165478. lajstromszámú szabadalom • Eljárás anyagcseretermékek előállítására növényi sejtekből fermentációval

165478 19 20 kát érintetlenül G táptalajt tartalmazó rázóedé- 28. példa nyékbe visszük, és 28 °C-on inkubáljuk. Erőteljes sejtnövekedés indul meg, átültetéssel a kívánt tulajdonságú diszperz tenyészetet kapjuk meg. Camptotiheca acuminata-ból fontos rákellenes gyógyszert, a camptotheciint kapjuk. .24. példa Sassafras alibdium diszperz szuszpenziós sejttenyészet készítése Nicotiana tabacum sejttenyészet differenciálódása és hajtáskezdemény-képzése 5 Az előző példában nyert mosott sejteket auxinmentes MS táptalajba ültetjük, majd 5 hétig csökkentett fényben, lassú rázassál (60 fordulat/ perc) inkubáljuk, amikor erélyesen növekvő zöld 10 hajtásokat kapunk. A Nicotiana tabacum-ot a nikotin alkaloida termelésére használjuk. A Sassafras alibdium fának erdőn nőtt, szunynyadó új zöld hajtását lemetsszük, felületét 70%-os etanollal, majd 1%-os nátrium-hipoklo- 15 rittal sterilezzük. A hajtásokból 2—5 mm vastag metszeteket készítünk, majd ezeket a steril metszeteket agartartalmú G táptalajra helyezzük. A keletkező hegsejteket folyékony G táptalajt tartalmazó rázóedényekbe visszük. További inkubálással diszperz, differenciálatlan sejteket és sejtcsomókat kapunk. Sassafras alibdium az ízanyagként felhasznált sassafras- és safrololajat termeli. 25. példa Differenciálatlan Artemesia absinthium sejttenyészet készítése 29. példa Differenciálatlan Lavandula officinalis szuszpenziós sejttenyészet készítése Artemesia absinthium steril magokat csíráztatunk, majd a magoncokat folyékony G táptalajba visszük, és a fentiekben leírtak szerint inkubáljuk. Hegszövetek képződnek, ezek G táptalaj- 35 ra átoltva erőteljes növekedésnek indulnak, diszperz sejteket és sejtcsomókat hozva létre. Lavandula officinalis-magak felületét 1%-os 20 nátrium-hipoklorittal sterilezzük, majd ezeket nedves szűrőpapíron csíráztatjuk. A keletkező hajtásokat 1 cm^es darabokra vágjuk fel, és ezeket 6 mg/l 2,4~diklár-fenoxi-ecetsav-tarta:lmú agárral készült MS táptalaj felszínére helyezzük. 25 6 hét elteltével a keletkező hegcsomókat folyékony MS táptalajt tartalmazó rázóedényekbe visszük, majd a további átültetéshez a legdiszperzebb tenyészetet tartalmazó edényeket választjuk ki. Egyhetes időközökben további tíz vá-30 logatást és átültetést végzünk, majd a legerőteljesebben növekvő sejteket 6 mg/l 2,4-diklór-fenoxi-ecetsavat tartalmazó LS táptalajba visszük, ahol a gyors, erőteljes növekedés folytatódik. LS táptalaj összetevő Koncentráció mg/l 26. példa Artemesia absinthium sejttenyészet differenciálódása Az előző példában nyert mosott, differenciálatlan sejteket 0,5 mg/l l-naftalin-eoetsavat tartalmazó G táptalajba oltjuk. A differenciálódás azonnal megindul, amit a gyökérkezdemények megjelenése igazol. Az Artemesia absinthium-ot vermutborok ízesítőjeként használjuk. 27. példa Differenciálatlan Nicotiana tabacum sejttenyészet készítése Nicotiana tabacum-magok felületét sterilezzük, majd a magokat nedves szűrőpapíron csíráztatjuk. A maganchajtások részeit MS agartartalmú táptalajba visszük, ahol hegsejtek képződnek. Ezeket folyékony MS táptalajt tartalmazó rázóedényekbe ültetjük át; megfelelő válogatással a differenciálatlan anyag diszperz sejttenyészetét kapjuk. ammónium-nitrát 1650 40 kálium-nitrát 1 900 kalcium-klorid 2 H2

0 440 magnézium-szulfát 7 H2

0 370 kálium-dihidrogén-f oszf át 170 vas(II)-etilén-diamin-tetraecetsav 65 45 bórsav 6,2 mangán-szulfát 4 H2

0 22,3 cink-szulfát 4 H2

0 8,6 kálium-jodid 0,83 nátrium-molibdát 2 H2

0 0,25 50 réz-szulfát 5 H2

0 0,025 kobalt-klorid 6 H2

0 0,025 szacharóz 30 000,0 kinetin 0,030 tiaminnhidroklorid 0,4 EC meso-inositol 100 kazein-hidrolizátum 1 000 auxin koncentrációja az alkalmazott auxinhatású anyagtól és a táp-6Q

talaj rendeltetésiétől függ. Az LS táptalajban a Lavandula officinalis főleg kisméretű, differenciálatlan sejtcsomókat (0,1 mm átmérő) tartalmaz, ahol a sejttérfogat 36 óránként megkétszereződik. A Lavandula offici-65 nalis-ból a levendulaolajat nyerjük.