166686. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, hipokalcémiás hatású dotriakontapeptidamidok előállítására

166686 43 44 79,1 g H-Ala-Ile-Gly-OMe 1500 ml dimetilformamidos oldatához 105 ml trietilamint adunk, az oldatot — 20°ra hűtjük és hozzácsepegtetjük a fenti BOC-Thr-N3 oldatot. Az elegyet 70 órán át 0°-on reagáltatjuk, majd az oldószert 40°-on vákuumban lepároljuk, a maradékot etilacetátban felvesszük, az oldatot 0,1 n sósavval, vízzel, 5%-os nátriumhidrogénkarbonátoldattal és vízzel mossuk, majd szárítjuk. A termék 187—189°-on olvad. MD=-13*2° (C=2, dimetilformamidban). Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat alapján Rn

=0,68. 14. BOC-Thr-Ala-Ile-Gly-NH-NH2 87 g BOC-tetrapeptidésztert 870 ml metanolban oldunk, az oldatot 0°-ra hűtjük és 37,6 ml hidrazinhidrátot adunk hozzá. 18 órán szobahőmérsékleten és 1 órán át 0°-on keverjük, majd leszűrjük. A csapadékot metanolból kétszer átkristályosítjuk. Op.: 231—232,5°. MD = —5,9° (c =2, dimetilformamidban). Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatban Rf7

= 0,7. 15. BOC-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly-Ala-Pro-NH2 27,1 g BOC-Thr-Ala-Ile-Gly-NH-NH2

vegyületet 250 ml dimetilformamidban szuszpendálunk. Az azidot a 13. példában leírt módon állítjuk elő, 59,9 ml 2,23 n sósavval és 9,1 ml izo-amilnitrittel. Az oldatot 15 percig keverjük. 24,2 g H-Val-Gly-Ala-Pro-NH2

szulfátot 120 ml dimetilformamidban oldunk, 0°-ra hűtjük, majd 28 ml trietilamint adunk hozzá. Az azidoldattal történő összekeverés után az oldat pH-ját 7-re állítjuk. Az elegyet 70 órán át reagáltatjuk. A peptidet etilacetát-hexán elegyből átkristályosítjuk. Op.: 226—227,5°. [a]g> = — 25,6° (c =2, dimetilformamidban). Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatban az Rf7 érték 0,7-nek adódik. 16. H-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly-Ala-Pro-NH2. trifluoracetát 51 g BOC-Thr-Ala-Ile-Gly-Val-Gly-Ala-Pro-NH2

vegyületet 153 ml 90%-os vizes trifluorecetsavban oldunk, az oldatot 1 órán át állni hagyjuk, majd 1530 ml száraz éterhez adjuk. A csapadékot leszívatjuk és éterrel háromszor mossuk. Op.: 221—223°. Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat alapján Rn

=0,5. 17. Z-Pro-Gln-NH-NH-BOC 67,23 g Z-Pro-OH vegyületet 670 ml dimetilformamidban oldunk és 38,9 ml trietilaminnal és 26 ml klórhangyasavetilészterrel vegyes anhidriddé alakítjuk át. Ezzel az 1. pontban leírtak szerint 70,2 g H-Gln-NH-NH-BOC vegyületet reagáltatunk. A maradékot forró etilacetátból kikristályosítjuk. Op.: 169—171°. [a]g> = — 41,3° (c =1, dimetilformamidban). Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során Rfl

= 0,45. 18. H-Pro-Gln-NH-NH-BOC 94 g 17. pontban előállított származékot 564 ml dimetilformamidban oldunk, és a 2. pontban leírt módon hidrogénezzük, azzal a különbséggel, hogy savat nem alkalmazunk. A termék Rf5

=0,3 értéket mutat szilikagéles lemezen. 19. Z-Phe-Pro-Gln-NH-NH-BOC 80,4 g Z-Phe-ONP, 68 g H-Pro-Gln-NH-NH-BOC vegyületeket és 9,4 ml jégecetet az 5. pontban leírtak szerint 560 ml dimetilformamidban oldunk. A termék 107°-on olvad. [oc]g.= - 35,9° (c =1, dimetilformamidban). Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során Rfl

=0,7. 20. H-Phe-Pro-Gln-NH-NH-BOC 103 g Z-Phe-Pro-Gln-NH-NH-BOC vegyületet oldunk 618 ml dimetilformamidban és a 2. pontban leírt módon, de sav nélkül hidrogénezzük. A termék szilikagéles lemezen Rf6

=0,5 értéket mutat. 21. Z-Thr-Phe-Pro-Gln-NH-NH-BOC 46,1 g Z-Thr-NH-NH2

vegyületet 550 ml dimetilformamidban oldunk és a 13. pontnak megfelelően 177 ml 1,958 n tetrahidrofurános sósavoldattal és 24 ml izo-amilnitrittel azidot képzünk. Az azidot 81,4 g H-Phe-Pro-Gln-NH-NH-BOC 1200 ml dimetilformamidos oldatával hozzuk össze. Etilacetát-hexán elegyből kikristályosítva a termék 129—134°-on olvad. [a]f? = — 34,8° (c=l, dimetilformamidban). Szilikagéles vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során Rf7 =0,85. 22. H-Thr-Phe-Pro-Gln-NH-NH-BOC 23,6 g, a 21. pontban előállított terméket 188 ml dimetilformamidban oldunk, és a 2. pontban leírtak szerint, de sav nélkül hidráljuk. A termék Rf7

értéke szilikagélen 0,7. 23. Z-His-Thr-Phe-Pro-Gln-NH-NH-BOC 9,68 g Z-His-NH-NH2

vegyületet 100 ml dimetilformamidban oldunk. Az azidot 36,3 ml 2,67 n tetrahidrofurános sósavoldattal és 4,32 ml izoamilnitrittel képezzük, és 19,32 g H-Thr-Phe-Pro-Gln-NH-NH-BOC 300 ml dimetilformamidos és 13,8 ml trietilaminos oldatával reagáltatjuk a 13. pont szerint. A reakcióelegyet szűrjük, a szűrletet vákuumban 100 ml-re pároljuk be és 1100 ml etilacetátba öntjük. A termék 95—133°-on olvad. Szilikagélen végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során Rf6

=0,7. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 22