165070. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antitrombin III.elkülönítésére vérből és vérfrakciókból adszorpció útján
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1972. IX. 8. Svédországi elsőbbsége: 1971. IX. 8.(11350/1971) KA-1355 Közzététel napja: 1974.1. 28. Megjelent: 1975. XI. 30. 165070 Nemzetközi osztályozás: C 07 g 7/026 Feltalálók: Dr. ANDERSSON Lars-Olof biokémikus, Knivsta, Dr. M1LLER-ANDERSSON Maggie biokémikus, Jakobsbeig, Svédország Tulajdonos: Aktiebolaget KABI Stockholm, Svédország Eljárás antitrombin III. elkülönítésére vérből és vérfrakciókból adszorpció útján 1 A találmány tárgya eljárás antitrombin III. elkülönítésére vérből és vérfrakciókból adszorpció útján. Közelebbről a találmány antitrombin III. vérből vagy vér alapanyagú termékekből szulfatált szénhidrátot tartalmazó gélszerű mátrixon végzett adszorbeálására 5 szolgáló eljárásra vonatkozik. A vér koagulálása bonyolult folyamat számos összetevővel. Véralvadék képződését számos stimuláló hatás előidézheti, ezek közül a leggyakoribb a számos véredény egyikének mechanikai sérülése. A koagulálás 10 megindulása ezután részben a vér bizonyos faktorjainak kontakt aktiválódása, részben a megsérült helyen kiszivárgó szövetaktivátorok hatásának következménye. A vérrögök egyidejű aggregálódása szintén elősegíti a koagulálás megkezdődését. Reakciólánc 15 indul meg, melynek eredményeképpen a sérülés helyén a vér megalvad. A fibrin alvadék képződésének egyik utolsó és legfontosabb lépcsője a trombin hatása, mely a koagulálási folyamat során képződő enzim, és melynek hatására a fibrinogénről két kisebb 20 peptid frakció hasad le, így modifikált fibrinogen képződik, mely gyorsan alvadékká aggregál. A vér koagulálási hajlamának szabályozására és a teljes intravaszkuláris koagulációt megakadályozó helyi koagulálás megelőzésére a vér számos olyan anyagot 25 tartalmaz, melyek gátolják a koagulációt. Ezek között az anyagok között a legfontosabb az antitrombin III., mely a trombinnal reakcióba lépő és azt inaktívvá tevő fehérje. Az inaktivált trombin viszont már nem támadja meg a fibrinogént és így az alvadékképződés elmarad. 30 Patológiásán lecsökkent antitrombin III.-szint számos esetben megfigyelhető, például nagyobb műtét után, aminek következtében a trombózis veszélye nagymértékben megnő. Számos megfigyelés alapján megállapítható, hogy az ilyen esetek kezelésére antitrombin Hl.-mal végzett terápia igen jó eredményekhez vezet. Csökkent antitrombin III.-szint állapítható meg bizonyos szteroid típusú gyógyszerek szedése esetén is. Napjainkig antitrombin III.-t csak igen kis mennyiségekben sikerült izolálni, és így következésképpen viszonylag kevéssé ismert. Az ismert eljárások igen bonyolultak és termelési hányaduk igen alacsony, így például 1—2%. Ismeretes például, hogy hagyományos biokémiai módszerekkel is elkülöníthető antitrombin III. [Dr. Monkhouse, F. C: „Antithrombin in Blood Clotting Enzymology" W. S. Seegers kiadóvállalat, 323. ol.(1967)];Dr. Monkhouse, F. C. és Milojevic, S.: „The Relation between Plasma antithrombin and Heparin—Cofactor" („A plazma antitrombinja és a heparin-kofaktor közötti viszony"), Can. J. Physiol. Pharmacol., 46, 347-350 (1968); valamint Dr. Abilgaard, V.: „Purification of two Progressive Antithrombins of Human Plasma" [„Az emberi vérplazma két hatékony antitrombinjának tisztítása"), Scand. J. Clin. Lab. Invest., 19, 190 (1967)]. Az említett módszerekkel azonban az antitrombin III. igen nehezen különíthető el az albumin szérumból, minthogy izoelektromos pontja és molekulájának mérete igen hasonló. A következőkben ismertetett 165070 1
