165408. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-helyettesített 7béta-(D-5-amino-5-karboxi-vaIeramido)-7-metoxi-cef-3-em-4-karbonsav-származékok előállítására
9 H^S-termelés: MA—2837: Negatív. S. griseus (Waksman szerint): Negatív. S. griseinus (Waksman szerint): Negatív. Loeffler-féle vérszérumos ferde agar: MA—2837: Vegetatív fejlődés: cserszínű. Légrnicéliuni: gyengén sárgás. Oldható pigment: barnás. Teljes élfolyósodás. Hőmérséklet-tartomány (élesztökivonatot, dextrózt és sókat tartalmazó ferde agáron): MA—2837: 28 °C: jó fejlődés. 37 °C: jó fejlődés. 50 °C: nem fejlődik. S. griseus (Bergey szerint): Optimális hőmérséklet: 37 °C. Mikroaerofil fejlődés (élesztőkivonat-dextróz-sók táptalajon, 40 mm mélységű szúrt kultúra): MA—2837: Jó fejlődés, a kultúra a felületet borítja és a szúrás vonalának teljes hosszában is fejlődik. S. griseus (Bergey szerint): Aerob fejlődés. Nitrátok redukálása nitritekké: MA—2837: Negatív. S. griseus (Bergey szerint): pozitív. S. griseus (Waksman szerint): pozitív. S. griseinus (Waksman szerint): pozitív. A fenti felsorolásban szereplő adatok — amennyiben más nincsen megadva — 28 °C-on történő háromheti inkubáltatás után végzett megfigyeléseken alapulnak. Az e kísérletekben alkalmazott közegek pH-értéke megközelítőleg semleges, tehát 6,8 és 7,2 között volt. A fiziológiai kísérleteket 7 napos és 22 napos időtartammal végeztük. A leírásban megadott színmegjelölések a „Color Harmony Manual" 4. kiad., Container Corporation of America, 1958, színmegjelölésein alapulnak. A 810A antibiotikumot termelő törzs szénhidrát-hasznosítása : Az MA—2837 S. griseus kultúrát vizsgáltuk a különféle szénhidrátok hasznosítására, ill. asszimilálására való képessége szempontjából is; a kultúrát a T. G. Pridham és D. Gottlieb (1948) által leírt szintetikus alapközegben, 1% szénhidrát hozzáadásával, 28 °C hőmérsékleten három hétig tenyésztettük. Az alábbi táblázatban adjuk meg az egyes vizsgált szénhidrátforrásoknak az MA—2837 S. griseus kultúra általi hasznosítását, ül. asszimilálását. A táblázatban a „+" jel azt jelzi, hogy az illető szénhidrátot tartalmazó tápközegben a kultúra jól fejlődött, „±" gyenge fejlődést jelez, míg a „—" jellel jelölt szénhidrátokat tartalmazó táptalajban a kultúra egyáltalán nem fejlődött. 165408 10 Szénhidrát MA—2837 Szénhidrát MA— 2837 kultúra kultúra Glükóz+ Laktóz + Arabinóz + Inozit + Xilóz + Szacharóz •+ Maltóz + Rammóz ± Mannóz + Raffinóz ± Fruktóz — Cellulóz — Mannit + Az MA—2837 S. griseus kultúrának az előzőkben megadott morfológiai és biológiai jellemzői alapján igyekeztünk ezt a mikroorganizmus-törzset a „Bergey's Manual of Determina-20 tive Bacteriology" 7. kiad., (1957) 694—829. oldalain, valamint a „The Actinomycetes" 2. kötet (1961) 61—292. oldalain adott meghatározási kulcs felhasználásával meghatározni, ill. osztályozni. Az MA—2837 kultúrának ismert fajokkal 25 való Összehasonlítása azt mutatja, hogy ez a törzs leginkább a Streptomyces griseus mikroorganizmushoz hasonlít. Vannak ugyan morfológiai eltérések, pl. a légmicélium színe szempontjából, amely a Streptomyces griseus esetében 30 túlnyomórészt cserbarnás, sárga és zöldessárga, azonban a hasonló jellemvonások nagy számára és a csupán kisebb jelentőségű eltérésekre való tekintettel meg kellett állapítani, hogy nem lenne indokolt az MA—2837 kultúrának egy új, 35 a Streptomyces griseustól eltérő fajtanevet adni. Így tehát a fentebb leírt jellemző tulajdonságok alapján a 810A antibiotikumot termelő MA —2837 mikroorganizmust a Streptomyces griseus egy törzseként azonosítottuk (NRRL 3851). 40 A fentiekben részletesen leírt MA—2837 kultúrán kívül még további 25 kultúráról állapítottuk meg, hogy ezek szintén képesek a 810A antibiotikum termelésére. Ezek a mikroorganizmus-kultúrák az alábbi mikroorganizmus-faj ok-45 hoz tartoznak: a Streptomyces griseus három kultúrája, a Streptomyces viridochromogenes tizenegy kultúrája, a Streptomyces fimbriatus öt kultúrája, a Streptomyces halstedii három kultúrája, a Streptomyces rochei egy kultúrája, a 50 Streptomyces cinnamonensis egy kultúrája és a Streptomyces chartreusis egy kultúrája. Ezeket a Streptomyces-törzseket a Merck & Co. (Railway, New Jersey) gyűjteményében az alábbi nyilvántartási számok jelölik: MA—4160, MA— 55 4174, MA—4171, MA—4177, MA—4178, MA— 4180, MA—4164, MA—4165, MA-4166, MA— 4167, MA—2892, MA—3265, MA—4162, MA— 4163, MA—4159, MA—4169, MA—4170. MA— 4179, MA—4161, MA—4168, MA—4175, MA— 60 4181, MA—2938, MA—4176 és MA—4173. Letétbe helyeztük mindezeket az U. S. Department of Agriculture, Northern Utilization Research és Development Branch (Peoria, Illinois) hivatalos nyilvános gyűjteményében is, ahol azok a kö-65 vetkező nyilvántartási számokat kapták:
