166872. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alfa-amiláz előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 166872 im% Bejelentés napja: 1971. X. 20. (11—79) Nemzetközi osztályozás: C 12 d 13/10 Ijjl Szovjetunió-beli elsőbbsége: 1970. X. 20. (1479555) ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1975. I. 28. Megjelent: 1976. VII. 31. \ Feltalálók: Kvesitadze Georgy Ivanovich mérnök, Kokonashvili Georgy INikolaevich fizikus, Tbiliszi, Fenixova Raisa Vasilievna mezőgazdasági vegyész, Moszkva, Szovjetunió Tulajdonos: Institut Biokhimii Rasteny Akademii Nauk Gruzinskoi SSR, Tbiliszi, Szovjetunió Eljárás «-amiláz előállítására A jelen találmány a-amiláz élőállítására szolgáló eljárásra vonatkozik. a-amilázokat állatoknál (nyálban, hasnyálmirigyben), növényekben (maláta), penészgombákban és baktériumokban találtak. Ezek az enzimek a-l,4-glukán-4-glukohidrolázok (3, 2, 1, 1), és keményítőket, glikogént és rokon a-l,4-glukánokat hídrolázálunk. A nevezett enzimek azonban molekulasúlyban, hőstabilitásban, pH-optimumban és egy sor más tulajdonságban különböznek egymástól. A gomba-a-amiláz preparátumoknak rendkívül széles felhasználási területük van, mégpedig a szesz-, sütő- és söriparban a természetes oligo- és polisztacchariddk erjeszthető cukrokká való hidrolizálásában. Az Aspergillus oryzae gombából kinyert nagytisztaságú a-amiláz segítségével gyógyászati preparátumokat állítanak elő. A különböző forrásokból izolált a-amilázok hőstabilitásukban különböznek. Különösen hőérzékeny az Aspergillus nemzetség bombáiból származó a-amiláz, a maláta-a-amiláz ellenállóbb és iá baktérium-a-amiláz a legstabilabb magas hőmérsékleten. Ezek az enzimek a pH-optimum szerint is különböznek. A gomba-a-amiláz pH-optimuma 4,7, a nyál- és a bakteriális a-amilázé 7, ill.7,2 emiatt a gastrointestinalis megbetegedésekél alkalmazható gyógyászati készítmények előállítására a gomba-a-amiláz felel meg. 10 15 20 25 30 A nagyszámú ismert a-amiláz-előállítási eljárás !közül ipari termelésre ez az eljárás alkalmas, amelyet japán kutatók dolgoztaik ki, és a Szovjetunióban tökéletesítettek. Ismert az a-amiláz előállítására olyan eljárás is, amely szerint a termelő Aspergillus oryzae törzset 72 órán át 30 C°-on tenyésztik szubmerz eljárással az alábbi g/l-ben kifejezett öszetételű vizes tápoldatban: keményítő — 90; NaNo3 — 12,0; MgS0 4 — 0,65; KH2PO4 — 1,3; KCl — 0,5; FeS04 — 0,02 és 200 ml 20%-os malátacsíra extraktum. Az említett közegben optimális levegőztetési feltételek mellett az Aspergillus oryzae penészgomba tenyésztése lehetővé teszi az a-amiláz bioszintézisének rendkívül magas szintjével jellemezhető fermentlé előállítását. Ezzel összefüggésben azt a célt tűztük ki, hogy az említett tápoldat összetételét olyann új komponensek bevitelével javítsuk, amelyek elősegítik az a-amiláz bioszintézisének növelését. A találmány másik célja az a-amiláz tisztítás technológiai rendszerének tökéletesítése. A találmány további célja olyan eljárás kifejlesztése, amely lehetővé teszi teljesen homogén fehérjeösszetételű a-amiláz előállítását, és amely minimális technológiai műveletet foglal magában, és ipari megvalósításra alkalmas. Meglepő módon azt találtuk, hogy ha az Aspergillus oryzae törzset önmagában ismert komponenseket speciális mennyiségi összetételben 166872
