötétbarna koncentrátumot valamilyen enyhén bázikus, OH- formájú ioncserélővel batch-eljárásban kezeljük. Az eluá-50 tumot vákuumban betöményítjük, majd liofilizáljuk. A fenti eljárás szerint kapott inhibitor fajlagos aktivitása 182 F. I. P. egység/mg. Hozam: 7 g szilárd anyag, amely az (I) képletű 55 inhibitort tartalmazza, és amely közvetlenül dezodoráló anyagként alkalmazható. B) példa 60 2% kukoricakeményítőt, 1% glükózt, 1% élesztőkivonatot, 0,5% kazeinhidrolizátumot és 0,4% kalciumkarbonátot tartalmazó, 121 °C-on 1 órán át sterilizált közegben a CBS 538—68 törzset 3 napon át tenyésztjük. Az így nyert előtenyészetből 65 1 ml-rel beoltunk 120 ml azonos tápközeget, amely 5