167128. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új komplex antibiotikum, a violamicin és összetevői előállítására

7 1Ö7J..Z8 8 Mind a violamicin-tenyészet friss fermentációs szűrletei, mind a belőlük elkülönített antibiotikum növekedésgáltó hatással van Gram-pozitív baktériumokra és Mycoplasmakra, kisebb mértékben Gram-negatív baktériumokra, ezzel szemben élesz- 5 tőkre és gombákra nincs antibiotikus hatásuk. In vitro emlős eredetű sejtekkel és mesterségesen előidézett egértumorokkal szemben a violamicin citosztatikus, illetve kancerosztatikus aktivitást fejt ki. (A vizsgálati módszereket lásd: Fleck W, Strauss 10 D., Koch W. és Prauser H.: Violamicin, a New Red-Pigment-Antibiotic, Proceed Symp. VIII. Internat. Chemother. Congr. Athen 1973). A violamicin antibiotikum kancerosztatikus 15 hatásának vizsgálata A kancerosztatikum-teszt első lépcsőjében (ZIMET Jena Kísérleti Terápiai Osztály) a violamicin-nyerstermék L 1210 és LAJI kísérleti leuké- 20 miával és szarkóma 180-nal fertőzött egereken a szarkóma 180 ellen hatást fejt ki. 20 g egérsúlyra vonatkoztatott egyszeri 5, illetve 2,5 meg violamicin-nyerstermék i.p. alkalmazása a szolid tumor növekedését a kezeletlen kontrollhoz képest 25 48,9 illetve 53,6%-kal csökkenti. A" bakteriális vírusok, valamint az animális vírusok szaporodását az antibiotikum egyaránt intercellolárisan gátolja. Különösen erős hatással van a violamicin a mikoplazmafajták sejtosztására 30 és nyugalmi anyagcseréjére. A violamicin mikoplazmákra gyakorolt bakteriosztatikus és baktericid hatásának 35 vizsgálata Az antibiotikum hatását két, mezőgazdaságban, különösen az állattenyésztésben és haszonállattartásban jelentős járványkórokozón vizsgáltuk meg. 40 Az A és B violamicin meglepően erős bakteriosztatikus és egyidejű baktericid hatást mutat a Mycoplasma gallisepticum (S 6 törzs) és a Mycoplasma hyorhinis ellen. Az A és B violamicin biológiai aktivitásának összehasonlító vizsgálata bouillon-táp- 45 talajon végzett hígítási próba kiértékelése alapján a következő hatékonysági spektrumot szolgáltatta: 1. táblázat 50 A vizsgált Minimális gátlókoncentráció organizmus — bakteriosz- baktericid tatikus (mcg/ml) (mcg/ml) 55 violamicin: violamicin: A B A B Mycoplasma 0,03 0,15 0,76 0,76 60 gallisepticum S 6 törzs Mycoplasma 0,15 0,15 19,0 0,76 hyporhinis 65 Az 1. táblázatban összefoglalt eredmények azt mutatják, hogy az A violamicin a Mycoplasma gallisepticum (S 6 törzs) ellen erősebb bakteriosztatikus aktivitást fejt ki, mint a B violamicin, a B violamicin viszont Mycoplasma hyorhinis ellen erősebb baktericid aktivitást fejt ki, mint az A violamicin. A két violamicin abban tér el azeddig ismert, mikoplazmák ellen hatásos természetes anyagoktól, hogy baktericid hatásuk többszázszorosa azokénak. Haszonállatoknál betegségi szimptómákat előidézni képes mikoplazmákkal szemben ilyen mértékű biológiai aktivitás antraciklin-antibiotikumok vonatkozásában ezideig ismeretlen és ezért meglepő. Az új, violamicin nevű antibiotikum és származékai potenciális kemoterapeutikumok lehetnek emberek és haszonállatok mikoplazmás, daganatos és vírusos megbetegedései ellen. Az alábbi példák a találmány közelebbi megvilágítását szolgálják, a találmány azonban nem korlátozódik a példákra. 1. példa Két 500 ml űrtartalmú henger alakú, a felső végén kúp alakú részben végződő kultúra-lombik („Steilbrustflasche") 80-80 ml mennyiségben az alábbi előtenyésztési közeget tartalmazza: glükóz 1,5% szójaliszt 1,5% nátriumklorid 0,5% kalciumkarbonát 0,1% primer káliumfoszfát 0,03% csapvízben. A közeget 110C°-on 35 percig sterilizáljuk. Sterilizálás után a pH értéke 6,3. A lombik tartalmát spóra- és micéliumszuszpenzióval oltjuk be, amelyet steril izotonikus konyhasó-oldattal az IMET JA 6844 Streptomyces violaceus törzsnek az alábbi táptalajon lombikban tenyésztett 10-14 napos kultúrájából állítunk elő: zabliszt 1% őrölt zabpehely 1% agar 2% csapvízben. A közeget 120 C°-on 35 percen át sterilizáljuk. A közeg kémhatása enyhén savas. A beoltott előtenyésztési kultúrát 48 órán át 28 C°-on 180 fordulat/perc frekvenciájú rázógéppel inkubáljuk. Az így előtenyésztett kultúrából 8 ml-t használunk fel 500 ml-es lombikok beoltására. Minden lombikban 80 ml az alábbi összetételű tápfolyadék van: glükóz 2,0% szójaliszt 2,0% nátriumklorid 0,5% kalciumkarbonát 0,3% csapvízben. 4