166840. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására

7 166840 8 4. táblázat Az A 28695 antibiotikumok csirkekokcidiózis elleni hatása Vizsgált csoport Koncentráció a táplálékban (súly »/„) Súly-Halá- növelozás ke(%) dés* (%) Káros elváltozások csökkenése (%) *» Bél Ceacal A 28695A 0,01 0 76 100 100 0,005 0 100 100 66 0,0025 0 80 90 < 40 A 28695B 0,02 0 90 100 90 Fertőzött kontroll 15 36 0 0 Nem kezelt kontroll 0 100 — — * a nem kezelt kontrollcsoport 100% ** a fertőzött kontrollcsoporttal összehasonlítva. A csak Eimeria tenellá-val fertőzött csirkék kezelésekor az 5. táblázatban megadott eredményeket kaptuk. Vizsgált csoport Koncentráció a táplálékban (súly %) Halálozás (%) Súlynövekedés* (%) Káros elváltozások csökkenése A 28695A 0,005 0 100 90 0,0025 0 100 33 0,00125 0 80 0 A 28695B 0,03 0 93 100 0,02 0 100 100 Fertőzött kontroll 20 72 0 Nem kezelt kontroll 0 100 — 10 15 20 25 5. táblázat Az A 28695A és az A 28695B antibiotikumok ha- 30 tása Eimeria tenella-ra csirkékben 35 a nem kezelt kontrollcsoport 100% : a fertőzött kontrollcsoporttal összehasonlítva. Az A 28695A antibiotikum akut toxicitása egereken, LD50 41,1 mg/kg testsúly, orálisan adagolva. Az A 28695B antibiotikum LD50-értéke orális adagolással, egereken 43,5 mg/kg testsúly. Ahogy erről a későbbiekben még szó lesz, az egyes A 28695 antibiotikumok és ezek keveréke fokozza a kérődző állatok szénhidrát-felhasználását és így ezen állatok tápanyag-hasznosítása javul. Bendőkivonattal, in vitro kísérletekkel bizonyítottuk, hogy az antibiotikumok a bendőben levő illékony, szabad zsírsavakon keresztül fejtik ki hatásukat. Részletesebben, az antibiotikumok olyan irányban hatnak, hogy megnövekszik a kérődzők anyagcseréje számára hozzáférhető 40 45 50 55 60 65 propionát-egységek száma. A propionátokat az állatok jobban felhasználják, mint a nem kezelt állatokban túlnyomórészt jelenlevő acetátokat. Az A 28695 jelű antibiotikumok egy másik előnyös tulajdonsága, hogy egyenértékű kationokkal komplexet képeznek. Kísérleti úton bizonyítottuk, hogy az A 28695A antibiotikum kálium-ionok és rubidium-ionok, míg az A 28695B nátrium- és káliumionokkal szemben érzékeny. Az ionspecifikus elektródák fontos szerepet játszanak sok kémiai analízisben. Sajátságos tulajdoságaik miatt az A 28695A- és B-jelű vegyületek az ionspecifikus elektródák előnyös összetevője. Az A 28695 antibiotikumok és az egyenértékű kationok által képezett komplexek zsírban oldódnak, így a sejtmembrán ion transzportját segítik elő. Az ilyen hatású antibiotikumokat ionofor antibiotikumoknak nevezzük. Az A 28695 antibiotikumok hatását az iontranszportra patkánymáj mitokondriumokat és valinomicint tartalmazó rendszerben vizsgáltatjuk. A valinomicin az adenozintrifoszfát hidrolízisét a patkánymáj mitokondriumokban elősegíti, míg az A 28695A és az A 28695B ezt a hatást felfüggeszti. A találmány szerinti eljárás értelmében az új antibiotikumok előállítására úgy járunk el, hogy egy újonnan felfedezett Streptomyces-t sülylyesztett, aerob fermentációs körülmények között, szerves tápanyagforrásokat és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon addig tenyésztjük, míg megfelelő mennyiségű hatóanyag nem keletkezik. A tenyészetből az antibiotikumot különböző, ismert elkülönítési és tisztítási eljárásokkal kapjuk meg. Az új antibiotikumok előállítására használt törzs a Streptomyces albus (Rossi-Doria) Waksman és Henrici törzzsel azonos. A törzset a Northern Utilization Research and Development Division, Agricultural Research Service, Illinois, állandó törzsgyűjteményébe letétbe helyeztük és onnan elkérhető. A gyűjteményben a törzs az NRRL 3883 számot kapta. A törzset egy Curacao-ban (Holland-Antillák) gyűjtött földmintából izoláltuk. A földminta egy részét steril, ionmentes desztillált vízben szuszpendáltuk, a szuszpenziót Petri-csészékbe öntött agarrétegen szélesztettük. A tenyészetet 25 °C és 35 °C közötti hőmérsékleten inkubáltuk, majd az A 28695 antibiotikumot termelő törzs telepeinek kinövése után steril platinakaccs segítségével ferdetenyészeteket készítettünk. A ferdeagarról, inkubáció után, megfelelő ionkulumok készíthetők. Az A 28695 antibiotikumokat termelő NRRL 3883-jelű törzs rendszertani helyének tanulmányozására az International Streptomyces Project [Shirling és Gottlieb, Intern. Bull. Systematic Bacteriol., 16, 313—340 (1966)] szerint járunk el, bizonyos más kiegészítő vizsgálatokkal együtt. Az eredményeket a következőkben ismertetjük. A színek elnevezésére az Inter-Society Color Council-National Bureau of Standards (ISCC-NBS) módszerét használjuk (Kelly és Judd, ISCC-NBS Method of Designating Co-4