165175. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tiszta, krisztályos penicillin-aciláz előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADAL LEÍRÁS I A bejelentés napja: 1972. X. 13. (BA—2813) Német Szövetségi Köztársaság-beli elsőbbségei: 1971. X. 14. (P 21 51 236.7) 1972. IV. 13. (P 22 17 745.3) A közzététel napja: 1974. II. 28. Megjelent: 1976. IV. 30. 165175 Nemzetközi 0sztáiy.0gÉs,; C 07 g 7/02® Feltaláló: Dr. KUTZBACH Carl vegyész, Wuppertal, Német Szövetségi Köztársaság Tulajdonos: BAYER AKTIENGESELLSCHAFT, cég Leverkusen, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás tiszta, kristályos penicillin-aciláz előállítására ; 1 A találmány a tiszta, kristályos penicillin-aci­láz enzimnek az Escherichia coli mikroorganiz­musokból történő kinyerésére és előállítására vo­natkozik. A penicillin-aciláz (penicillin-amidáz, peni- 5 cíllin-dezaciláz) már huzamosabb idő óta ismert enzim (vö. K. Skaguchi és S. Murao, J. Age. Chem. Soc, Japan. 23, 411, 1950), amely az „En­zyme Comission" nemzetközi nyilvántartásban EC 3.5.1.11 szám alatt szerepel, és amely 6- io -amino-penicillánsav és fenílecetsav képzése közben hidrolizálja a benzilpenicillin 6-helyzetű amidkötését. Ennek az enzimnek a jelenlétét már számos különféle baktérium és gomba sejtjeiben kimu- 15 tatták (vö. J. M. T. Hamilton—Miller, Bact. Rev. 30, 761, 1966). Az E. coli mikroorganizmusból nyert penicillin-aciláz enzim széles körű specifi­kusságot mutat; a benzilpenicillin mellett szá­mos további penicillinféleség, mint p-hidroxi- 2© benzil-penicillin és ampicillin, valamint külön­féle, az amid-nitrogénatom alifás vagy aromás csoportokkal helyettesített fenilecetsav-amidok és ezek alfa-szénatomon vagy benzolgyűrűben helyettesített származékainak hidrolízisére képes 85 (vö. M. Cole, Biochem. J, 115, 733. 1969; Kauf­mann W. és Bauer K., Nature 203, 520, 1964). Ennek az enzimnek a hatását világszerte ipari méretekben hasznosítják 6-amino-nemcillánsav­mak benzilpenicillinből történő előállítására. En- 3 * nek az eljárásnak a gyakorlati megvalósítása. edr dig vagy az enzimet tartalmazó teljes mikroor­ganizmus-sejtek alkalmazásával (vö. 1111 778 sz. Német Szövetségi Köztársaság-beli szabadalmi leírás, C. A. 75, 76782, C. A. 74, 86394, S. A, 70, 76461, C. A. 58, 13093 és C. A. 57, 10359) vagy pedig a sejtekből extrahált, de tovább nem tisz­tított enzim (vö. 3 297 546 sz. USA-beli szabadal­mi leírás) vagy a tisztítatlan, bentonitra adszor­beált enzim (vö. 3 446 705 sz. USA-beli szabadal­mi leírás) felhasználásával történt. Az utóbb em­lített leírás példái csupán a Bacillus megaterium, valamint Streptomyces-fajok sejtjeiből nyert penicillin-aciláz felhasználását ismertetik, és így ebből a leírásból nem meríthető útmutatás az E, coli mikroorganizmusból nyert enzim felhasz­nálására vonatkozólag. A fehérjék és enzimek bentoniton való ad­szorpciója önmagában ismeretes ugyan (vö. S­F, Colowick, N. O. Kaplan, Methods in Enzyp mology, I. köt. 96. old.), eddig azonban csak igen ritka esetekben sikerült az így adszorptív úton megkötött enzimet jó hozammal és megnövelt tisztasági fokban ismét ekiálni az adszorbensből. A teljes sejteknek vagy az extrahált, de tisztí­tatlan enzimnek az említett célra történő fel­használása azonban különféle hátrányokkal jár. Ilyen hátrányként mutatkozik különösen a kiin­dulási anyagként alkalmazott penicillin egy ré­szének a ny«rs enzünkészítményben \jel#nJewß 165175

Next

/
Oldalképek
Tartalom