167141. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-helyettesített 7-acilamino-CEF-3-EM-4-karbonsav-származékok előállítására
87 167141 88 csökkentett nyomáson bepároljuk. Ily módon 7-(4--nitro-benzilidénamino-cefalosporánsav-benzhidrilésztert kapunk habszerű termék alakjában. Infravörös abszorpciós színkép (kloroformban): sávok 5,60 mikronnál (/Haktám) és 5,75 mikronnál 5 (észter). Magmágneses rezonancia-színkép: csúcsértékek: 518, 516, (IH), 496, 487, 475, 466 (AB kvartett, 4H), 439 (10H), 416 (IH), 330, 328, 325, 323 10 (dublettek dublettje, IH), 311, 306 (IH), 308, 295, 288, 274 (AB kvartett, 2H), 227, 209, 206, 187 (AB kvartett, 2H), és 119 (3H) Hz-értékeknél, CDCl3 -ban, a belső tetrametilszilántól. Vékonyréteg-kromatográfia, 250 mikron vastag- 15 ságú sálikagél-lemezen, 10% etilacetátot tartalmazó kloroformmal: lényegileg egyetlen folt Rf = 0,58 érték körül, a kiindulóanyag csak nyomokban mutatható ki a kromatogramon. 20 60 mg 7-(4-nitro-benzilidénamino)-cefalosporán-sav-benzilésztert egy ampullába helyezünk, lassú nitrogén-gázáramot vezetünk az ampullába, majd néhány perc múlva 0,3 ml N,N-dimetilformamidot adunk hozzá. A nitrogén-bevezetést folytatjuk, a 2 s kapott zöldesbarna oldaton keresztül 30 másodpercig buborékoltatunk nitrogéngázt, majd formaldehidgázt tartalmazó nitrogénáramot vezetünk bele, ezt oly módon nyerjük, hogy nitrogén-gázáramban 15 mg paraformaldehidet melegítünk. A levált szí- 30 nes csapadékot kiselejtezzük és az oldatot nagyvákuumban bepároljuk. Gyantaszerű maradékot kapunk, ezt kevés kloroformban oldjuk, nagyvákuumban bepároljuk és ezt a műveletet megismételjük. Ily módon gyantaszerű termék alakjában kapjuk a 35 7 -hi droxi metil-7-(4-nitro-benzüidénamino)-cefalosporánsav-benzhidrilésztert. Infravörös abszorpciós színkép: 2,9-3,1 (hidroxil), 5,64 (0-laktám) és 5,75 (észter) mikronnál. 40 Magmágneses rezonancia-színkép (CDCl3 -ban): szinglett a benzilidén-protonnak megfelelően, továbbá új abszorpció-sáv a hidroximetil-csoport következtében. Megfigyelt csúcsértékek: 517 (IH), 486, 478, 467, 458 (4H), 431 (10H), 407 (IH), 45 305 (IH), 300, 288, 282, 268 (2H), 240 (2H), 222, 204, 198, 180 (2H), 116 (3H) cps, tetrametilszilántól lefelé mérve. 57. példa 7a-hidroximetil-7|3-(2-tienilacetamido)-cefalosporánsav-benzhidrilészter 55 482 mg 7a-hidroximetil-7/3-amino-cefalosporánsav-benzhidrilésztert 5 ml metilénkloridban oldunk, 359 mg dikálium-hidrogén-foszfát 5 ml vízzel készített oldatát adjuk hozzá és az elegyet 0C° hőmérsékletre hűtjük, majd keverés közben, 60 30 másodperc alatt hozzáacsepegtetjük 179 mg 2-tienil-acetilklorid 5 ml molekuláris szűrővel szárított metilénkloriddal készített oldatát, az elegyet 0 C° hőmérsékleten 15 percig keverjük, majd 0,1 ml piridint adunk hozzá és további 15 percig 65 keverjük 0 C°-on. A fázisokat ezután szétválasztjuk, a szerves oldószeres fázist 1 mólos vizes dikálium-hidrogén-foszfát-oldattal, majd vízzel mossuk, vízmentes magnéziumszulfáttal szárítjuk, leszűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott gyantaszerű maradékot preparatív véiconyréteg-kromatográfiával tisztítjuk, 1,000 mikronos szilikagél-lemezen, fluoreszcens indikátorral. A kapott kromatogramon a kívánt sávot rövidhullámú ibolyántúli fényben azonosítjuk, majd kiemeljük és etüacetáttal eluáljuk. Ily módon 3,44 mg terméket kapunk. 58. példa 7a-MdroximetÜ-7/3-(2-tienilacetamido)-cefalosporánsav 7 a - hi dr o ximetil-7/3-(2-tiemlacetamido)-cefalosporánsav-nátriumsó 20%-os vizes oldatát jéggel hűtjük és a számított egyenértékű mennyiség kétszeresének megfelelő mennyiségű foszforsav 5 tf. rész vízzel készített, jéggel hűtött oldatát adjuk hozzá. A kapott csapadékot azonnal extraháljuk 5 adag jéghideg etilacetáttal. Az egyes extrakciós műveletek befejeztével a szerves oldószeres fázist közvetlenül vízmentes magnéziumszulfátra öntjük, amelyet egy jégfürdőbe helyezett lombikban készítettünk elő erre a célra. A szerves oldószeres kivonatok egyesítése után az oldatot leszűrjük és a szűrletet csökkentett nyomáson, 25 C° alatti hőmérsékleten bepároljuk. Gyantaszerű maradékot kapunk, ezt a szükséges minimális mennyiségű etilacetáttal gyorsan felvesszük és centrifuga-csőbe visszük, ahol nitrogén-gázáramban betöményítjük. A kapott koncentrátumot a kívánt termék egy kristályával beoltjuk (ha a kristályosodás magától megindul, akkor erre a beoltási műveletre nincs szükség), majd 0C° hőmérsékleten kristályosodás céljából néhány óra hosszat állni hagyjuk. Az elkülönített kristályos terméket átkristályosítás céljából az éppen szükséges minimális mennyiségű metanolban oldjuk és az oldatot többszörös térfogatú etilacetáttal hígítjuk, majd nitrogén-gázáramban betöményítjük, amikor is gyantaszerű alakban válik ki a termék. Ezt kevés etilacetátban oldjuk, az oldatot lehűtjük és beoltjuk, amikor is csaknem színtelen kristályok alakjában válik ki a termék 55%-os hozammal. Ibolyántúli abszorpciós színkép (pH = 7 pufferoldatban: \max , 237 millimikron, E% 319, Xinf . 257,5: millimikron, E % 229. Vékonyréteg-kr omatografálással, szilikagél-rétegen, benzol, metanol és ecetsav 5 :1 :0,6 arányú elegye vei egyetlen foltot kapunk. Magmágneses rezonancia-színkép (a nátriumsóval, deuteriumoxidban): megegyezik az autentikus 7a-hidroximetil-7j3-(2-tienilacetamido)-cefalosporánsav-nátriumsó színképével, kevés szennyezést mutató kisebb csúcsokkal. 44
