165337. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 17alfa- etinil- ösztriol- 3-cikloalkiléter-származékok előállítására

5 165337 6 Hasonlóan állíthatjuk elő lényegében tisztán, a 17 a-hidroxi-izomertől mentesen a 17a-etinil-ösztriol-3-ciklohexilétert is. Ahogy az előzőekben már közöltük, a 17 a-etinilösztriol-3-ciklopentiléter erős ösztrogén hatású hor- 5 mon, hatásaiban előnyös uterotrop-vaginális arány nyilvánul meg. A vegyület ösztrogén aktivitása Reuben és munkatársai módszerével vizsgálva [Endocr. 49, 429(1951)] meglepően nagy. A módszer szerint ki nem fejlődött nőstény egerek 10-es csoport- 10 jait vizsgáljuk, a hatóanyagot három napon át, injekcióban vagy a táplálékban adagolva, különböző dózisokkal kezelve a vizsgált állatokat. A kontrollcsoport szubkután injekció esetén csak az injekció vivőanyagát, kukoricaolajat vagy a mesterséges táp- 15 anyagot kapja. Az ösztrogén aktivitás mérésére a kezelt egerek méhének átlagos súlynövekedését összehasonlítjuk a kezeletlen egerekével. Csoportonként tíz egeret kezelve statisztikailag szignifikáns eredményeket kapunk. 20 Az 1. ábrán a szubkután adagoláskor kapott eredményeket tüntetjük fel. A kísérlet során használt négy vegyület: a 17a-etinil-ösztriol-3-ciklopentiléter (1-A görbe), a quinestrol (1-B görbe), a quinestradol (1-C görbe) és az ösztriol (I-D görbe). Az ábrán 25 látható, hogy a 17a-etinil-ösztriol-3-ciklopentiléter az uterus-ra kifejtett hatás szempontjából kb. háromszor olyan aktív mint a quinestrol és kb. tízszer olyan aktív mint a quinestradol. Az ösztriol még a legmagasabb dózisban adagolva is gyenge uterotrop akti- 30 vitást mutat. Az 1. táblázatban az 1. ábrán grafikusan szemléltetett adatokat foglaljuk össze, és a relatív uterotrop aktivitás kiszámításával mennyiségileg bizonyítjuk a fenti megfigyeléseket. A 2. ábrán a Reuben vizsgálat három ösztrogén 35 hormon orális adagolásával kapott eredményeit tüntetjük fel. A 2. ábra szerint a 17a-etinil-ösztriol-3-ciklopentiléter (2-A görbe) kb. hasonló aktivitást mutat orális adagoláskor mint szubkután injekcióval adagolva (1. ábra, 1-A görbe). A quinestradol (2-B görbe) aktivitása kb. 1/30 része a 17a-etinil-ösztriol-3-ciklopentiléter aktivitásának. A 17o-etinil-ösztriol ebben a dózisban orális adagolással gyakorlatilag inaktív. A három hormon orális adagolásakor mutatott aktivitásait grafikusan ábrázoló 2. ábra adatait a 2. táblázatban foglaljuk össze. A táblázat adatai alátámasztják a fenti megfigyeléseket, a 17a-etinilösztriol-3-dklopentiléter bármelyik egyszeresen szubsztituált ösztriolszármazéknál váratlanul nagyobb aktivitású. Egy további kísérlet során azt bizonyítjuk, hogy a 17a-etinil-ösztriol-3-ciklopentiléter vaginálisan páratlanul előnyös hatású. Jensen és munkatársai kimutatták [Steroids 13, 417-427 (1969)], hogy a citoplazma ösztrogén hormonokat megkötő proteinjeinek kötőképessége a patkány ösztrogén-hormonos kezelése után csökken. A kötőképesség csökkenése az ösztrogén hormon adagolása utáni 4. órában jelentős, majd a 24. órában általában azonos a kezelés előtti értékkel. Clark és munkatársai [Biochimica et Biophysica Acta 192, 508-515(1969)] leírnak egy egyszerű módszert, amellyel meghatározható a citoplazma ösztrogén hormonokat megkötő proteinjeinek mennyisége, felhasználva az ösztradiol megkötése utáni adhézív tulajdonságokat. A gyakorlatban az uterus és a vagina, két ösztrogén hormon iránti kötőképességét a következő módon határozzuk meg. 6 egyedből álló egércsoportoknak a 0. órában egyszerű szubkután injekcióval 0,3 jug/ patkány mennyiségű kísérleti anyagot adagolunk. A kontrollcsoport csak a kukoricaolaj-vivőanyagot kapja. Egy-egy csoportot 4, 24 és 48 órával a kezelés időpontja után leölünk, és a 6 patkány szöveteit 1. táblázat Szubkután adagolt különböző ösztrogén hormonok hatása a ménre A méh átlagos Vegyület Szubkután dózis súlynövekedése ± Specifikus Atg/nap mg hatás 17a-etinil-ösztrol-0,03 8,4 + 1,6 -3-ciklopentiléter 0,1 49,9 + 2,7 0,3 54,9 + 3,6 1=0 41,7 + 2,2 Quinestrol 0,1 7,8 + 3,0 0,3 36,0 + 5,9 1,0 51,1 + 3,2 3,0 37,0 + 3,0 Quinestradol 0,3 11,0 + 1,9 1,0 43,2 + 3,5 3,0 49,3 + 2,5 Ösztriol 0,3 5,2 + 0,5 1,0 7,3 + 1,1 3,0 11,8 + 2,3