167086. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nem antigén hatású, a gazdaszervezet természetes ellenállóképességét serkentő vírustörzsek és vakcinák előállítására
9 167086 10 got hideg foszfátpuffer-oldattal kétszer mossuk, majd ollóval feldaraboljuk. A darabokat súlyuktól függő mennyiségű tengeri homokkal és 4tf-rész, milliliterenként 1000 NE penicillint és 1000 7 streptomicint tartalmazó Eatl-féle laktalbumin-hidrolizátum-közeggel elegyítjük, és «z elegyet mozsárban eldörzsöljük. Hűtőcentrifugában 4C°-on 3000 perc-1 fordulatszám mellett centrifugálva a homokot és a szövetet elválasztjuk a vírustartalmú folyékony fázistól. A felülúszó részt azonos körülmények mellett még egyszer centrifugáljuk, és a kapott extraktumot membránszűrő segítségével sterilizáljuk. Roux-palackban tenyésztett primer borjúvesesejt-kultúrához 1-10% vírusextraktumot tartalmazó Earl-féle laktalbumin-hidrolizátum-közeget adunk, majd 36—40C°-on tartjuk. Amikor a sejttenyészet 80-100%-a elpusztult (azaz mintegy 24-48 óra után), a felülúszó részt dekantáljuk és 4C°-on 2000 g mellett centrifugáljuk. Az elválasztott sejtmaradékot megsemmisítjük és a folyadékkal friss borjúvesesejt-kultúrára visszük át. Ezt a folyamatot 220-szor megismételjük, ami mintegy 1,5 évet vesz igénybe. A vírus virológiái tulajdonságait időközönként megvizsgáljuk. A leírt módon legyengített, 2xlOé > 7 KiD5 o/ml koncentrációjú vírusoldatot 10 antitestmentes szarvasmarhának adjuk be intranazális úton. 72 órával később az állatokat Oj-Kauf beuren típusú száj- és körömfájás vírussal úgy fertőzzük meg, hogy milliliterenként 50 x 104 fertőző dózist tartalmazó oldatot az állat nyelvére dörzsölünk. (A Oi —Kaufbeuren típusú száj- és körömfájás vírustörzs a Bundesforschungsanstalt für Viruskrankheiten der Tiere Intézetben, Tübin-5 gen, NSzK, van letétben). A10 napon át tartó megfigyelési időszak alatt a 10 kezelt szarvasmarha közül 7 védettnek bizonyul, egy állaton a száj- és körömfájás primer tünetei mutatkoznak, és két állat teljesen megbetegszik. Az 5 szarvas-10 marhából álló kezeletlen kontrollcsoportból azonos megfigyelési idő alatt mindegyik állat teljesen megbetegszik száj- és körömfájásban. A legyengített VSV-vírus tehát a száj- és körömfájás ellen is biztosít védelmet, mivel nem 15 specifikus módon a gazdaszervezet természetes ellenállóképességét serkenti. Szabadalmi igénypont: 20 Eljárás nem antigén hatású, a gazdaszervezet természetes ellenállóképességét serkentő patogén vírustörzsek, főleg humán influenzás fertőzést és állati légzőrendszeri fertőzést okozó törzsek és 25 vakcinák előállítására állati sejtek szövettenyészetén végzett sorozattenyésztés útján, azzal jellemezve, hogy valamely, az általa beteggé tett egyed nyálkahártyáiról vagy szerveiből izolált vírústörzset 36-40 C°-on 1-4 év alatt 200-800 30 szakaszon át tenyésztünk, és a kapott legyengített vírustörzset ismert módon vakcinává alakítjuk. 2 rajz A kiadáséit felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 766067 - Zrínyi Nyomda
