165340. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A 2315 új antibiotikum előállítására

165340 15 Az eluátumok hatóanyag-tartalmát biológiai értékméréssel, papírkorongos agardiffúzióval, tesztorganizmusként Sarcina lutea-t használva, illetve bioautográfiával, vékonyréteg-kromatográfia (szilikagél, etUacetát és etanol 9:1 arányú elegye) után, szintén Sarcina lutea-val szemben mérve határozzuk meg. A kromatográfiás előhívást végezhetjük jódgőzzel vagy kénsawalis. 2. példa Az A 2315 jelű antibiotikum tisztítása szilikagélkromatográfiás úton Az 1. példában az A 2315 elkülönítésével kapcsolatban ismertetett eljárást a petroléteres kicsapásig megismételjük. A kapott 5 g-nyi nyersterméket körülbelül 10 ml etüacetátban oldjuk, majd átlátszó oldat előállítására metanolt adunk hozzá. Az oldatot 5x90 cm méretű, 300 g szilikagélből (Merck) etilacetáttalkészült kromatografáló oszlopon engedjük át. A szennyezőanyagok eltávolítására 2,5 liter etilacetáttal mossuk a szüikagélt. Az A 2315 antibiotikumot etilacetát és metanol 95:5 arányú elegyével eluáljuk. A hatóanyagot tartalmazó frakciókat egyesítjük és csökkentett nyomáson desztilláljuk, amikor száraz desztillációs maradékként 2,0 g súlyú fehér színű port kapunk. Ez a tiszta A 2315. A fenti oldószereleggyel folytatva az elzálást, halványsárga színű porként további 0,8 g A 2315 antibiotikumot kapunk. 16 Szabadalmi igénypont Eljárás az A 2315 jelű antibiotikum, amely fehér színű, amorf, szilárd halmazállapotú anyag; fajlagos 5 forgatóképessége .[a] ^ = -132 - 0,375%-os metanolos oldatban -; elemösszetétele: C: 61,51%, H: 7,51%, N:88,69%, O: 21,53%; tömegspektrumából meghatározott molekulasúlya közelítőleg 503; tapasztalati képlete C^ H37

N

3

0

7

;

kloroformos oldatában meg-10 határozott infravörös abszorpciós spektrumában a következő hullámhosszakon látszik jellemző elnyelési maximum: 2,81, 2,99, 3,38, 5,82, 6,02, 6,20, 6,30, 6,40, 6,66, 6,82, 6,94, 7,05, 7,30, 7,71, 8,88, 9,11, 10,41, 10,89 és 11,14 juf 95%-os etanolos oldatában 15 meghatározott ultraibolya abszorpciós spektrumában a 214 fi-os hullámhosszon látszik elnyelési maximum, mimellett E1

1

^

n

;799; metanolban és etanolban jól, vízben gyengén oldódik; hidrolíziskor alanin válik belőle szabaddá és észterezhető hidroxilcsoportokat; 20 tartalmaz; előállítására, azzal jellemezve, hogy felhasználható szénforrásokat, nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmazó táptalajon, süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények között tenyésztjük az Actinoplanes phüippinensis NRRL 5462-letétbe he-25 lyezve az Agricultural Research Service, Northern Marketing and Nutrition Research, US., Department of Agriculture, Peoria, Illinois 61604 állandó törzsgyűjteményben a fenti sorszám alatt - törzset, majd az antibiotikumot ismert módon elkülönítjük. 2 db rajz A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 75-1984 - Dabasi Nyomda, Budapest - Dabas