165199. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fungi imperfecti törzsek extracelluláris pektinázhemicelluláz- és celluláz képzésének fokozására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 19712. X. 03. • (GO—1221) Közzététel napja: 1974. II. 28. Megjelent: 1976. IV. 30. Nemzetközi osztályozás: C 12 d 13/10 Feltalálók: Szentpéteri Ádám vegyészmérnök, 40% Bíró Eszter szakbiológus, 30% Dr. Horváth István vegyész, 15% Tölgyesi László vegyésztechnikus, 15% Budapest Tulajdonos: Gyógyszerkutató Intézet. Budapest. Eljárás Fungi imperfecti törzsek extracelluláris pektináz-, hemiceíluláz- és cellulázképzésének fokozására A találmány tárgya eljárás süllyesztett aerob kultúrában, szerves szén- és nitrogénforrást tartalmazó táptalajon tenyésztett Fungi imperfecti, célszerűen Trichoderma vir ide (MNG 97), Aspergillus otíhraceus (MNG 94), Aspergillus niger 72—4 (MNG 95), Aspergillus niger (MNG 96) törzsek extracelluláris pektináz-, hemiceíluláz- és cellulázképzésének fokozására. Ismeretes, hogy a mikroorganizmusok tenyésztése során kiválasztott enzimek mennyiségét a tenyésztési feltételek erősen befolyásolják. Az enzimképzés sebességét és a termelt enzim mennyiségét^ a táptalaj összetételének változtatásával, ill. a tenyészethez adagolt anyagokkal erősen fokozhatjuk. A kiválasztott enzim menynyisége többféle faktorból, így például a növekedés sebességétől, az enzimszintézistől, a sejtfal permeabilitásától, az enzim stabilitásától és számos más tényezőtől függ. (G. G. MEYNEL; H. GOODER: Microbiol. Reaction to Environment, 19—40., University Pr., Cambridge, 1961.) Az 1 438 605 sz. francia szabadalmi leírás szerinti eljárásban foszfatidil-inozitot adagolnak különböző baktériumok, Actinomyces-ek és fonalas gombák tenyészetéhez, aminek hatására az extracellulárisan képződött enzimek mennyisége megnő. E. J. Hsu és R. H. Vaughn [J. Bacteriol 98, 172 (1969)], illetve Haruo-Tomizawa és munkatársai [Agr. Biol. Chem. 34, (7), 1068 (1969)] leírták, 10 15 hogy az anorganikus foszfát koncentrációja a táptalajban Erwinia aeroide tenyészetben erősen stimulálja a poligalakturonsav-transzelimináz kiválasztását. Takayasu és munkatársai [Agr. Biol. Chem. 32, (11) 1395—97 (1968)] kísérletei szerint ala-' csony szénatomszámú alifás zsírsavak adagolása Erwinia aeroide tenyészethez az enzim szekrécióra hat. A találmány célja olyan eljárás biztosítása, amely jelentősen fokozza a Fungi imperfecti, előnyösen Aspergillus törzsek induktív enzimszintézisét, nevezetesen az extracelluláris enzimképzését. A különböző adalékanyagokkal végzett kísérletek során azt találtuk, hogy tributilfoszfát- (a továbbiakban TBP-) adagolás hatására a fermentlében mért enzim mennyisége jelentősen megnövekszik. Ez a felismerés azért meglepő, mert 20 a szerves foszforsavészterek élő szervezetekkel szembeni toxikus hatása már régóta ismert. [Dr. Szekeres László: Szerveskémia (1963), 124. o.] Így a TBP^adagoláskor fellépő enzimtermelésnövekedés egyáltalán nem volt várható. 25 A fentiek alapján a találmány tárgya eljárás süllyesztett aerob kultúrában, szerves szén- és nitrogénforrást tartalmazó táptalajon tenyésztett Fungi imperfecti, célszerűen Trichoderma viride (MNG 97), Aspergillus ochraceus (MNG 94), As-30 pergillus niger 72^—4 (MNG 95), Aspergillus niger 165199