165152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás baktérium-táptalajok és reagensek előállítására

165152 Az I. hidrolizátum készítésénél megmaradt üledékes anyaghoz 1,500,0 ml 3 n nátriumhidroxidot elegyítünk, 110 C°-on autoklávozzuk, majd 24 órás, szobahőmérsékleten végzett ülepítés után az oldat tisztájából 1,500,0 ml-t különítünk el. Ez a III. 5 hidrolizátum. Az üledékes maradékot elöntjük. IV. hidrolizátum: A II. hidrolizátum készítésénél félretett üledékes maradékhoz 1,500,0 ml 2 n sósavoldatot elegyítünk, s az elegyet 10 percig 110 C° hőmérsékleten autoklá- 10 vozzuk. 24 órás, szobahőmérsékleten végzett ülepítés után az oldat tisztájából ugyancsak 1,500,0 ml-t tartunk meg. A maradékot elöntjük. Májlé: Tisztított marhamáj megőrölt anyagából 2,000,0 15 g-ot 4,000,0 ml kútvízbe teszünk, az egészet 16 órás időtartamra félretesszük. Az így „macerált" anyagot 10 perces, 110 C°-os autoklávozásnak vetjük alá, majd 20 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk és a folyadék tisztájából 3,300,0 ml májlét különítünk 20 el. Az üledékes maradékot eldobjuk. Sókeverék: Tetszés szerinti sorrendben összekeverünk 2,000,0 g konyhasót, 120 g dinátriumhidrofosztátot, 40,0 g káliumdihidrofoszfátot, 24,0 g magnéziumszulfátot, 25 24,0 g nátriumbikarbonátot, 12,0 g kalciumkloridot, 8,0 g ferrokloridot, 8,0 g ferriammóniumcitrátot, 8,0 g ferroammóniumszulfátot, 8,0 g náriumnitrátot, 8,0 g káliumjodidot, 8,0 g nátriumtioszulfátot, 8,0 g nátriumszulfátot és 4,0 g vízmentes rézszulfátot. Ily 30 módon 2,280 g sókeveréket állítunk elő. Defibriánált marhavér: Nem steril körülmények között tartott friss marhavért ugyancsak nem stril üveggyöngy-anyaggal szokásos módon deflbrinálunk. A példa szerinti táptalaj 35 készítéséhez 1,000,0 ml defibrinált marhavért tartunk meg. 2. példa Friss politrop-agar készítése. 40 500 ml-es steril lombikba helyezünk 3 db 1 g-os agar-tablettát, rnajd hozzáadunk 300 ml desztillált vagy nem klórozott jóminőségű kútvizet és szobahőmérsékleten állni hagyjuk addig, amíg az agar-tabletta szétesik. 45 Az egészet jól összekeverve 1—2 percig 110 C°-os gőzben autoklávozzuk, majd újra megkeverjük és szobahőmérsékleten hűlni hagyjuk kb. 60 C°-ra. Ezen lehűtött vizes agaroldathoz adjuk az alábbiak szerint készített konzerv politrop táptalaj 110 ml-ét 50 steril körülmények között. Az így elkészült kész táptalajt sterilen szétosztjuk 7x100 mm-es steril „Vidal"-csövekbe úgy, hogy a táptalaj a fenék és a dugó közötti távolság feléig érjen. Utána a táptalajt „magas-ferdére" merevítjük oly 55 módon, hogy a ferde és a magas rész egyforma hosszú legyen. A konzerv politrop készítése: Szokásos módon, vízzel táptalajt készítünk tetszés szerinti méretben, amely kb. 10%-nyi szárazanyagot 60 tartalmaz az alábbi súlyarányban: ólomacetát nátriumszulfit nátriumtioszulfát nátriumszulfid 10 14 2 arányú keverékből 0,05 0,1 ferroammóniumszulfát ferriammóniumcitrát egyenlő arákeverékből 0,01 ferriszulfát 0,02 dl-cisztein-HCl 0,005 Wasserblau, kinakék, krezol-vörös ésfenolftalein indikátorkeverék pepton 1,2 arányú húskivonat 0,6 keverékét sörélesztőtartalmazó kivonat 0,2 anyag 0,01 2,0 laktóz dextróz karbamid 3,0 0,5 3,0 65 3. példa Szárított táptalaj készítése. A 2. példa szerinti konzerv-politrop táptalajt szárított táptalaj-formában úgy készítjük el, hogy az érzékeny ólomacetátot; a nátriumszulfit-, nátriumtioszulfát-, és nátriumszulfid-keveréket; a ferroammóniumszulfát és ferriammóniumcitrát keverékét; a ferriszulfátot, az indikátorkeveréket, a 2. példában megadott mennyiségben tetszés szerinti magas koncentrációjú oldatban elkészítjük, majd a pepton-húskivonat-, és sörélesztő-kivonat-keveréket tartalmazó leveshez adjuk. Az így egyesített anyagot liofilizálással vagy nirózással szárítjuk. A kapott porhoz adjuk a laktóz, dextróz és karbamid 2. példában megadott mennyiségeit pornemű vagy kristályos állapotban. A keveréket homogenizáljuk, szükség esetén porítjuk. A táptalajhoz szükséges agar-szárítmányt úgy készítjük, hogy a szálas agárból — minőségétől függően - 2,5-3%-os oldatot készítünk, 110 C°-on történő autoklávozással. A még forró oldat pH-értékét 7,3-ra állítjuk be, majd rövid ideig állni hagyjuk. Állás közben pelyhes csapadék keletkezik az oldatban. Vattán szűrjük, hagyjuk megdermedni, majd apró -1 -2 cm-es — kockákra vágjuk és beszárítjuk (célszerűen vákuumban). Ezután porítjuk, végül tablettázzuk. Az így készített szárítmányból friss politrop táptalajt úgy készítünk, hogy agar-tablettához (pl. 7 dbhoz) desztillált vizet (pl. 400 ml-t) adunk, az anyagot 10 percig 110 C°-on autoklávozzuk, majd a kapott tiszta agar-oldathoz adjuk a táptalajpor arányos (jelen esetben 12 g) mennyiségét. A kapott folyadékot kémcsövekben pipettázzuk és magas-ferdére merevítjük. 4. példa Táptalaj készítése a karbamid bontásának mikrodiagnosztikus vizsgálatához. Az 1. sz. példa szerinti táptalaj-koncentrátum 50,0 ml-éhez 5,0 ml 1%-os alkoholos brómtimolkék-oldatot, 5,0 ml 2%-os vizes savanyú fuxin-oldatot, 38,0 g karbamidot, és 250,0 ml steril desztilláltvizet adunk, s 10,0 percig kíméletes sterilezésnek vetjük alá, majd (amennyiben az így készült anyag pH-ja eltérő) beállítjuk 6,6—6,8 körüli értékűre. E táptalajt -célszerűen műanyagampullába - letöltjük. E táptalaj 4