166615. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polién-makrolid csoportbeli antibiotikumok származékainak előállítására

3 166615 4 képző vegyület jelenlétében reagáltatunk, majd kellő reakcióidő letelte után a reakcióterméket elkülönítjük és adott esetben sóvá alakítjuk. A polién-makrolid csoportbeli antibiotikumok cukorszármazékai a mikózis kezelésére, valamint a prosztata duzzadását gátló és a vér koleszterinszintjét csökkentő gyógyszerekként alkalmazhatók. Az in vitro kapott származékok gombák okozta sömör elleni aktivitását két módszerrel vizsgáltuk: a) az antibiotikumok és származékai szilárd táptalajon mutatott mikrobiológiai aktivitásának megállapítása — I. táblázat, b) az antibiotikumok és származékai folyékony tápközegben mutatott mikrobiológiai aktivitásának megállapítása — II. táblázat. A mikrobiológiai aktivitást szilárd táptalajon hígítási sor segítségével a következőképpen állapítottuk meg: 1 mg antibiotikumot 1 ml dimetilszulfoxidban feloldottuk és 9 ml steril vízzel hígítottuk, vízzel hígítási sort készítettünk, és azt a minimális koncentrációt határoztuk meg, amely elegendő a Candida albicans és Saccharomyces cerevisiae szabványtörzsek növekedésének meggátolására. E vizsgálat során 10 cm átmérőjű Petricsészékben 0,5 ml antibiotikum-oldatot 9,5 ml 60 C°-os Sabouraud-féle táptalajjal kevertünk. A szubsztratum megszilárdulása után a mikrobákat a táptalaj felületére telepítettük, és 24 órán át 36 C°-on inkubáltuk. A legkisebb gátló koncentráció az, amelynél a mikrobák növekedése megáll. A nystatin és ennek származéka értékét az alábbi I. táblázatban adjuk meg. /. táblázat Legkisebb gátló koncentráció mcg/ml Készítmény Candida albicans S. cerevisiae nystatin nystatin-glükóz származék 2 2 2 2 Az antibiotikumok és származékaik mikrobiológiai aktivitását folyékony tápközegben a fentiekben leírt hígítási sor módszerével állapítottuk meg. 0,5 ml antibiotikum-oldatot 4,5 ml Sabouraud szerint előkészített, mikroorganizmusokkal fertőzött táptalajjal kevertük, agar nélkül, de 25 mg/liter mennyiségű tarchocilin hoz-30 35 40 45 záadásával. Az oldatokat 48 órán át 32 C°-on inkubáltuk. • i . A legkisebb, a mikrobák növekedésére gátlólag ható koncentrációkat 660 nm hullámhossznál mért kioltás alapján határoztuk meg. Az eredményeket a II. táblázat szemlélteti. //. táblázat 10 15 20 25 MIC MIC Antibiotikum mcg/ml Származékok mcg/ml Pimaricin 2,5 NGL Pimaricin 5,0 Rimocidin 2,5 NGL Rimocidin 2,5 Nystatin A

1 0,5 NGL Nystatin 1,0 NML Nystatin 2,5 NRL Nystatin 2,0 Polifungin 0,5 NGL Polifungin 1,0 NGU Polifungin 5,0 Amfotericin B 0,05 NGL Amfotericin B 0,2 NGU Amfotericin B 0,5 Kandidin 0,2 NGL Kandidin 1,0 Mikoheptin 2,5 NGL Mikoheptin 2,5 Kandicidin 0,001 NGL Kandicidin 0,005 Trichomicin 0,001 NGL Trichomicin 0,005 Levorin 0,05 NGL Levorin 0,2 Aureofacin 0,005 NGL Aureofacin 0,025 NGU Aureofacin 0,025 MIC = legkisebb növekedésgátló koncentráció NGL = glükóz-származék NML = maltóz-származék NRL = ribóz-származék NGU = glükuron-származék Ahogy a fentiekből kitűnik, a polién-makrolidcsoportbeli antibiotikumok származékainak a mikózis elleni aktivitása azonos nagyságrendű, mint a kiindulási antibiotikumoké. A nystatin glükóz-származékának több patogén Candida- és Geotrichum törzsre gyakorolt aktivitását a nystatinéval összehasonlítva megvizsgáltuk; a törzseket fertőzött emberi szervekből különítettük el. A kapott eredményeket az alábbi III. táblázat szemlélteti. III. táblázat Megvizsgált törzsek száma Növekedésükben gátolt törzsek száma Mikroorganizmus Megvizsgált törzsek száma Nystatin Nystati n-glükóz-származék Mikroorganizmus Megvizsgált törzsek száma 1,56 3,12 6,25 | 12,5 | 25,0 | 50,0 3,12 6,25 12,5 25,0 50,0 Megvizsgált törzsek száma mcg/ml mcg/ml Candida albicans 24 óra letelte után 12 1 11 0 0 0 0 1 11 0 0 0 Candida albicans 48 óra után 12 0 2 10 0 0 0 0 0 12 0 0 Candida sp. 24 óra után 8 2 3 1 2 0 0 2 5 0 1 0 Candida sp. 48 óra után 8 0 3 1 3 1 0 0 2 3 2 1 Geotrichum sp. 24 óra után 12 0 2 10 0 0 0 0 5 7 0 0 Geotrichum sp. 48 óra után 12 0 0 5 7 0 0 0 0 9 3 0 2