164988. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új atibiotikum előállítására
19 164988 20 Szinreakció: a) Kaliumpermanganat oldat: elszinteleníti; b) ferriklorid reagens: pozitív; c) Dragendorff reakció: pozitív; d) ninhidrin reagens: negatív. PKa' érték: 9,1 (dimetilszulfoxid és víz 7:2 arányú oldatában mérve). Szín: enyhén sárga. Vékonyréteg kromatográfia: 10 a) futtató oldószer e'legy: benzol-kloroform-metanol 70:28:2 arányú elegye; b) a vékonyréteg: kész szilikagél lemezek, (Tokyo Kaséi Co., Japán gyártmány). S súly%-os metano- 15 los oxálsavba mártjuk, metanollal mossuk és szobahőmérsékleten szárítjuk; c) detektálási módszer: bioautográfiához Bacillus subtilis-t használunk. d)Rf érték 0,25 20 Anti-trichomonas aktivitás: A Trichomonas vaginalis No 4F-el szemben mutatott minimális gátló koncentráció 0,062 meg/ml. ?5 10. példa Szilikagél lapokat (Merck et., Co., NSZK gyártmány, 0,2 x 20 x 20 cm méretű) 5 súly%-os oxálsavas metanolba merítünk, metanollal mossuk és szobahő- X mérsékleten szárítjuk. A 8. példában kapott nyers por 0,03 g-ját kismennyiségű 20:1 arányú kloroform-metanol elegyben oldjuk és a lap alsó részén egy egyenes vonalat festünk vele. Futtató szerként benzol-kloroform-metanol 70:80:2 arányú elegyét használjuk. A ib szilikagél kb. 0,2 Rf érték körüli részét, mely a Trichomonas és a Bacillus sultüis-al szemben aktivitást mutat, kikaparjuk és etilacetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, ezután az oldószert eltávolítjuk. A h maradékot kloroform és metanol elegyéből átkristályosítva 0,015 g T-24-146 kristályokat kapunk. //. példa ib A 3. példában kapott 0.5 g kristályos port kis mennyiségű tetrahidrofuránban oldjuk es a/ oldatot 500 g Sephadex LH -20 géllel (Pharmacia, Svédország gyártmány) telített oszlopra vezetjük, melyet oxálsav- b0 val impregnáltunk. Az oszlopot tetrahidrofuránnal eluáljuk. Az antitrichomonas aktivitást mutató frakciókat összegyűjtjük, csökkentett nyomáson betöményítjük és metanollal mossuk. Ez a termék 0,3 g enyhén sárga port ad. ,r} A port kloroform és metanol elegyéből kristályosítjuk, majd tetrahidrofurán és metanol elegyéből átkristályosítjuk, ezáltal 0,2 g színtelen lapocskákat kapunk, melyek a következő tulajdonságokat mutatják: Olvadáspont: 168-170°C (bomlik), Elemi analízis: C, 71,63 71,87, H, 6,81,6,82; N, 2,35, 2,36; O, 18,44, Molekulasúly: gőznyomásos ozmózis módszerrel etilacetátban mérve: 548. Specifikus forgatóképesség: [aß3 =878° (C = 0,52%) kí'Totormban meive), PKa' érték: 8,8 (dimetilszulfoxid és víz 77:22 arányú oldatában mérve). Ultraibolya abszorpciós spektrum: maximális abszorpció \ MeOH _-jt1 _.,. ,£» v A ^ -311 m/i, elnyelés: E/*„= 2120. nMX Anti-trichomonas aktivitás: A Trichomonas vaginalis No 4F-el szemben minimális inhibitoi koncentráció 0,062 mcg/ml. 12. példa A 3. példában kapott kristályos por 50 g-ját kis mennyiségű tetrahidrofurán-etilacetát 1:3 arányú elegyében oldjuk és az oldatot egy 700 g alumíniumoxiddal (Merck et. Co., NSZK, gyártmány, aktivitás: II—III) telített oszlopra visszük, melyet előzőleg oxálsawal impregnáltunk. Az oszlopot etilacetáttal eluáltuk. A 310 m^-nél erős ultraibolya abszorpciót mutató frakciókat összegyűjtjük, vizzel mossuk, szárítjuk, csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot metanollal mossuk. Ez a termék 25 g enyhén sárga port ad. Ezt a port kloroform és metanol elegyéből kristályosítjuk, majd tetrahidrofurán és metanol elegyéből átkristályosítjuk, így 20 e színtelen lapocskákat kapunk, melyek a következő tulajdonságokat mutatják: Olvadáspont: 168-173°C (bomlik). Elemi analízis: C. 72, 14 72.06; H. 695,6,94; N, 2,38, 2.35:0, 17.77; Molekulasúly: gőznyomásos ozmózis módszerrel etilacetátban mérve: 556. Specifiku« forsatóképessée' la]D •893,3° (C=0,51%) (Kloroloriurnii. mci.«. > PKá' érték: 8.8 (dimetilszulfoxid és víz 77:22 arányú oldatában mérve). Ultraiholva abszorpciós spektrummaximális abszorpció: AJJ^ = 311 nui l'/í elnyelés: E =2160. 1 cm Anti-trichomonas aktivitás: A trichomonas vaginalis No. 4F-el szembeni minimális inhibitor koncentráció: 0.062 mcg/ml ÍJ. példa A 3. példában kapott nyers por 50 g-ját kis mennyiségű tetrahidrofurán - etilacetát 13 arányú elegyében feloldjuk és a/ oldatot egy 1500 g szilikagéllel telített (Merck et. Co.. NSZK. gyártmány, 70-325 mesh szemcse átmérőjű) oszlopra visszük. Az oszlopot etilacetáttal eluáljuk. A 310 nuz-nál erős ultraibolya abszorpciót mutató frakciókat össze-10
