166785. lajstromszámú szabadalom • Eljárás anhidro-4-karbamoil-5-hidroxi-1-ribofuranozil-imidazoliumhidroxid előállítására
166785 2. táblázat: Hemolizin titer Plakkképző sejtek a lépben Kontroll 40 Bredinin (napi 50 mg/kg) 10 Bredinin (napi 100 mg/kg) £ 5 31,4-10* 6,7-10* 1,8-10* Amint a 2. táblázat adataiból látható, a 4 napig tartó napi 50 mg/kg bredinin beadása után immunszuppressziós hatás észlelhető, és napi 100 mg/kg adagolása után a plakk-képző sejtek száma a lépben az eredeti 1 / 20 -ára csökkent. b) Egyetlen bredininadag hatása: Egerekbe intravénásán BWT-t fecskendeztünk. Ezzel egyidőben, illetve utána 1, 2 vagy 3 nappal 200 mg/kg bredinint adtunk be intraperitoneálisan. A 4. napon meghatároztuk a hemolizin titert és a lépben a plakk-képző sejteket. Az eredményeket a 3. táblázatban tüntetjük fel. 3. táblázat Kont- Bredinin beadása roll [200 mg/kg] aznap 1 nap 2 nap 3 nap múlva múlva múlva Hemolizin titer Plakk-képző sejtek a lépben (10*) 40 40 40 10 20 31,4 31,8 33,1 11,2 18,2 10 15 20 25 30 35 40 Amint a 3. táblázat adataiból kitűnik, csekély immunszuppressziós hatást észleltünk, amikor a bredinint ugyanazon a napon vagy a BVVT injekció utáni 1. napon adtuk be. A legnagyobb immunszuppressziós hatást akkor észleltük, amikor a bredinint a 2. napon adtuk be, a 3. napon beadott bredinin injekció után pedig kissé gyengébb immunszuppressziós hatást tapasztaltunk. c) Csecsemőmirigy antitesttermelésétől független antigénképződésre gyakorolt hatás: Escherichia coli endotoxinnal végzett kísérletből kitűnt, hogy a bredinin nem gátolja a csecsemőmirigy immunfolyamatától független antigént. d) Másodlagos reakciókra gyakorolt hatás: 10—10 egérből álló 4 csoportnak intraperitoneálisan 4 x 108 BWT-t adtunk be. 21 nap elteltével 3 csoportba újra 4 X 108 BWT-t fecskendeztünk intravénásán, és ugyanakkor 3 napon át naponta egyszer intraperitoneálisan 100 mg/kg bredinint, illetőleg imuránt adtunk be. A második BWT-injekció után 3 nappal meghatározott hemolizin titer és a lépben levő plakk-képző sejtek adatai a 4. táblázatban láthatók. 45 6 4. táblázat: Hemolizin titer Plakk-képző sejtek a lépben Kontroll Másodlagos immunizálás Nincs másodlagos immunizálás (csak elsődleges) Bredinin (100 mg/kg) Imuran (100 mg/kg) 40 15,3-10* 5 0,19-10* 5 3,1-10* 20 8,3-10* A bredinin hatást gyakorol a másodlagos antitestreakciókra, míg az imurán hatása nagyon gyenge. Amint a közölt adatokból látható, a bredinin immunszuppressziós hatása nemcsak az elsődleges antitestreakciókra, hanem a másodlagos antitestreakciókra is erősebb az imuránénál. Ez a találmány szerinti bredinin nagy előnye a klinikai alkalmazásban, mert szervátültetés után vagy autoimmun betegségeknél az antigén ingerkeltés folyamatos. 4. A vírusszaporodásra gyakorolt hatás: a) Tanulmányoztuk in vitro a bredininnek a herpesz szimplex vírus, a poliovírus, a japán véragglutináló vírus és a vakciniavírus szaporodására gyakorolt hatását, és azt találtuk, hogy a vakciniavírus kivételével a bredininnek nincs gátló hatása. Egérembrió primer sejteket bredinint tartalmazó közegben tenyésztettünk, és 24 óra után 100 SzFA50 (50% szövettenyészetre fertőző adag) mennyiségű vírussal oltottunk be. A meghatározásokat 72 óra elteltével hajtottuk végre. A kapott adatokat az 5. táblázatban tüntetjük fel. 5. táblázat: Bredinin [y/ml] 100 20 4 0,8 0,16 kontroll Citopatogén hatás 50 a) Influenzavírus okozta fertőzésre gyakorolt hatás: A kísérletre ddY törzsbeli 14—16 g súlyú, japán véragglutináló vírustól mentes egereket használtunk. A fertőző vírust, az influenza A2 Kuma-55 moto törzset (H2 N 2 ) előzetesen embriót tartalmazó tojás allantoiszüregében tenyésztettük, és inhalátorként vaponefrin típusú porlasztót használva, egerenkint 1/250 ml vírusoldatot inhaláltattunk. Az inhalátor kompresszorát úgy állítottuk be, hogy 60 30 perc alatt 10 ml vírusoldatot porlasszon. A bredinint és az imuránt 3 és 1 órával a vírusfertőzés előtt kétszer és 1 és 3 órával a fertőzés után kétszer, majd további 5 napon át naponta kétszer intraperitoneálisan adtuk be. Az eredmények 65 a 6. táblázatban láthatók. 3
