165535. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új purin-származékok előállítására
23 1. példa: A) 400 mg trietilamint és 250 mg formamidin-acetátot 500 mg 4-(5,6-diammo-4-pirimidinil-amino)-4-deoxi-2,3-0-izopropilidén-D-eritronsav 10 ml metilceBoszolvval képezett szuszpenziójához adunk. A reakcióelegyet 20 percen át viszszafolyató hűtő alkalmazása mellett forraljuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A maradékot vízben oldjuk és a vizes oldat pH-ját híg sósavval 3-ra állítjuk be. A kiváló kristályokat szűrjük és vízzel mossuk. A kapott termék 250 mg 4-(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-2,3-0-4zopropUidén-D-eritronsav. Op.: 214 C° (vizes átkristályosítás után). B) 120 mg 4-i(5,6-diamino-4-pirimidinil-.amino)-4-deoxi-2,3-0-izopropilidén-D^eiitronsav 3 ml 91%-os hangyasavval képezett oldatát 1 órán át visszafolyató hűtő alkalmazása mellett forraljuk. Lehűlés után a hangyasavat vákuumban ledesztilláljuk. A maradékhoz vizet adunk és az oldószert vákuumban ismét iledesztilláljuk. A maradékhoz kevés vizet adunk, a kiváló kristályokat szűrjük, vízzel, majd metanollal mossuk és vízből átkristályosítjuk. Oszlopok alakjában 75 mg 4^(6-Hamino-5-formamido-4-pirimidinil^amino)-4-deoxi-D-eritronsavat kapunk, Op.: 190 C° (bomlás). 0,50 g 4-(6-amino-5-foiimamido-4-pirimidmil-amino)-4-deoxi-D-eritronsav 5 ml n nátriumhidroxid-oldattal képezett oldatát 10 percen ál forrásban levő vízfürdőn 10 percen át melegítjük. Lehűlés után 5 ml n sósavat adunk hozzá és a kiváló kristályokat szűrjük, majd vízzel és metanollal mossuk. A kapott termék 0,34 g 4-(6-amino-purin-9-ü)-4-deoxi-D-eritronsav. Op.: 279 C° (bomlás). [\a]^D = +30° (c=0,93, dimetilszulfoxid). UV spektrum: 2^° 261 rn.fi ,; (s = = 14,700). A fentiek szerint előállított 4-(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-D-eritronsavat Lentinus edodából frissen izolált anyaggal a következőképpen azonosítjuk : 10 kg Lentinus edodát triturálunk és 20 liter 80%-os vizes metanolt adunk hozzá. Az elegyet visszafolyató hűtő alkalmazása mellett végrehajtott extrakciónak vetjük alá a hatásos anyag izolálása céljából. Ezt a lépést kétszer megismételjük. A kapott extraktokat egyesítjük, vákuumban 6 literre betöményítjük és étert adunk hozzá. Az éteres oldat kellő rázása után a vizes réteget elválasztjuk. A vizes fázist vízzel 20 literre hígítjuk és erős savas ioncserélő gyantán {H-típusú Amberlite IR—120; kereskedelmi név) vezetjük át. A gyantát vízzel mossuk, majd 2% ammóniát tartalmazó vízzel eluáljuk. Az eluátumot vákuumban betöményítjük és liofilizáljuk. A kapott barna port (60 g) 400 ml vízben oldjuk és az oldatot erős savas ioncserélő gyantán (H-típusú Dowex 50X2; kereskedelmi név) átvezetjük. A gyantát vízzel mossuk, majd 1 n— 4 n sósavval fokozatosan eluáljuk. Az UV-spektrumban 260 m/j-nál maximumot mutató frakciókat összegyűjtjük és liofilizáljuk. A kapott 24 fehér port vízben oldjuk és az oldatot erős savas ioncserélő gyantán (H-típusú, Dowex 50X2; kereskedelmi név) ismét átvezetjük. A gyantát vízzel mossuk és 1 n—4 n sósavval fokozatosan 5 eluáljuk. Az UV-spektrumban 260 rn^-nál maximumot mutató frakciókat összegyűjtjük és liofilizáljuk. A kapott fehér iport vízben oldjuk és az oldatot erős savas ioncserélőn (H-típusú Dowex 50X2; kereskedelmi név) ismét átvezetjük. 10 A gyantát 2% ammóniát tartalmazó vízzel eluáljuk és az eluátumot liofilizáljuk. A kapott sárgásfehér port 0,1 mólos piridinacetát pufferben oldjuk. Az oldatot 0,1 mólos piridinacetát pufferrel előkezelt erős savas ioncserélőgyantán 15 visszük át. A gyantát 0,1 mólos piridin-acetát puff érrel eluáljuk. Az eluátumot 25 ml-es frakciókra osztjuk. Az UV spektrumban 260 m^nál maximumot mutató frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk. A kapott nyers kristályok vizes 20 átkristályosítása után kb. 250 mg tiszta kristályt kapunk. Op.: 279 C° (bomlás). C) 200 mg 4-(5,6-diamino-4-pirimidinil-iamino)-4-deoxi-2,3-0-izopropilidén-D-eritronsa v 1 ml 98%-os hangyasav és 1 ml formamid ele-25 gyével képezett oldatát 30 percen át visszafolyató hűtő alkalmazása mellett forraljuk. A reakcióelegyhez etanolt adunk, a kiváló kristályokat szűrjük, vízben oldjuk, a vizes oldatot aktívszénnel kezeljük és szűrjük. A szürletet 30 bepároljuk és a maradékhoz metanolt adunk. A kiváló kristályokat szűrjük és metanollal mossuk. A kapott termék 40 mg 4-(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-D-eritronsav, op.: 279 C° (bomlás). 35 A fentiek szerint előállított 4^(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-D-eritronsavat 17 ml n nátriumhidroxidban oldjuk, 40 C°-ra melegítjük és szűrjük. A szürlethez 30 ml etanolt csepegtetünk. A kiváló kristályokat szűrjük és etanollal 40 mossuk. A kapott termék 3,40 g nátrium-4-(6--amino^purin-O-il^-deoxi-D-eritronát. Op.: 272 C° (bomlás). UV spektrum:X^. 261 mju; (e = = 14,700). 45 A fentiek szerint előállított 4-(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-D-eritronsavat (500 mg) 10 ml n sósavban oldjuk. Az oldatot vákuumban bepároljuk. Az olajos maradékhoz etanolt adunk és az elegyet állni hagyjuk. A kiváló kristályokat 50 összegyűjtjük és etanollal mossuk. A kapott termék 380 mg 4-(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-D-eritronsav-hidroklorid. Op.: 198—201 C°. A fentiek szerint előállított 4-(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-D-eritronsavat (500 mg) 50 ml 55 30%-os vizes ammóniában oldjuk. Az oldatot vákuumban betöményítjük és a maradékot etanolban oldjuk. Az oldatot állni hagyjuk. A kiváló kristályokat etanollal mossuk. A kapott termék 340 mg 4-i(6-amino-purin-9-il)-4-deoxi-60 -D-eritrónsav-ammóniumsó. Op.: 265—267 C° (bomlás). D) 810 mg 4-(5-amino-6-klór-4-pirimidinil-amino)-4-deoxi-2,3-0-izopropilidén-D-eritransav 25 ml trietilortoformiáttal képezett szuszpenzió-65 jához 0,36 ml tömény sósavat csepegtetünk. Az 12
