165725. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új enzimkészítmény előállítására
MAGTÁR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1972. I. 18. Svájci elsőbbsége: 1971. I. 18. (733/71) Közzététel napja: 1974. V. 28. Megjelent: 1976. VI. 30. (PE-811) 165725 Nemzetközi osztályozás: C 07 g 7/026 'f <'\ a»*1 ' Feltalálók; PERCS Edmund E., vegyészmérnök, Basel, STOCKER Kurt F., vegyésztechnikus, Oberwil BL, Svájc, BLOMBÄCK Birger biokémikus, BLOMBÄCK Margaréta biokémikus, Stockholm, HESSEL Birgit biokémikus, Bandhagen, Svédország Tulajdonos: PENTAPHARM A. G. Basel, Svájc Eljárás új enzimkészítmény előállítására A találmány tárgya eljárás trombinszerű endopeptidáz hatású és az ember- és állatgyógyászatban kis adagokban vérzéscsillapítószerként, nagyobb adagokban véralvadásgátlószerként alkalmazható új enzimkészítmény előállítására, kígyóméregből. A találmány további célkitűzése annak továbbfejlesztéseként eljárás kidolgozása az enzimkészítményt hatóanyagként tartalmazó és parenterális adagolásra alkalmas gyógyászati készítmények előállítására. A találmány célkitűzése végül annak további továbbfejlesztéseként eljárás az enzimkészítményt tartalmazó olyan vegyszer előállítására, amely alkalmas emlősök vérének és különösen az emberi vérnek in vitro vizsgálatára. Az 1 094 301 lajstromszámú angol szabadalom szerint az Ancistrodon rhodostoma mérgéből trombinszerű és véralvadásgátló hatású enzim állítható elő. Ez az enzim a következő tulajdonságokkal rendelkezik: fehérjetartalmú és tiszta állapotban lényegében színtelen, gyengén bázisos anioncserélő anyagokon, így például dietilaminometilcellulózon és trietüaminoetilcellulózon adszorbeálható, fiziológiás sóoldatban oldódik, elektroforetikus mozgékonysága pH = 7,0 kémhatású 0,1 mólos foszfát puffer oldatban 3,9X 10~5 volt/cm/mp, ultracentrifugával meghatározott molekulasúlya monomer állapotban nem haladja meg a 40 000-et, 4,86 mg/cm3 töménységben ülepedési együtthatója S20 W = 3,4 Svedberg egység, parciális fajlagos térfogata 4,86 mg/cm3 koncentrációban közelítő-10 15 20 25 30 leg 0,7, in vivo trombinszerű és véralvadásgátló biológiai hatású és azt a diizopropilfluorofoszfát IX 10~3 mólos töménységben 5 percen belül szignifikáns módon nem gátolja. Vérzéscsillapító hatással rendelkeznek egyébként az Arch. Biochem Biophys 98, 95, 1962 (C.A. 59, 11529c) helyen ismertetett készítmények is. Azt találtuk, hogy a Bothrops atrox mérgéből vagy a Bothrops atrox mérgével immunulógiai keresztreakciót adó bármely más kígyóméregből olyan enzimkészítmény állítható elő, amely egyrészt megfelelően kis dózisokban vérzéscsillapítószerként hat, másrészt pedig nagyobb dózisokban az ember és más emlősök vérére közvetett alvadásgátló hatást fejt ki azáltal, hogy a hemosztázis lényeges befolyásolása nélkül lényegében eltávolítja a fibrinogént a vérkeringésből és ezért véralvadásgátlószerként alkalmazható. A találmány szerinti eljárással előállított enzimkészítmény az 1094 301 lajstromszámú angol szabadalomban ismertetett enzimmel szemben számos előnnyel rendelkezik, mint ez az alábbi ismertetésből kitűnik. A találmány szerinti eljárással előállított és kisebb adagokban vérzésgátló hatású, nagyobb adagokban pedig véralvadást gátló hatású enzimkészítményt a következő tulajdonságok jellemzik: a) trombinszerű endopeptidáz hatású; b) a készítmény peptid összetevőből és szénhidrát összetevőből áll, mimellett a peptid összetevő az egyensúlyi ultracejitrifugálás módszerével 165725 1
