166293. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kvaterner (4-fluor-karbanilino-metil)- alkil- dimetilammóniumsók előállítására
7 166293 8 11. példa 6 g (4-fluor-karbanilino-metil)-decil-dimetilammóniumklorid és 80 ml víz keverékét 50—55°-on melegítjük, és az így kapott oldathoz 1 óra alatt hozzáadjuk 4,1 g nátriumnitrát 20 ml vízzel készült oldatát. Ezután a reakciókeveréket még 2 óra hosszat 50—55°-on keverjük, majd 60 ml diklóretánt adunk hozzá, és a hőmérsékletet 50—55°-on tartva a keverést 15 percig folytatjuk. A szerves fázist dekantáljuk, összesen 180 ml vízzel mossuk háromszor, és 45°-nál alacsonyabb hőmérsékleten csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott olajos maradékot hexánnal eldörzsöljük, a hexánt dekantáljuk, és a maradékot hexánnal újra eldörzsöljük, mire a termék csaknem teljesen megszilárdul. A hexánt dekantálással újra elválasztjuk, és a maradékot csökkentett nyomáson előbb 20°-on később 50°-on szárítva 6 g (4-fluor-karbanilino-metil)-decil-dimetilammóniumnitrátot kapunk. Az I általános képletű vegyületeknek értékes baktericid hatásuk van, különösen a Gram-negatív baktériumokkal, ezek közül is a Pseudomonas aeruginosa fajjal szemben. Ezenkívül gombaölő tulajdonságuk is jó, és toxicitásuk igen gyenge. Ezeket a tulajdonságaikat a következő módon mutattuk ki: Akut toxicitás A 4. példa szerint előállított (4-fiuor-karbanilino-metil)-decil-dimetilammóniumklorid, a 6. példa szerint előállítottt (4-fluor-karbanilino-metil)-dodecil-cimetilammóniumklorid és a 7. példa szerint előállított (4-fluor-karbanilino-metil)-tetradecil-dimetilammóniumklorid akut toxicitását egerekben szubkután beadás után összehasonlítottuk két ismert fertőtlenítő hatású kvaterner ammóniumsó, a benzalkóniumklorid (laurildimetilbenzilammóniumklorid) és a cetrimóniumbromid (cetiltrimetilammóniumbromid) akut toxicitásával. A vegyületeket a kísérleti állatokba 4%-os vizes oldatként injektáltuk, és a letalitást 7 napon át észleltük. A következő eredményeket kaptuk: Mindig elviselt Mindig letalis Vegyület maximális adag minimális adag DL5 „ 4. példa £ 1000 mg/kg nincs elhullás => 1000 mg/kg 6. példa S1000 mg/kg nincs elhullás => 1000 mg/kg 7. példa S1000 mg/kg nincs elhullás =-1000 mg/kg benzalkóniumklorid 50 mg/kg 80 mg/kg 65 mg/kg cetrimóniumbromid 100 mg/kg 250 mg/kg 135 mg/kg Lokális tolerancia — szembecsepegtetés után Az említett vegyületek 1/4000 koncentrációjú oldatát 8 napon át naponta szembe csepegtetve, semmiféle izgató hatást nem észleltünk. Lokális tolerancia bőrön alkalmazva Az említett vegyületek 2/1000 koncentrációjú oldatát 15 napon át naponta patkányok előzetesen szőrtelenített 5 hátára vittük fel, és ugyanakkor nylonkefével kétszer oda-vissza keféltük. Az így kezelt patkányokon semmi izgalmi hatást nem észleltünk. Ezek a kísérletek azt bizonyítják, hogy a találmány szerinti vegyületek helyileg éppen olyan jól elviselhetők, 10 mint az összehasonlításra használt két vegyület. Bakteriosztatikus tulajdonságok 15 Ezeket a tulajdonságokat a szokásos módszerek szerint, agar táptalajon fokozatos hígítással 23 baktériumfaj alkalmazásával határoztuk meg, ezek közül a következő 8 baktériumfaj Gram-pozitív volt: Bacillus subtilis (spórák) ATCC 6633 20 Bacillus cereus (spórák) ATCC 9634 Streptococcus faecalis ATCC 9854 Sarcine lutea ATCC 9341 Corynebacterium xerose CIP 5216 Staphylococcus aureus ATCC 6538 P 25 Staphylococcus aureus No. 1057 Staphylococcus auerus No. 1086 és a következő 15 baktériumfaj Gram-negatív volt: Salmonella typhi Shigella sonnei 30 Escherichia coli Escherichia coli 111B4 Klebsiella pneumoniae Enterobacter aerogenes Serratia marcescens 35 Proteus rettgeri Providencia Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Pseudomonas aeruginosa Haut. Pseudomonas aeruginosa Pon. 40 Pseudomonas aeruginosa Mou. Moraxella glucidolytica var. non liq. Moraxella lwoffi var. liq. A Gram-pozitív baktériumokkal szemben a A,, 6. és 7. példák szerint készült vegyületek gátló mennyisége 45 10 |xg/ml-nél kisebb. A Gram-negatív baktériumokkal szemben a 4. és 6. példák szerint készült vegyületek 100 (zg/ml-nél kisebb koncentrációban gátló hatásúak, és a 7, példa szerinti vegyület a legtöbb esetben 100 fjt,g/ml-nél kisebb kon-50 centrációban, és néhány törzzsel szemben 1000 ^.g/ml-nél kisebb koncentrációban bizonyul gátló hatásúnak. Összehasonlításképpen megemlítjük, hogy a hexaklorofén a Gram-pozitív baktériumokkal szemben 10 [i.g/mlnél kisebb koncentrációban gyakorol gátló hatást, de 55 Gram-negatív baktériumokkal szemben csak 1000 pig/ml koncentrációban hatásos. Baktericid tulajdonságok 60 A Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 törzsét részletesebben tanulmányoztuk, mert ez a baktérium nagyon sok fertőtlenítőszerrel szemben ellenállónak bizonyul. A bakteriológiában ismert módszerek szerint a bakté-65 riumokat baktericid hatásának tettük ki, és meghatáro-4
