166456. lajstromszámú szabadalom • Berendezés mikroorganizmusok vizsgálatára

9 166456 10 hetők meg. A foltok száma a vizsgálati minták koncentrációjának növekedtével gyarapszik. A 105 sejt/ml vagy ennél töményebb mintákkal beoltott csíkoknál összefolyó bíborvörös elszíneződés figyelhető meg. Összehasonlítva a papírcsíkokon megfigyelhető foltok számát a vizsgálati mintákban jelenlevő sejtkoncentrációval határozott és jól látható összefüggés állapítható meg. Azt találtuk, hogy a foltok száma vagy sűrűsége a minták mikroorganizmus-koncentrációjának megfelelően növekedett. A vizsgálatot klinikai vizeletmintával, frissen pasztőrözött „A" minőségű tejjel és romlott tejjel megismételve lényegileg a fentivel azonos eredményt kapunk. A papírcsíkokon található telepszám megfelel az agaragar lemezen történő tenyésztéssel és a telepek számlálásával kapott eredménynek. Ha az 1. példában ismertetett impregnáló összetételben nátriumalginát helyett más, szokásosan alkalmazott szuszpendálószereket, így különböző alginátokat, közömbös poliszahharid gumikat és kis koncentrációjú agar-agart alkalmazunk, akkor lényegileg a fentiekkel azonos eredményt kapunk: a telep szaporodása lokalizálva történik és félkvantitatív koncentrációmeghatározás végezhető. Ha a vizsgálatot szuszpendálószer nélkül készített 1. példa szerinti vizsgálóberendezéssel végezzük, akkor az inkubálás után a vizsgált összes mintánál összefolyó rózsaszín vagy bíborvörös elszíneződést figyelhetünk meg. A félkvantitatív koncentrációmeghatározásnak tehát feltétele a szuszpendálószer jelenléte a mikroorganizmusok rögzítésének biztosítására. 3. példa Differenciáló vizsgálat 20,0 g nátriumalginátot 1 liter desztillált vízhez adva az 1. példában ismertetett eljárás szerint oldatot készítünk. Az oldathoz az alábbi összetételű módosított Christensen-féle tápközeget adjuk: pepton 1,00 g glükóz 1,00 g nátriumklorid 5,00 g káliumdihidrogénfoszfát 2,00 g karbamid 20,00 g fenolvörös 0,12 g poliszorbát 80 0,1 ml (polioxietilén-szorbitán-monoleát) A fenti anyagokat alaposan összekeverjük a nátriumalginátoldattal, majd az elegyet teljes oldódásig keverjük. A kapott oldattal az 1. példában ismertetett eljárás szerint „Schleicher and Schüll No. 470" márkájú szűrőpapírt impregnálunk. Az impregnált papírcsíkokat 2 órán keresztül 40 °C-on vákuumszárítószekrényben kezelve megszárítjuk. A dehidratált impregnált papírcsíkokat tömbökre vágjuk szét, az 1. példában ismertetett módon fogantyúhoz illesztjük, tartályba helyezzük és sterilizáljuk. Felhasználáskor a fogantyút és a papírcsíkot kiveszszük a tartályból, majd a csíkokat a 2a. példa szerint előállított Proteus mirabilis, Aerobacter aerogenes és Escherichia coli tenyészetekből készített mintákba mártjuk és kb. 12 órán keresztül 36 °C-on inkubáljuk. A Proteus mirabilis baktériumokat tartalmazó mintákat vizsgálva az összes koncentrációnál összefolyó rózsaszínű elszíneződés figyelhető meg a papírcsíkokon. Az 5 Aerobacter aerogenes- és az Escherichia coli-tartalmú mintákkal inokulált csíkokon nem figyelhető meg színváltozás. 4. példa 10 Differenciáló vizsgálat 20,0 g nátriumalginátot 1 liter desztillált vízhez adva az 1. példában ismertetett módon oldatot készítünk. 15 Az oldathoz az alábbi összetételű módosított Simmonféle citrát tápközeget adjuk: ammóniumdihidrogénfoszfát 1,00 g nátriumklorid 5,00 g 20 magnéziumszulfát 0,20 g káliumdihidrogénfoszfát 1,00 g nátriumcitrát 2,00 g brómtimolkék 0,80 g poliszorbát 80 0,1 g 25 (polioxietilén-szorbitán-monooleát) A fenti anyagokat alaposan összekeverjük és feloldjuk a nátriumalginát-oldatban, majd az oldattal az 1. példában ismertetett módon „Schelicher and Schüll No. 470" 30 márkájú szűrőpapírt impregnálunk és az ott ismertetett módon vizsgálati berendezést állítunk elő. Az így készített papírcsíkokat a 3. példában ismertetett különféle koncentrációjú háromféle vizsgálati mintával inokuláljuk és rehidratáljuk, majd a csíkokat kb. 35 12 órán keresztül 37 °C-on inkubáljuk. Az Aerobacter aerogenest tartalmazó mintákat vizsgálva az összes koncentrációnál összefolyó világoskék elszíneződés figyelhető meg a papírcsíkokon. A Proteus mirabilis és Escherichia coli baktériumokat tartalmazó 40 mintákkal beoltott papírcsíkok színe változatlanul halványzöld. 5. példa 45 Differenciáló vizsgálat 20,0 g Kelzant (A „Kelco Laboratories" cég, San Diego, California, USA) által előállított lineáris poliszacharid) hozzáadunk 1 liter desztillált vízhez és oldatot 50 készítünk. Az oldathoz az alábbi összetételű módosított „Levine EMB" tápközeget adjuk, majd az elegyet oldódásig keverjük. pepton 10,0 g 55 laktóz 10,0 g dikáliumfoszfát 2,00 g eozin Y 4,00 g metilénkék 0,650 g poliszorbát 80 0,1 ml 60 (polioxietilén-szorbitán-monooleát) Az így előállított oldattal az 1. példában ismertetett módon „Schleicher and Schüll No. 470" márkájú szűrőpapírcsíkokat impregnálunk, majd az ott megadottak 65 szerint vizsgálóberendezést készítünk. 5